孔偉梁

(長(zhǎng)興縣中醫(yī)院，浙江 長(zhǎng)興 313100)

·基礎(chǔ)與臨床研究·

宮腔診刮組織中PTEN與p16的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌病理分期的關(guān)系研究

孔偉梁

(長(zhǎng)興縣中醫(yī)院，浙江 長(zhǎng)興 313100)

目的：探討宮腔診刮組織中PTEN與p16的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌病理分期的關(guān)系。方法回顧性分析我院刮宮標(biāo)本的存檔蠟塊132例不同子宮內(nèi)膜組織中PTEN與p16的表達(dá)情況。結(jié)果PTEN和p16在腺癌子宮內(nèi)膜表達(dá)率顯著低于正常子宮內(nèi)膜組織和內(nèi)膜增生癥子宮內(nèi)膜組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；PTEN和p16在手術(shù)病理分期Ⅰ期和Ⅱ期陽(yáng)性表達(dá)率均顯著高于Ⅲ-Ⅳ期，在組織學(xué)分化程度高分化陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于中分化和低分化，在肌層浸潤(rùn)深度≤1/2的癌組織陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于肌層浸潤(rùn)深度>1/2的癌組織，在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論P(yáng)TEN與p16的表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌的手術(shù)病理分期、組織分化程度、肌層浸潤(rùn)深度以及是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，可能參與了腫瘤細(xì)胞的增殖、分化過(guò)程。

PTEN；p16；表達(dá)；子宮內(nèi)膜癌；病理分期

Abstract:[Objective]To explore the relationship between the pathologic expression of PTEN and p16 in curettage speciments and the prognosis of endometrial carcinoma. [Method] The expressions of PTEN and p16 in 132 cases of curettage specimen in parafin section were retrospective analyzed. [Result]The expression rate of the PTEN and p16 in adenocarcinoma of endometrium were significantly lower than in normal endometrial tissue and in endometrial hyperplasia endometrium tissue(P<0.05). The positive expression rate in surgical pathologic stage I and II were significantly higher than in stage III and IV in p16(P<0.05). The positive expression rate in high histologic differentiatedtissue wassignificantlyhigher than in moderately differentiated and poorly differentiatedtissue (P<0.05). The positive expression rate in moderately differentiatedtissues was significantly higher than in poorly differentiatedtissues(P<0.05). The positive expression rate in carcinoma tissue with muscular infiltration depth≤1/2 wassignificantlyhigher than in carcinoma tissue with muscular infiltration depth>1/2(P<0.05). The positive expression rate incarcinoma tissuewith no lymph node metastasis was significantly higher than with lymph node metastasis(P<0.05). [Conclusion]Thereare close relationship between the pathologic expression of p16 in curettage speciments and the prognosis of endometrial carcinoma.The gene expression may be involved in tumor cell hyperplasia and atomization andmay be related with the prognosis of endometrial carcinoma.

Keywords: PTEN; p16; expression; endometrial cancer; pathological stage; prognosis

子宮內(nèi)膜癌是婦科常見(jiàn)生殖道惡性腫瘤之一，多發(fā)于絕經(jīng)后婦女，嚴(yán)重威脅女性身體健康[1]。研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞張力蛋白同源的磷酸酯酶(Phosphatase and Tension Homolog Deleted on Chromoson10,PTEN)和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4抑制基因(p16)均可參與細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程，引起細(xì)胞生長(zhǎng)失控而引發(fā)癌變[2]?，F(xiàn)回顧性分析我院收治的子宮內(nèi)膜癌患者宮腔診刮組織中PTEN與p16基因的表達(dá)情況，探討二者與子宮內(nèi)膜癌的病理分期的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年6月至2014年6月我院刮宮標(biāo)本的存檔蠟塊132例作為研究對(duì)象。所有患者手術(shù)前均未接受過(guò)放療或化療或性激素治療，且無(wú)其它惡性腫瘤。患者年齡為35～71歲，平均年齡為(57.51±8.44)歲，其中正常子宮內(nèi)膜(均為增生期)30例，增生癥子宮內(nèi)膜(包括單純、復(fù)合及不典型增生)40例，子宮內(nèi)膜腺癌62例。手術(shù)病理分期：按照國(guó)際婦產(chǎn)科協(xié)會(huì)(FIGO)修訂的子宮內(nèi)膜癌手術(shù)分期標(biāo)準(zhǔn)[3]，Ⅰ期26例、Ⅱ期16例、Ⅲ-Ⅳ期20例，組織學(xué)分化程度高分化(G1)26例、中分化(G2)24例、低分化(G3)12例，肌層浸潤(rùn)深度≤1/2的有30例，20例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

1.2 方法

所有診刮標(biāo)本存檔蠟塊均重新制成4μm厚切片2份，其中1份進(jìn)行HE染色，在光鏡下復(fù)查病理結(jié)果；另一份進(jìn)行免疫組化SP法染色[4]，染色方法按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，抗體為PTEN 單克隆抗體和p16單克隆抗體，抗體濃度為1:100，以PBS磷酸鹽緩沖液代替一抗作陰性對(duì)照，使用已知陽(yáng)性片作為陽(yáng)性對(duì)照[5]。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察PTEN和p16在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)情況，比較分析PTEN和p16的表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌臨床病理指標(biāo)及預(yù)后的關(guān)系。

PTEN陽(yáng)性染色標(biāo)志：胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒，少數(shù)可出現(xiàn)胞質(zhì)染色，偶可見(jiàn)細(xì)胞膜染色。p16陽(yáng)性染色標(biāo)志：細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒，偶爾可出現(xiàn)胞核染色[6]。2組均使用顯微鏡高倍鏡，挑選10個(gè)具有代表性的視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞，無(wú)陽(yáng)性染色的細(xì)胞為陰性，陽(yáng)性染色>10%的細(xì)胞為陽(yáng)性(10%～50%為弱陽(yáng)性，>50%為強(qiáng)陽(yáng)性)[7]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PTEN和p16在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)

