卞 俊（解放軍411醫(yī)院，上海200081）

南蛇藤活性成分及藥理作用研究概況

卞 ?。ń夥跑?11醫(yī)院，上海200081）

南蛇藤屬衛(wèi)矛科南蛇藤屬植物，全國均有分布，但以長江以南地區(qū)多見。其主要的化學(xué)成分包括萜類化合物、脂類化合物、苷類化合物及黃酮類化合物，其藥理作用廣泛；主要的藥理作用包括抗腫瘤、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗菌、抗氧化、抗纖維化及抗生育作用等。筆者主要綜述了近幾年南蛇藤活性成分的分離，以及在上述藥理作用方面的研究進(jìn)展，以期為南蛇藤的研究與開發(fā)提供借鑒與思考。

南蛇藤；活性成分；藥理作用

南蛇藤（Celastrusorbiculatus Thunb.）系衛(wèi)矛科南蛇藤屬植物，南蛇藤屬植物全世界有50種，我國30種。我國南蛇藤屬植物分布廣泛，除新疆和青海地區(qū)未見分布記錄外，全國均有分布，以長江以南地區(qū)多見。

據(jù)最近調(diào)查［1］，我國僅黔南地區(qū)就分布有11種之多。南蛇藤的藤莖、根、果實(shí)及葉均可入藥，有祛風(fēng)除濕、活血解毒及消腫抗炎之功效。民間常用來治療筋骨疼痛、四肢麻木、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腰腿痛、閉經(jīng)、小兒驚風(fēng)、痧癥、痢疾、跌打損傷等病癥。

現(xiàn)代醫(yī)藥研究證實(shí)，南蛇藤含有多種藥理活性成分，如研究較多的萜類、脂肪類以及苷類化合物等。這些化合物具有廣泛的藥理作用，如抗腫瘤、抗炎、昆蟲拒食、抗微生物、抗氧化以及抗纖維化和抗生育作用等。現(xiàn)就近年南蛇藤的主要藥理活性成分及其藥理作用的研究概況做一綜述。

1 南蛇藤主要化學(xué)成分及活性物質(zhì)

1.1萜類化合物 倍半萜化合物是從南蛇藤中分離提取較多的一類化合物，主要存在于南蛇藤的根皮、葉和種子中。這類化合物的主要結(jié)構(gòu)類型為二氫沉香呋喃，由于其母核上可形成不同的取代基，包括羥基、乙酰氧基、苯甲酰氧基、呋喃酰氧基、肉桂酰氧基、異丙酰氧基、異丁酰氧基和異戊酰氧基等，常連在二氫沉香呋喃倍半萜骨架上，可形成不同類型的二氫呋喃倍半萜［2］。王明安等［3］從南蛇藤種油中分離出昆蟲拒食的倍半萜多酯，經(jīng)NMR、X線衍射鑒定有1α，6β-二乙酰氧基-9β-苯甲酰氧基-β-二氫沉香呋喃、1α，6β-二乙酰氧基-9β-肉桂酰氧基-β-二氫沉香呋喃、1α-乙酰氧基-6β，9β-二苯甲酰氧基-β-二氫沉香呋喃、1α，2α-二乙酰氧基-9β-肉桂酰氧基-β-二氫沉香呋喃、1α-羥基-2α-乙酰氧基-9β-肉桂酰氧基-β-二氫沉香呋喃和1α-乙酰氧基-2α-羥基-9β-肉桂酰氧基-β-二氫沉香呋喃等6種二氫沉香呋喃化合物。這類倍半萜多酯具有殺蟲、昆蟲拒食、抗腫瘤等多種生物活性。

