王紅權(quán)，詹杰

(湖北省荊門市第二人民醫(yī)院血液風濕免疫內(nèi)科，荊門 448000)

白芍總苷治療類風濕關節(jié)炎藥理作用及機制

王紅權(quán)，詹杰

(湖北省荊門市第二人民醫(yī)院血液風濕免疫內(nèi)科，荊門 448000)

近年研究表明白芍總苷(TGP)治療類風濕關節(jié)炎(RA)可取得理想療效。該文對TGP的抗炎作用、調(diào)節(jié)由T淋巴細胞介導的細胞免疫和由B淋巴細胞介導的體液免疫等藥理作用，及治療RA的機制，如TGP對白細胞介素(IL)-1的抑制作用，TGP對IL-2的雙向調(diào)節(jié)作用，TGP對IL-17的調(diào)節(jié)作用，TGP對腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的抑制作用，TGP對核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)活化的調(diào)控作用，TGP對關節(jié)滑膜細胞增殖的抑制作用等予以綜述。

白芍總苷；關節(jié)炎，類風濕；細胞因子

白芍總苷(total glucosides of Peony，TGP)是從傳統(tǒng)中藥白芍(PaeonialactifloraPall.)中提取的有效成分，其藥效成分單體主要為一組單萜糖苷類物質(zhì)，包括芍藥苷(paeoniflorin，PF)、芍藥內(nèi)酯苷(albiflorin)、羥基芍藥苷(oxypaeoniflorin)、苯甲酰芍藥苷(benzoylpaeoniflorin)，其中PF是主要有效活性成分[1-2]，約占90%以上。有資料表明，TGP除具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗應激、保肝等作用外，還能多途徑有效抑制自身免疫反應，對類風濕關節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)有確切療效，且安全、不良反應少[3-4]。TGP是具有較好應用前景的、改善病情的植物類慢作用抗風濕藥。筆者對TGP治療RA的藥理作用及其機制進行綜述。

1 TGP治療RA的藥理作用

1.1 抗炎作用 對于實驗性關節(jié)炎大鼠模型，如膠原誘導性關節(jié)炎(collagen-induced arthritis，CIA)和佐劑性關節(jié)炎(adjuvant arthritis，AA)，TGP可明顯減輕和有效抑制繼發(fā)性足腫脹、關節(jié)疼痛、多發(fā)性關節(jié)炎等急性炎癥反應，并能明顯改善其關節(jié)炎癥程度[5-8]、炎性細胞浸潤和血管翳增生現(xiàn)象[9]，以及抑制關節(jié)滑膜基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)的表達及前列腺素E2(prostaglandin E2，PGE2)等炎性因子的產(chǎn)生，從而有效抑制其炎癥應答[10]。

1.1.1 TGP對MMPs的抑制作用 MMPs在RA患者關節(jié)受損局部及滑膜高表達。實驗發(fā)現(xiàn)，TGP大、中劑量(100，50 mg·kg-1)可顯著抑制CIA大鼠關節(jié)炎足爪中MMP-9蛋白的表達[8-9]和關節(jié)滑膜中MMP-1、MMP-3的表達[6]，均呈現(xiàn)明顯劑量依賴性。由此推測，TGP可通過調(diào)節(jié)MMPs在RA滑膜組織中的表達而減輕關節(jié)炎癥反應，達到緩解并控制RA關節(jié)滑膜炎和對RA關節(jié)軟骨侵蝕性破壞的目的。

1.1.2 TGP對PGE2的調(diào)節(jié)作用 PGE2主要通過其受體EP2(E-prostanoid 2)和EP4介導興奮G蛋白(stimulatory G protein，Gs)信號通路調(diào)節(jié)細胞內(nèi)環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)水平和DNA合成發(fā)揮明顯致炎及致痛作用。在體外培養(yǎng)的大鼠滑膜成纖維樣細胞(fibroblast-like synoviocytes，F(xiàn)LS)中，TGP可通過升高細胞膜EP2受體水平，改善Gs信號通路而提高FLS內(nèi)cAMP水平，從而抑制PGE2刺激致FLS過度增殖致關節(jié)滑膜炎[11]。還可通過調(diào)節(jié)CIA大鼠體內(nèi)G蛋白-AC-cAMP信號轉(zhuǎn)導通路[10]、抑制AA大鼠滑膜細胞[12]和由脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)誘導的巨噬細胞生成PGE2[13]。在體外體系中，不同濃度TGP能不同程度地抑制由rIL-1α體外刺激下誘導的CIA大鼠FLS產(chǎn)生PGE2，提高cAMP表達水平，從而發(fā)揮抗炎作用[14]。

