曹 玉

南京市食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)院，南京210038

頂空進(jìn)樣毛細(xì)管氣相色譜法測定鹽酸普拉克索中的殘留溶劑

曹 玉

南京市食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)院，南京210038

目的建立鹽酸普拉克索中殘留溶劑的測定方法。方法鹽酸普拉克索中甲醇、乙醇、丙酮、異丙醇和四氫呋喃的殘留量采用頂空進(jìn)樣毛細(xì)管氣相色譜法，DB-624毛細(xì)管柱，F(xiàn)ID檢測器，柱溫采用程序升溫。結(jié)果各有機(jī)溶劑均能得到有效分離，甲醇的濃度在59.87～374.20 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9991），平均回收率為97.40％，RSD為1.26％；乙醇的濃度在100.60～628.75 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9991），平均回收率為96.79％，RSD為1.58％；丙酮的濃度在100.22～626.38 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9992），平均回收率為96.55％，RSD為1.80％；異丙醇的濃度在99.78～623.65 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9992），平均回收率為96.43％，RSD為1.55％；四氫呋喃的濃度在14.98～93.63 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9995），平均回收率為96.97％，RSD為2.22％。結(jié)論本方法可以準(zhǔn)確測定鹽酸普拉克索中的殘留溶劑，可用于鹽酸普拉克索原料藥中有機(jī)溶劑的檢測。

頂空進(jìn)樣毛細(xì)管氣相色譜法；鹽酸普拉克索；殘留溶劑

鹽酸普拉克索為非麥角類多巴胺受體激動(dòng)劑，能夠有效地激動(dòng)多巴胺D2亞群受體，并對D3受體有高度親和力，臨床用于帕金森病的治療，是目前帕金森病的一線治療藥物［1-5］。該藥口服吸收迅速完全，用藥后1～3 h達(dá)到最大血藥濃度，其生物利用度＞90％，半衰期為8～12 h［6］。原研發(fā)廠家為德國勃林格殷格翰公司，本品為口服緩釋片劑，1次/d，用于治療帕金森病［7］。為了有效控制鹽酸普拉克索的質(zhì)量和保證用藥安全，本文參考《中國藥典》二部2010版［8］有關(guān)規(guī)定，建立了頂空氣相色譜法［9－20］測定鹽酸普拉克索中殘留溶劑的方法，并進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證，結(jié)果表明，該方法簡單、準(zhǔn)確、可靠，可用于實(shí)際產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

1 儀器與試劑

Agilent 6890氣相色譜儀、DANNI Hss8650頂空自動(dòng)進(jìn)樣裝置、安捷倫色譜工作站；賽多利斯BP211D電子分析天平。四氫呋喃、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮均為色譜純。鹽酸普拉克索原料樣品由南京長澳醫(yī)藥科技有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

DB-624毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm×1.8 mm），程序升溫：柱溫40℃（維持7 min），以20℃/min升至220℃（維持5 min）。進(jìn)樣口溫度200℃，檢測器溫度250℃，氫火焰離子化檢測器，載氣為高純氮?dú)?。頂空瓶平衡溫度?5℃，平衡時(shí)間為30 min。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品儲(chǔ)備液的制備精密稱取四氫呋喃、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮各適量，置同一量瓶中，加水制成每毫升中含四氫呋喃7.2 mg、甲醇30 mg、乙醇50 mg、異丙醇50 mg、丙酮50 mg的溶液，搖勻，即得。

2.2.2 對照品溶液的制備精密量取對照品儲(chǔ)備液1.0 ml置100 ml量瓶，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.3供試品溶液的制備取供試品1.0 g，精密稱定，置10 ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3溶劑定位及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

取四氫呋喃、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮各50 μl，分別加水5 ml稀釋后，作為定位溶液；再取四氫呋喃、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮各50 μl于同一量瓶中，加水5 ml稀釋后，作為混合溶液，精密量取上述溶液及溶劑分別頂空進(jìn)樣，記錄色譜圖。各溶劑的保留時(shí)間、分離度和理論板數(shù)見表1。相鄰溶劑色譜峰的分離度均符合規(guī)定，理論板數(shù)較好（圖1）。

表1 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)結(jié)果表

圖1 鹽酸普拉克索系統(tǒng)適用性試驗(yàn)GC色譜圖1.甲醇；2.乙醇；3.丙酮；4.異丙醇；5.四氫呋喃

2.4 線性關(guān)系考察

精密量取對照儲(chǔ)備液5.0 ml置50 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)曲線母液，分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線母液0.2、0.5、0.8、1.0、1.2 ml置10 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。照上述色譜條件頂空進(jìn)樣。以各成分的濃度為橫座標(biāo)，峰面積為縱座標(biāo)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表2。

表2 5種殘留溶劑線性關(guān)系及相關(guān)系數(shù)

2.5 精密度試驗(yàn)

取標(biāo)準(zhǔn)曲線中間的濃度的溶液1.0 μl，照上述色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣5次，四氫呋喃、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮峰面積的RSD值分別為1.0％、1.9％、1.7％、1.0％、1.4％，均＜2.0％，進(jìn)樣精密度符合要求。