三萜類化合物主要存在于南蛇藤的根皮中［4］。從南蛇藤根的石油醚提取物中分離鑒定了扁蒴藤素（pristimerin）。從南蛇藤根的甲醇提取物中分離并鑒定出orbiculin H、I、A、D、E、F，以及南蛇藤素（celastrine）、南蛇藤醇（celastrol）、雷公藤紅素（tripterine）和celaphanol A。張磊等［5］利用硅膠和凝膠色譜Sephadex LH-20柱層析技術(shù)從寬葉短梗南蛇藤中分離得到了9個(gè)三萜類化合物，經(jīng)核磁共振、質(zhì)譜等檢測(cè)方法鑒定為β-香樹脂醇、齊墩果酸、12-齊墩果烯-3-酮、12-齊墩果烯-3β，11β-二醇、羽扇豆醇、20（29）-羽扇豆烯-3-酮、20（30）-羽扇豆烯-3β，29-二醇、29-羥基-20（30）-羽扇豆烯-3-酮、羽扇豆醇棕櫚酸酯。李建娟等［6］則采用硅膠、Sephadex LH-20和ODS柱色譜方法，從南蛇藤莖中分離得到一個(gè)新的三萜類化合物3β-hydroxy-2-oxoolean-12-ene-22，29-lactone。張立等［7］于2013年首次從南蛇藤的根部分離得到木栓烷酮和28-羥基木栓烷酮。張穎等［8］通過超聲提取工藝聯(lián)用毛細(xì)管電泳技術(shù)測(cè)定2種三萜類化合物齊墩果酸（OA）和熊果酸（UA）在南蛇藤不同部位中的分布，結(jié)果顯示齊墩果酸在莖中分布最高，熊果酸在根中分布最高。這類化合物所表現(xiàn)出的藥理活性，主要有抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化及雄性抗生育作用等。

二萜類成分在南蛇藤中含量相對(duì)較少，且不易分離。馮衛(wèi)生等［2］于2002年首次從南蛇藤莖中分離得到新化合物deoxynimbidiol，證明是一個(gè)特殊的17碳二萜，其外消旋體及系列衍生物已用合成法得到，實(shí)驗(yàn)表明其衍生物具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性。2006年，又從南蛇藤莖中提取到一個(gè)新化合物celahypodiol，經(jīng)鑒定也是一個(gè)17碳二萜，該化合物也表現(xiàn)出對(duì)人類腫瘤細(xì)胞有抑制作用。

1.2脂肪類化合物 從南蛇藤根的石油醚提取物中分離鑒定了β-谷甾醇、β-香樹脂醇、β-香樹脂醇棕櫚酸酯、正十三醇乙酸酯［9］。陳青等［10］采用乙醇提取、乙酸乙酯萃取的方法，首次從穗花南蛇藤（貴州產(chǎn)）中分離并鑒定出5種化合物，即β-谷甾醇、β-香樹酯醇、β-香樹酯醇乙酸酯、30-hydroxylup-20-（29）-en-3-one和3-oxolup-20-（29）-en-30-al。南蛇藤脂類活性成分，大多表現(xiàn)有抗炎、驅(qū)蟲、抗癌等作用。

1.3苷類化合物 在南蛇藤莖的乙酸乙酯提取物中分離并鑒定出表兒茶素、表阿夫兒茶精和苯甲酰基葡萄糖表兒茶素［4］。張揚(yáng)等［11］從南蛇藤根莖（95%乙醇浸膏的正丁醇部分）分離并經(jīng)MS和NMR分析鑒定了8個(gè)苷類化合物，即3-羥甲基呋喃葡萄糖苷、大黃素-葡萄糖苷、3，4，5-三甲氧基苯酚葡萄糖苷、丁香酸葡萄糖苷、鼠李糖基-β-D-葡萄糖苷、pum ilaside A、3，4-二甲氧基苯酚-β-D-葡萄糖苷和3，4，5-三甲氧基苯酚-β-D-葡萄糖苷。如同多數(shù)衛(wèi)矛科藤屬植物一樣，南蛇藤苷類化合物主要表現(xiàn)有抗菌、鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜的藥理作用。

1.4黃酮類化合物 余曉霞等［12］在研究南蛇藤葉降血糖有效部位的化學(xué)成分時(shí)，通過柱色譜和薄層色譜分離純化化合物，用IR、MS、NMR等波譜技術(shù)鑒定結(jié)構(gòu)，結(jié)果分離并鑒定了7個(gè)化合物，分別為：山柰酚、槲皮素、山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷、山柰酚-3，7-二-O-α-L-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、楊梅苷和山柰酚-3-O-蕓香糖苷，且后3個(gè)化合物為首次從該植物中分離得到。

2 南蛇藤主要藥理作用

2.1抗腫瘤作用 從南蛇藤中提取的多種有效成分多為二萜類和三萜類化合物及生物堿類，均有較好的抗腫瘤活性，對(duì)多種腫瘤細(xì)胞株的生長、增殖有抑制作用，對(duì)一些癌基因、抑癌基因蛋白的表達(dá)也有影響。南蛇藤抗腫瘤的主要作用方式，包括抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤血管生成以及逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥等［13］。