1.2 免疫調(diào)節(jié)作用

1.2.1 對B淋巴細胞介導體液免疫的調(diào)節(jié)作用 將不同濃度TGP經(jīng)體內(nèi)和體外兩種途徑給藥后均能降低由異源性雞Ⅱ型膠原(CⅡ)誘導CIA大鼠增高的B淋巴細胞的增殖反應和血清中抗CⅡ抗體水平，并可防止動物體內(nèi)針對自身CⅡ的IgG抗體在關節(jié)軟骨處沉積后形成免疫復合物所致的關節(jié)及組織的損傷和破壞，這些特征與人類RA更為接近[5]。在臨床中發(fā)現(xiàn)TGP可通過下調(diào)RA患者血液中作為B淋巴細胞活化標志的可溶性CD23(sCD23)的表達水平而抑制B細胞增殖活化，從而有效抑制這種前炎癥細胞因子釋放腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白細胞介素(interleukin,IL)-1、IL-6等[15]。

1.2.2 對T淋巴細胞介導細胞免疫的調(diào)節(jié)作用 梁君山等[16]研究發(fā)現(xiàn)，TGP對AA大鼠低下的脾臟T細胞功能有促進和調(diào)節(jié)作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，不同濃度TGP體內(nèi)外兩種途徑給藥時均能降低CIA大鼠增高的T淋巴細胞增殖[5]。還可通過抑制外周血T淋巴細胞表達破骨細胞分化因子(RANKL)而抑制破骨細胞(Osteoclast，OC)的分化，阻斷炎癥及骨質(zhì)損害的病理基礎，減輕實驗動物的關節(jié)炎性反應，減緩由RANKL介導的關節(jié)骨質(zhì)破壞[17]，且已有臨床資料證實[18]。可以推測，TGP可通過促進或抑制由T淋巴細胞介導的細胞免疫在RA炎癥及骨質(zhì)破壞中發(fā)揮多途徑的雙向調(diào)節(jié)作用而達到治療目的。

2 TGP治療RA的主要作用機制

2.1 TGP對IL-1的抑制作用 研究發(fā)現(xiàn)將TGP按50 mg·kg-1·d-1灌胃給藥可使AA大鼠腹腔巨噬細胞升高產(chǎn)生的IL-1水平下降[16]。近年研究發(fā)現(xiàn)，如將不同濃度TGP通過體內(nèi)給藥(50，100 mg·kg-1)和體外給藥后，均可顯著降低由LPS誘導的CIA 大鼠腹腔巨噬細胞產(chǎn)生的IL-1水平[5]，還可顯著抑制CIA大鼠滑膜細胞中因滑膜細胞超微結(jié)構(gòu)改變而產(chǎn)生的IL-1[6]和血清中IL-1β的水平[8，19]，并呈濃度相關性。提示TGP不同濃度和不同給藥途徑均對實驗性關節(jié)炎大鼠因巨噬細胞升高和滑膜細胞改變所產(chǎn)生的IL-1和IL-1β有抑制或調(diào)節(jié)作用。

2.2 TGP對IL-2的雙向調(diào)節(jié)作用 由輔助性T細胞-1(helper T cell-1，Th1)分泌的IL-2廣泛參與免疫應答的各種調(diào)節(jié)，是主要正性細胞調(diào)節(jié)因子。梁君山等[16]灌胃AA大鼠TGP 50 mg·kg-1·d-1后可使其低下的IL-2恢復到正常水平。在近年來的研究中發(fā)現(xiàn)將不同濃度TGP體內(nèi)(50，100 mg·kg-1)和體外(2.5，12.5，62.5 mg·kg-1)給藥后均可降低由刀豆蛋白(concanavalin，Con A)誘導的CIA大鼠脾淋巴細胞升高的IL-2水平[5]?？梢奣GP可對IL-2具有雙向調(diào)節(jié)作用。

2.3 TGP對IL-17的調(diào)節(jié)作用 IL-17作為一種前炎性細胞因子，在RA的炎癥及滑膜增生中可通過磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)激活核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nuclear factor-kappa B，NF-κB)進而促進成纖維細胞釋放IL-6等炎性因子，促進骨的侵蝕與破壞。劉國玲等[20]研究發(fā)現(xiàn)，TGP可通過抑制NF-κB/P65的表達下調(diào)IL-17在AA大鼠血清中的含量。由此推測，TGP可以通過間接下調(diào)IL-17這個前炎性因子的含量而降低其在RA中的致炎活性，從而減輕或阻止RA的骨質(zhì)破壞和病情進展。