2.6 檢出限和定量限

取對照溶液用水稀釋成一系列低濃度的溶液，照上述色譜條件頂空進(jìn)樣，測得各溶劑的檢出限（S/N≥3）。再取各溶劑適用，精密稱定，用水稀釋成一系列低濃度的溶液，照上述色譜條件頂空進(jìn)樣，測得各溶劑的定量限（S/N≥10）（表3）。

表3 檢出限結(jié)果（GC）

2.7 回收率試驗(yàn)

取鹽酸普拉克索（批號：131101）約0.5 g共9份，分別置頂空瓶中，分別精密加入對照品儲(chǔ)備液經(jīng)稀釋20倍后溶液的0.8、1.0、1.2 ml，加水5 ml溶解，混勻，作為供試品溶液，按測定法項(xiàng)下的方法進(jìn)行測定，甲醇、乙醇、丙酮、異丙醇和四氫呋喃的平均回收率（n=9）分別為97.40％、96.79％、96.55％、96.97％、93.3％，RSD分別為1.26％、1.58％、1.80％、1.55％、2.22％（表4～表8）。

2.8 樣品有機(jī)溶劑殘留的測定

按照殘留溶劑測定法（《中國藥典》二部2010版附錄ⅧP第三法）進(jìn)樣，記錄色譜圖。6批樣品及對照品有機(jī)溶劑殘留結(jié)果3批樣品檢出異丙醇為0.04％、0.05％和0.05％，其余均未檢出。

表4 殘留溶劑甲醇測定回收率試驗(yàn)結(jié)果

表5 殘留溶劑乙醇測定回收率試驗(yàn)結(jié)果

表6 殘留溶劑丙酮測定回收率試驗(yàn)結(jié)果

表7 殘留溶劑異丙醇測定回收率試驗(yàn)結(jié)果

表8 殘留溶劑四氫呋喃測定回收率試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

3.1 頂空溫度和平衡時(shí)間的選擇

對頂空溫度70、75、80℃進(jìn)行比較，經(jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)當(dāng)頂空溫度為80℃平衡時(shí)，峰面積更大；精密度試驗(yàn)表明精密度良好，故選擇了80℃作為平衡溫度。平衡時(shí)間選用了30 min與45 min進(jìn)行比較，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)兩者無明顯差別，表明30 min已經(jīng)達(dá)到了氣液平衡，故選擇平衡時(shí)間為30 min。

3.2 色譜柱的選擇

選擇DB-624（30 m×0.32 mm×1.8 μm）和DB-624（30 m×0.25 mm×1.4 μm）色譜柱進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果使用DB-624（30 m×0.32 mm×1.8 μm）檢測時(shí)，各溶劑之間分離度均＞2.0。最終選擇DB-624（30 m×0.32 mm× 1.8 μm）。

綜上所述，本文所用方法的分離度、精密度和準(zhǔn)確度均達(dá)到相關(guān)規(guī)定，5種溶劑的檢測下限均遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會(huì)（ICH）規(guī)定的用量限制，因此，本實(shí)驗(yàn)建立的方法可以用來控制鹽酸普拉克索中有機(jī)溶劑的殘留量。

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Determination the residual solvent in pramipexole dihydrochloride by using headspace sampling capillary gas chromatography

CAO Yu
Nanjing Municipal Food and Drug Supervision and Inspection Institute，Nanjing 210038，China

Objective To establish determination method of residual solvent in pramipexole dihydrochloride.Methods Residual amount of methanol，ethanol，acetone，isopropyl alcohol and tetrahydrofuran in pramipexole dihydrochloride was used headspace sampling capillary gas chromatography，DB-624 capillary column，F(xiàn)ID detector and temperature programme was used for column temperature.Results The organic solvent can be effectively separated.The linear relationship was well when concentration of methanol in 59.87-374.20 μg/ml scope（r=0.9991）.Average recovery rate was 97.40％，RSD was 1.26％.The linear relationship was well when concentration of ethanol in 100.60-628.75 μg/ml scope（r=0.9991）.Average recovery rate was 96.79％，RSD was 1.58％.The linear relationship was well when concentration of acetone in 100.60-628.75 μg/ml scope（r=0.9992）.Average recovery rate was 96.55％，RSD was 1.80％.The linear relationship was well when concentration of isopropyl alcohol in 99.78-623.65 μg/ml scope（r=0.9992）.Average recovery rate was 96.43％，RSD was 1.55％.The linear relationship was well when concentration of tetrahydrofuran in 14.98-93.63 μg/ml scope（r=0.9995）.Average recovery rate was 96.97％，RSD was 2.22％.Conclusion This method can accurately determine residual solvent in hydrochloric acid pramipexole，and can be used for analysis of organic solvent determination of raw material medicine in hydrochloric acid pramipexole.

Headspace sampling capillary gas chromatography；Pramipexole dihydrochloride；Residual solvent

R914.1

A

1674-4721（2015）12（b）-0007-04

2015-07-16 本文編輯：許俊琴）