毛建山等［14］采用M TT和流式細(xì)胞儀分析等方法，探討了粉背南蛇藤中新的三萜齊敦果二醇對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞系RKO細(xì)胞的體外增殖具有抑制作用和誘導(dǎo)凋亡作用。結(jié)果證明，南蛇藤三萜齊敦果化合物對(duì)RKO細(xì)胞生長的抑制作用呈劑量依賴性和時(shí)間依賴性。作用48 h后，腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)明顯凋亡。在10～20μg／m l濃度范圍內(nèi)，有明顯量-效作用關(guān)系，腫瘤細(xì)胞G0-G1期、G2-M期的細(xì)胞明顯減少，而S期細(xì)胞無變化。結(jié)果認(rèn)為，南蛇藤三萜齊敦果二醇能抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞系RKO細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)其凋亡。張艦等［15］利用小鼠S180肉瘤和Heps肝癌模型，經(jīng)血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量測(cè)定，觀察了南蛇藤醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物的抗腫瘤作用。結(jié)果，南蛇藤醋酸乙酯、正丁醇提取物在20 mg／m l濃度時(shí)即可明顯抑制S180和Heps腫瘤生長。

不同濃度的南蛇藤乙酸乙酯提取物作用于人胃癌細(xì)胞株SCG-7901、人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721、宮頸癌細(xì)胞株Hela細(xì)胞24 h后，對(duì)以上細(xì)胞株的增殖有不同的抑制作用。當(dāng)濃度為100μg／m l時(shí)，抑制率大于50%［16］。此外，乙酸乙酯提取物還能抑制黑色素瘤B16BL6細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)其凋亡，呈劑量依賴性，且與藥物作用時(shí)間呈正相關(guān)。濃度為320μg／m l時(shí)，最大抑制率為42.31%［17］。上述研究還顯示，南蛇藤正丁醇提取物也具有一定的抗腫瘤活性，但其活性低于南蛇藤乙酸乙酯提取物。

張華等［18］觀察南蛇藤提取物對(duì)人肝癌HCCLM 6細(xì)胞增殖和遷移能力的影響，并檢測(cè)南蛇藤提取物對(duì)HCCLM 6細(xì)胞及其培養(yǎng)上清液中血管內(nèi)皮生長因子-C（VEGF-C）蛋白表達(dá)的影響，結(jié)果顯示，南蛇藤提取物160μg／m l作用24、48 h時(shí)對(duì)細(xì)胞增殖顯著抑制，穿膜細(xì)胞數(shù)較陰性對(duì)照組明顯減少；南蛇藤提取物組各濃度和陽性對(duì)照組VEGF-C蛋白水平均低于陰性對(duì)照組，表明南蛇藤提取物能抑制HCCLM 6細(xì)胞的增殖、遷移及下調(diào)VEGF-C蛋白的表達(dá)水平，這可能是其抑制肝癌轉(zhuǎn)移的部分機(jī)制。張馨等［19］通過建立裸鼠原位人熒光蛋白肝癌移植瘤模型，從整體動(dòng)物水平探討南蛇藤乙酸乙酯提取物對(duì)人肝癌生長抑制作用的相關(guān)機(jī)制，結(jié)果表明該提取物可抑制腫瘤的生長及人肝癌細(xì)胞中VEGF-C的表達(dá)，提示南蛇藤可能通過抑制人肝癌細(xì)胞中VEGF-C的表達(dá)來抗肝癌血管形成，從而抑制肝癌細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移。趙洋等［20］則通過觀察南蛇藤素和扁蒴藤素對(duì)Fli1-GFP轉(zhuǎn)基因熒光斑馬魚節(jié)間血管生成的影響，從基因水平證實(shí)這兩種化合物對(duì)斑馬魚節(jié)間血管生成有顯著的抑制作用，且這種作用與給藥濃度呈正相關(guān)，其中南蛇藤素與扁蒴藤素比較，具有相近的新生血管抑制作用。

2.2抗炎及免疫抑制作用 南蛇藤提取物能明顯抑制：二甲苯誘發(fā)的小鼠耳郭炎癥，角叉菜膠誘發(fā)的小鼠足踝關(guān)節(jié)腫脹，醋酸導(dǎo)致的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加，以及大鼠棉球肉芽腫；并延長熱板法致痛的小鼠痛閾，減少醋酸致痛小鼠的扭體次數(shù)［21］。楊蒙蒙等［22］比較了南蛇藤不同提取物的抗炎作用，證明南蛇藤甲醇提取物對(duì)小鼠或大鼠有相同的抑制作用，而乙醇提取物則未能獲得類似的結(jié)果。