PTEN和p16在正常子宮內(nèi)膜組織中表達(dá)率與內(nèi)膜增生癥子宮內(nèi)膜組織中比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；PTEN和p16在腺癌子宮內(nèi)膜表達(dá)率顯著低于正常子宮內(nèi)膜組織和內(nèi)膜增生癥子宮內(nèi)膜組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1、表2。

表1 PTEN、p16在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)[陽(yáng)性(%)]

表2 PTEN、p16在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)[陽(yáng)性(%)]

2.2 PTEN和p16的表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系

PTEN和p16在手術(shù)病理分期Ⅰ期陽(yáng)性表達(dá)率與Ⅱ期表達(dá)率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；PTEN和p16在手術(shù)病理分期Ⅰ期和Ⅱ期陽(yáng)性表達(dá)率均顯著高于Ⅲ-Ⅳ期，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；PTEN和p16在組織學(xué)分化程度高分化陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于中分化和低分化，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；PTEN和p16在肌層浸潤(rùn)深度≤1/2的癌組織陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于肌層浸潤(rùn)深度>1/2的癌組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；PTEN和p16在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 PTEN、p16的表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系[陽(yáng)性(%)]

3 討論

PTEN基因?qū)儆谛盘?hào)通路的抑制因子，具蛋白酪氨酸激酶和脂質(zhì)磷酸酶雙重活性。PTEN能夠抑制4，5-雙磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)向3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3)的不正常轉(zhuǎn)換，維持PIP3的低水平，阻斷Akt及其下游激酶的活性，促使細(xì)胞凋亡[8]；PTEN還可促使FAK去磷酸化，同時(shí)作用于PI3K/PKB通路，達(dá)到抑制細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的效果；PTEN還能夠選擇性抑制細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)的活化，控制細(xì)胞周期和細(xì)胞轉(zhuǎn)化[9]。PTEN的低表達(dá)可造成細(xì)胞不受各種凋亡刺激的作用，最終使細(xì)胞過(guò)度增生，而發(fā)生癌變。

細(xì)胞周期循環(huán)受到嚴(yán)格的調(diào)控，所有細(xì)胞均按照G0、G1、S、G2、M 5個(gè)階段組成的細(xì)胞周期反復(fù)循環(huán)[10]。細(xì)胞周期蛋白和細(xì)胞周期蛋白依賴激酶是調(diào)控細(xì)胞周期的關(guān)鍵。p16屬于周期蛋白依賴性激酶抑制因子(CKI)，能夠通過(guò)影響細(xì)胞周期素CyclinD1與CDK4的結(jié)合控制細(xì)胞周期[11]。當(dāng)機(jī)體p16基因發(fā)生異常改變后可引起負(fù)調(diào)控作用，加速了細(xì)胞周期循環(huán)，導(dǎo)致細(xì)胞過(guò)度增殖生長(zhǎng)而引發(fā)腫瘤。

臨床研究表明，PTEN與p16基因表達(dá)與多種腫瘤的發(fā)生有緊密聯(lián)系，屬于多腫瘤抑制基因[12]。本研究深入探討了PTEN與p16基因的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌病理改變的相關(guān)性。本研究結(jié)果顯示，PTEN與p16在正常子宮內(nèi)膜組織中表達(dá)率略高于內(nèi)膜增生癥子宮內(nèi)膜組織，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而PTEN與p16在腺癌子宮內(nèi)膜表達(dá)率顯著低于正常子宮內(nèi)膜組織和內(nèi)膜增生癥子宮內(nèi)膜組織。表明由正常內(nèi)膜及增生癥內(nèi)膜再到子宮內(nèi)膜腺癌，PTEN與p16的表達(dá)率逐漸下降，提示PTEN與p16的表達(dá)可能與子宮內(nèi)膜病變的嚴(yán)重程度有關(guān)。從手術(shù)病理分期來(lái)看，本研究中手術(shù)病理分期Ⅰ期PTEN與p16陽(yáng)性表達(dá)率略高于Ⅱ期，而手術(shù)病理分期Ⅰ期和Ⅱ期PTEN與p16陽(yáng)性表達(dá)率均顯著高于Ⅲ-Ⅳ期。提示隨著手術(shù)病理分期增加，PTEN與p16表達(dá)率逐漸下降。從組織學(xué)分化程度來(lái)看，高分化陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于中分化和低分化，中分化陽(yáng)性表達(dá)率略高于低分化。提示分化程度越高，PTEN與p16表達(dá)率越高。從肌層浸潤(rùn)深度來(lái)看，肌層浸潤(rùn)深度≤1/2的癌組織陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于肌層浸潤(rùn)深度>1/2的癌組織。提示肌層浸潤(rùn)深度越深，PTEN與p16表達(dá)率越高。從淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況來(lái)看，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織。提示PTEN與p16表達(dá)可能對(duì)腫瘤進(jìn)展有抑制作用。

綜上所述，PTEN與p16的表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌的手術(shù)病理分期、組織分化程度、肌層浸潤(rùn)深度以及是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，可能參與了腫瘤細(xì)胞的增殖、分化過(guò)程。

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RelationshipbetweenthepathologicexpressionofPTENandp16incurettagespecimentsandtheprognosisofendometrialcarcinoma

KONGWeiliang

( Chinese Medicine Hospital of Changxin, Zhejiang 313100,China)

孔偉梁(1976-)，男，浙江磐安人，本科，主治醫(yī)師。研究方向：組織病理

R737.33

B

1672-0024(2015)04-0046-04