章冪，章佳新，馮倩倩

(揚州大學臨床醫(yī)學院蘇北人民醫(yī)院，江蘇揚州225001)

橋本甲狀腺炎(HT)可合并發(fā)生甲狀腺乳頭狀癌(PTC)，且近年發(fā)病率呈上升趨勢。survivin是凋亡抑制蛋白家族的成員，可通過有絲分裂促進轉化細胞的異常增殖［1］。Ki-67存在于增殖細胞的細胞核中，能反映組織細胞的增殖能力［2］。本研究觀察了甲狀腺腺瘤(TA)、HT、PTC及HT合并PTC組織中survivin和Ki-67蛋白的表達，探討HT和PTC的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集蘇北人民醫(yī)院病理科2007年1月～2014年2月的甲狀腺存檔蠟塊，隨機抽取TA 20例、HT 40例、PTC 40例、HT合并 PTC 40例;均經(jīng)病理學證實，且臨床資料齊全，術前均未行任何治療。40例HT合并PTC患者中，男7例，女33例;年齡23～72歲，中位年齡47歲;臨床分期Ⅰ、Ⅱ期26例，Ⅲ、Ⅳ期14例;有淋巴結轉移17例，無淋巴結轉移23例。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 采用免疫組化SP法。純化的小鼠抗人survivin單克隆抗體，購自美國Santa Cruz公司;小鼠抗人Ki-67單克隆抗體，購自美國CST公司;DAB試劑盒由北京中杉金橋生物技術有限公司提供，染色步驟按操作說明書進行。選取5個不同高倍視野，每個視野計數(shù)100個細胞。survivin陽性染色為細胞質(zhì)或細胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。陽性細胞所占百分比 ＜5%、5%～25%、25%～50%、50%～75%、＞75%分別為 0、1、2、3、4 分，陽性細胞顯色強度無著色、輕度染色、中度染色、重度染色分別為0、1、2、3分，兩者得分之和≥2分為表達陽性。Ki-67陽性染色為細胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒，陽性細胞所占百分比≥10%為表達陽性。

1.2.2 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。組間比較行χ2檢驗，用Spearman等級相關系數(shù)描述相關性。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同甲狀腺組織中survivin和Ki-67表達情況在 TA、HT、PTC、HT合并 PTC組織中 survivin蛋白陽性表達率分別為 10.0%(2/20)、42.5%(17/40)、77.5%(31/40)、72.5%(29/40)，除 HT 合并PTC與PTC比較P＞0.05外，其余兩兩比較P均＜0.05;在 TA、HT、PTC、HT 合并 PTC 組織中 Ki-67 蛋白陽性表達率分別為 15.0%(3/20)、57.5%(23/40)、67.5%(27/40)、65.0%(26/40)，除 HT、PTC及HT合并PTC與TA比較P均＜0.05外，其余兩兩比較P均＞0.05。

2.2 survivin和Ki-67表達與HT合并PTC患者臨床病理參數(shù)的關系 見表1。

表1 survivin和Ki-67表達與HT合并PTC患者臨床病理參數(shù)的關系

2.3 HT合并PTC組織中survivin和Ki-67表達的關系 相關性分析發(fā)現(xiàn)，survivin與Ki-67的表達呈正相關(r=0.146，P=0.007)。

3 討論

流行病學表明，慢性炎癥和腫瘤關系密切，阻止癌前病變患者的慢性炎癥，可降低癌癥發(fā)生率［3～5］。Lindsay等［6］首次提出HT合并甲狀腺惡性腫瘤，指出甲狀腺惡性腫瘤可由HT發(fā)展而來，其后大量學者也證明了此觀點，并且認為HT和PTC的關系尤為緊密［7，8］。

survivin是迄今發(fā)現(xiàn)的抑制細胞凋亡最強的一種凋亡抑制因子，其主要通過兩種途徑抑制細胞凋亡:①與細胞周期蛋白激酶p34cdc2及p34cdk4發(fā)生作用，阻斷凋亡通路信號的轉導［9］;②直接通過抑制凋亡終末效應器Capase3和Capase7的活性，阻斷各種誘導的細胞凋亡過程［10］。研究發(fā)現(xiàn)［11］，survivin 在多種惡性腫瘤中均異常表達增高，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。本研究顯示，survivin在PTC和HT合并PTC組織中高表達，提示survivin基因可能參與HT合并PTC或PTC的發(fā)生、發(fā)展過程。本研究還發(fā)現(xiàn)，survivin異常表達與淋巴結轉移、臨床分期有關，表明survivin與HT合并PTC的惡性程度和不良預后有關。而本研究中，HT組織survivin蛋白也呈中等程度異常表達，提示HT可能具有一定癌變潛質(zhì)。

Ki-67在細胞 G1、S、M、G2期均有表達，為調(diào)節(jié)細胞周期存在于細胞核內(nèi)的蛋白［12］。有研究發(fā)現(xiàn)，ki-67在多種惡性腫瘤均過度表達，與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預后有關［13］。本研究結果顯示，Ki-67在PTC和HT合并PTC中異常高表達，提示Ki-67在HT合并PTC(或PTC)的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)，Ki-67表達與患者淋巴轉移和臨床分期有關，表明Ki-67可能在腫瘤的遠處轉移、侵襲中起重要作用。同時，本研究中Ki-67在HT中也呈異常高表達狀態(tài)，提示HT可能具有一定的癌變傾向。

研究發(fā)現(xiàn)，HT中有 IL-17的異常高表達存在［14，15］。在胃癌中 IL-17 可上調(diào) IL-6 水平，間接活化STAT-3信號通路，進而促進腫瘤的發(fā)生發(fā)展。岳利華等［16］研究發(fā)現(xiàn)，在淋巴瘤中異?；罨腟TAT-3不僅可促進survivin表達，也可促進Ki-67表達。提示HT在高水平的IL-17炎性因子的長期刺激下，引起STAT-3信號通路的異?；罨?，進而引起survivin和Ki-67的逐漸異常表達增高。這可能也是本研究中survivin、Ki-67在HT中呈中等程度表達的原因所在。本研究關性分析發(fā)現(xiàn)，survivin與Ki-67表達呈正相關關系，均與淋巴結轉移、臨床分期有關，提示survivin與Ki-67的關系緊密，兩者可能來自同一條通路的調(diào)控，這也一定程度印證了以上觀點。因此，HT與PTC之間關系密切，HT具有一定的癌變?yōu)镻TC的傾向，而survivin和Ki-67在HT中的異常高表達可能在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及遠處轉移等過程中起著重要作用。

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