以往的研究表明，南蛇藤素對(duì)機(jī)體體液免疫、細(xì)胞免疫及炎癥反應(yīng)均具有明顯的抑制作用。徐維敏等［23］證實(shí)，南蛇藤素在體外能降低LPS誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)IL-1的活性，也能抑制ConA誘導(dǎo)的小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生的IL-2。并推測(cè)南蛇藤素對(duì)IL-1和IL-2產(chǎn)生的抑制，有可能是南蛇藤素治療某些自身免疫性疾病的有效機(jī)制之一。李孟秋等［24］研究了南蛇藤素對(duì)小鼠的免疫抑制作用及其對(duì)細(xì)胞因子IL-6 mRNA表達(dá)的影響，證實(shí)南蛇藤素在一定程度上可抑制小鼠免疫功能，能抑制炎癥細(xì)胞IL-6基因的過度表達(dá)。周鋆等［25］觀察南蛇藤素對(duì)三硝基苯磺酸誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸炎具有顯著的保護(hù)作用，并推測(cè)抑制促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生有可能是南蛇藤素的主要作用機(jī)制之一。力弘等［26］研究了南蛇藤素對(duì)膠原性關(guān)節(jié)炎的作用，通過建立大鼠足趾關(guān)節(jié)炎癥反應(yīng)模型，服用南蛇藤素15或30 mg／（kg?d），連續(xù)服用3 d，利用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)其血清抗膠原Ⅱ型抗體以及IL-1和IL-2水平的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)用藥組足腫改善，抗膠原Ⅱ型抗體、IL-1、IL-2以及遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)水平受到抑制，認(rèn)為南蛇藤素對(duì)膠原性關(guān)節(jié)炎有治療作用。張羅修等［27］利用南蛇藤素對(duì)小鼠脾細(xì)胞的體外試驗(yàn)證明，0.1～1.0μg／m l可以抑制ConA、PHA、PWM及LPS誘導(dǎo)的小鼠脾細(xì)胞增生反應(yīng)，對(duì)淋巴細(xì)胞增生有相似抑制作用，但對(duì)胸腺細(xì)胞的作用不明顯。

2.3抗纖維化作用 徐莉敏等［28］觀察南蛇藤素對(duì)全反式維甲酸（ATRA）導(dǎo)致的白血病細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附的影響，結(jié)果表明：南蛇藤素能抑制ATRA導(dǎo)致的白血病細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附，有可能用于維甲酸綜合征的治療。許晨等［29］研究南蛇藤素對(duì)狼瘡小鼠腎小球硬化的防治作用，結(jié)果表明南蛇藤素對(duì)狼瘡小鼠模型的腎小球硬化具有保護(hù)作用。其降低鼠腎組織Ⅲ型膠原和層黏素沉積可能是通過增加小鼠局部基質(zhì)金屬蛋白酶而抑制轉(zhuǎn)化因子β1 mRNA的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的。

2.4抑制血管生成作用 黃熤倫等［30］探討了南蛇藤素對(duì)血管生成的抑制作用，結(jié)果表明南蛇藤素可明顯抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞株（ECV）的體外增殖，IC50為1.33μg／m l，可抑制ECV的遷移和小管形成，并且呈明顯的劑量依耐性；同時(shí)具有抑制雞胚尿囊膜血管生成和基質(zhì)膠栓（Matrigel plug）中的血管新生的作用。周幽心等［31］認(rèn)為南蛇藤素通過阻礙DNA合成及細(xì)胞毒作用抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外增殖。南蛇藤素在體外可能通過內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子ICAM-1等的表達(dá)，從而抑制血管生成。

2.5抗菌、抗氧化作用 南蛇藤提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌，以及福氏痢疾桿菌等致病菌有顯著的抑制作用。為研究南蛇藤的體外抑菌作用，并探討提取南蛇藤有效成分的最佳工藝條件，陶虛谷等［32］分別用水煮法、醇提法和超聲波提取法提取南蛇藤有效成分，用倍比稀釋法測(cè)南蛇藤對(duì)金黃色葡萄球菌的M IC，結(jié)果表明用60%～80%乙醇，60～80℃提取36～48 h所得的南蛇藤有效成分對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用最好。