2.4 TGP對TNF-α的抑制作用 TNF-α是造成RA長期關節(jié)滑膜炎癥及關節(jié)軟骨破壞的重要促炎性細胞因子。TGP可呈濃度依賴性地降低或抑制CIA大鼠外周血[7-8,19]和滑膜細胞中因滑膜細胞超微結(jié)構(gòu)改變而產(chǎn)生的TNF-α的水平[6]。還可顯著下調(diào)RA患者外周血中可溶性腫瘤壞死因子受體Ⅰ的表達[15]，從而降低TNF-α的活化狀態(tài)。

2.5 TGP對NF-κB活化的調(diào)控作用 在RA中NF-κB活化后，可啟動多種促炎基因轉(zhuǎn)錄，如IL-1、IL-2、IL-6、TNF-α、COX-2等。TGP能明顯抑制炎癥時NF-κB的核轉(zhuǎn)移，拮抗由LPS誘導的巨噬細胞NF-κB與DNA的結(jié)合活性，通過作用于多個關鍵環(huán)節(jié)達到抑制巨噬細胞NF-κB的活化[13]。還可通過阻遏NF-κB p65蛋白的核轉(zhuǎn)移和下調(diào)其表達而達到抑制由LPS誘導的巨噬細胞NF-κB的活化[21]和TNF-α、IL-1β、IL-17等炎性細胞因子的釋放及NF-κB與細胞因子作用的相互網(wǎng)絡來抑制AA大鼠關節(jié)炎癥和病理改變[19-20]。但只有大、中劑量TGP(100，50 mg·kg-1)才能顯著抑制CIA大鼠軟骨組織內(nèi)NF-κB/p65蛋白在細胞質(zhì)內(nèi)表達，小劑量(25 mg·kg-1)與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義[19]。表明TGP可呈濃度相關性的通過抑制NF-κB的活化及NF-κB p65蛋白的表達而阻止炎癥因子釋放所觸發(fā)的免疫炎性反應來發(fā)揮效應。

2.6 TGP對關節(jié)滑膜細胞增殖的抑制作用 將不同劑量TGP(50，100 mg·kg-1)體內(nèi)給藥[22]和體外給藥[23]后可顯著抑制CIA大鼠和兔佐劑性關節(jié)炎滑膜細胞增殖，還對CIA大鼠滑膜細胞亢進的分泌功能[24]和代謝能力[6]有明顯改善作用，并呈劑量依賴性。由此表明，TGP可能通過抑制關節(jié)滑膜細胞的過度異常增殖和分泌來阻止某些致炎因子觸發(fā)免疫應答，緩解或減輕滑膜炎對關節(jié)軟骨及骨質(zhì)破壞，從而發(fā)揮其對關節(jié)滑膜的保護功能，并以關節(jié)滑膜細胞為靶細胞發(fā)揮其治療作用。

3 結(jié)束語

以上表明，TGP在對RA的治療過程中可從多個環(huán)節(jié)發(fā)揮其有效藥理效應，并通過影響RA的炎癥過程、細胞免疫和體液免疫以及調(diào)控多種炎性細胞因子而減輕自身免疫性炎癥反應。TGP作為抗炎免疫調(diào)節(jié)藥，在調(diào)節(jié)RA異常的免疫功能和炎癥反應中發(fā)揮雙向免疫調(diào)節(jié)作用，并能有效抑制關節(jié)滑膜炎癥，減緩并阻止關節(jié)及軟骨骨質(zhì)破壞，并呈現(xiàn)出濃度(劑量)依賴性的特點，是RA治療中具有獨特價值的一種免疫調(diào)節(jié)藥。但目前有關TGP治療RA的作用機制基礎研究多局限于某些細胞因子，有待從分子和基因?qū)用娓钊腙U明其治療RA的作用機制。此外，TGP與其他抗風濕藥物聯(lián)用治療RA是否具有協(xié)同作用，機制如何等，有待更深入研究，為臨床聯(lián)合用藥提供科學依據(jù)。

[1] 鄭琳穎，潘競鏘，呂俊華，等.白芍總苷藥理作用研究[J].廣州醫(yī)藥，2011，42(3)：66-69.

[2] 馬麗，李作孝.白芍總苷的免疫調(diào)節(jié)功能及其臨床應用[J].中國實驗方劑學雜志，2010，16(17)：244-246.

[3] 閔偉琪，魏琴，李洪毓，等.白芍總苷治療類風濕關節(jié)炎的多中心臨床研究[J].中華風濕病學雜志，2005，9(8)：487-491.

[4] 王芬，徐建華，徐勝前，等.白芍總苷治療類風濕關節(jié)炎IV臨床試驗研究[J].安徽醫(yī)科大學學報，2001，36(4)：282-284.

[5] 朱蕾，魏偉.白芍總苷對大鼠膠原性關節(jié)炎及其免疫功能的影響[J].中國藥學雜志，2007，42(20)：1547-1551.