由南蛇藤根中提取的南蛇藤鞣質(zhì)對(duì)Echo流感、副流感病毒有明顯抑制作用［33］。張艦等［15］證實(shí)南蛇藤醋酸乙酯、正丁醇提取物在濃度為20 mg／m l時(shí)，除可抑制小鼠實(shí)體瘤的生長外，還可提高荷瘤鼠血清SOD活性，降低MDA水平，從而表明南蛇藤具有增強(qiáng)機(jī)體抗氧化的能力。王鴻等［34］對(duì)南蛇藤素進(jìn)行了大鼠心、肝、腎自發(fā)性丙二醛（MDA）生成的體外抗脂質(zhì)過氧化作用的研究。體外試驗(yàn)表明，對(duì)鐵離子和維生素C誘導(dǎo)的大鼠心、肝、腎組織勻漿MDA生成有明顯抑制作用，說明它能有效清除-OH，具有抗脂質(zhì)過氧化作用。

2.6抗生育作用 有關(guān)南蛇藤抗生育作用的研究報(bào)道甚少，國內(nèi)學(xué)者袁玉英等［35］首次報(bào)道了南蛇藤素能抑制豚鼠體外精子的受精能力。其研究結(jié)果證明，南蛇藤素對(duì)豚鼠精子前向運(yùn)動(dòng)（FM）、獲能（Cap）、頂體反應(yīng)（AR）和穿透去透明帶倉鼠卵（SPA）均有明顯的抑制作用，其作用強(qiáng)度隨劑量而增加；對(duì)南蛇藤素的敏感性依次為精子Cap＞FM＞SPA＞AR。南蛇藤素對(duì)AR、FM和Cap的抑制作用比乙酸棉酚（GA）明顯為強(qiáng)。

2.7其他藥理作用 南蛇藤果實(shí)具有鎮(zhèn)靜催眠作用，南蛇藤中的倍半萜酯類對(duì)昆蟲可產(chǎn)生使之拒食的作用［3］。陳星等［36］研究發(fā)現(xiàn)，南蛇藤素可減少冠狀血管介入性治療手術(shù)后狹窄的發(fā)生，即抑制血管平滑肌細(xì)胞的過度增生。這一機(jī)制被解釋為南蛇藤素可通過抑制細(xì)胞膜的Ca2＋通道而拮抗由牛血清誘發(fā)的血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)游離Ca2＋濃度升高所致。丁香等［37］研究發(fā)現(xiàn)，南蛇藤乙醇提取物具有促進(jìn)大鼠骨創(chuàng)傷愈合的作用，表現(xiàn)為增加血清鈣、磷含量和堿性磷酸酶水平，提高骨創(chuàng)傷大鼠骨痂密度和抗折力。

3 結(jié)語

近年來對(duì)南蛇藤化學(xué)成分及藥理作用的研究證明，南蛇藤在抗腫瘤、抗炎、抗氧化、抑制免疫反應(yīng)等方面有著廣闊的研究與應(yīng)用前景。尤其在抗腫瘤及抗炎方面，其作用更為顯著。在南蛇藤屬植物的開發(fā)利用上，由于其具有抗蟲和昆蟲拒食的生物活性，其驅(qū)蟲、殺蟲制劑已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，并取得了良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。南蛇藤素為南蛇藤屬植物的主要化學(xué)成分，其藥理作用十分廣泛，人們希望以此開發(fā)出具有多種治療作用的新藥。雖然南蛇藤素對(duì)許多疾病可產(chǎn)生很好的治療效果，但同時(shí)也表現(xiàn)出一定的毒副作用，以至于在臨床應(yīng)用中受到一定程度限制。因此，有必要對(duì)南蛇藤素進(jìn)行高效低毒的結(jié)構(gòu)優(yōu)化研究，使之盡早成為一種新的臨床治療藥物。

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Progress on active compositions and pharmacological effects of Celastrus orbiculatus

BIAN Jun（No.411 Hospital of PLA，Shanghai200081，China）

Celastrusorbiculatus Thunb.（Celastraceae）was widely distributed in China and more in the south area of the Yangtze River.Research showed themain chemical components including terpenoids，lipids，glycosides and flavonoids.Its pharmacological effects were extensive，which were including antitumor，anti-inflammatory，immunomodulatory，anti-fibrosis and anti-fertility etc.The separation of active compositions and advances in the pharmacological effectswere reviewed in recent years，which would be helpful in providing reference and thinking for the research and development of Celastrusorbiculatus.

Celastrusorbiculatus；active compositions；pharmacological effects

R28

A

1006-0111（2015）03-0201-05

10.3969／j.issn.1006-0111.2015.03.003

2014-09-24

2015-01-27

［本文編輯］ 顧文華

卞 俊，碩士，主任藥師，碩士生導(dǎo)師.研究方向：海洋藥物開發(fā)與利用.Tel：13585539301；E-mail：bianjun411＠163.com