[6] ZHU L，WEI W，ZHENG Y Q，et al.Effects and mecha-nisms of total glucosides of paeony on joint damage in rat collagen-induced arthritis[J].Inflamm Res，2005，54(5)：211-220.

[7] 周曉濤，朱明，牟超，等.白芍總苷對佐劑性關節(jié)炎模型大鼠外周血中INF-α及sICAM-1的影響[J].新疆醫(yī)科大學學報，2009，32(12)：1677-1679.

[8] 常景芝，王琛，陳劍，等.白芍總苷對大鼠膠原性關節(jié)炎足爪組織基質(zhì)金屬蛋白酶9及血清中炎性細胞因子IL-1β及TNF-α表達的影響[J].時珍國醫(yī)國藥，2012，23(9)：2187-2189.

[9] 劉國玲，尤麗菊，葉文中，等.白芍總苷對佐劑關節(jié)炎大鼠足爪組織病理的影響及MMP-9蛋白表達的抑制作用[J].中藥藥理與臨床，2012，28(4)：51-53.

[10] 張玲玲，魏偉，汪慶童，等.芍藥苷對膠原性關節(jié)炎大鼠滑膜細胞G蛋白耦聯(lián)信號的調(diào)節(jié)作用[J].中國藥理學通報，2008，24(3)：330-335.

[11] 江慶童，馬昱琨，黃蓓，等.芍藥苷通過調(diào)節(jié)前列腺素E2受體抑制大鼠成纖維滑膜細胞增殖[J].中國藥理學通報，2012，28(1)：43-47.

[12] XU H M，WEI W，JIA X Y，et al.Effects and mechanisms of total glucosides of paeony on adjuvant arthritis in rats[J].J Ethnopharmacol，2007，109(3)：442-448.

[13] 陳剛，高雪.白芍總苷對巨噬細胞生成PGE2的影響及機制研究[J].中國藥理學通報，2011，27(4)：582-583.

[14] 常艷，魏偉，張磊，等.白芍總苷對IL-1α誘導膠原性關節(jié)炎大鼠成纖維樣滑膜細胞功能的影響[J].中國藥理學通報，2007，23(2)：185-188.

[15] 童延清，李暉.白芍總苷治療類風濕關節(jié)炎的臨床療效及對幾種可溶性細胞因子(受體)的影響[J].中華風濕病學雜志，2004，8(7)：441-441.

[16] 梁君山，陳敏珠，徐叔云.白芍總甙對大鼠佐劑性關節(jié)炎及其免疫功能的影響[J].中國藥理學與毒理學雜志，1990，4(4)：258-261.

[17] 賈敏，張寒，楊穎，等.白芍總苷對關節(jié)炎大鼠骨質(zhì)破壞及T細胞表達RANKL的影響[J].中藥藥理與臨床，2012，28(6)：62-65.

[18] 賈敏，張寒.白芍總苷對RA患者T細胞表達RANKL的影響[J].中藥藥理與臨床，2011，27(6)：36-38.

[19] 劉國玲，李宜川，沈永杰.白芍總糖苷對RA大鼠足爪組織中NF-κB/p65蛋白表達的抑制作用[J].細胞與分子免疫雜志，2010，26(11)：1082-1084.

[20] 劉國玲，張玉霞，蘆琨，等.白芍總苷對大鼠佐劑關節(jié)炎抗炎作用及機制研究[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學，2012，38(20)：5348-5350，5352.

[21] 陳剛，鄧小紅，郭莉霞，等.白芍總苷對巨噬細胞核轉(zhuǎn)錄因子-κB活化的影響及其機制研究[J].中國中藥雜志，2008，33(6)：669-671.

[22] 吳華勛，陳鏡宇，汪慶童，等.白芍總苷對膠原性關節(jié)炎大鼠滑膜β抑制蛋白的影響與其抑制滑膜細胞增殖的關系[J].中國藥理學通報，2012，28(7)：934-937.

[23] 徐紅，竇學榮，王伯松.白芍總苷對兔佐劑性關節(jié)炎滑膜細胞增殖的影響[J].泰山醫(yī)學院學報，2007，28(2)：110-112.

[24] 朱蕾，魏偉，鄭詠秋.白芍總苷對膠原性關節(jié)炎大鼠滑膜細胞的作用及機制[J].藥學學報，2006，41(2)：166-170.

DOI 10.3870/yydb.2015.02.016

2014-08-25

2014-10-24

王紅權(quán)(1982-)，男，湖北宣恩人，醫(yī)師，碩士，主要從事中西醫(yī)結(jié)合防治風濕病的臨床與基礎研究。電話：(0)15926139779，E-mail：479049726@qq.com。

R593.22；R285.6

A

1004-0781(2015)02-0199-03

DOI 10.3870/yydb.2015.02.015