詹德超　余忠華

[摘要] 鼻咽癌是一種來(lái)源于鼻黏膜上皮細(xì)胞的惡性腫瘤，是我國(guó)南方常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。鼻咽癌大多數(shù)為低分化癌，惡性程度較高，易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。國(guó)內(nèi)外研究表明，腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移與細(xì)胞的異常運(yùn)動(dòng)有關(guān)，是腫瘤細(xì)胞的粘附、降解、運(yùn)動(dòng)以及血管生成等多種生物學(xué)行為互相作用的動(dòng)態(tài)過(guò)程。但是NPC浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制至今尚未完全闡明。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)的發(fā)展，越來(lái)越多鼻咽癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)分子標(biāo)志物逐漸被發(fā)現(xiàn)。深入了解這些分子標(biāo)志物的表達(dá)及調(diào)控，篩選出對(duì)鼻咽癌具有較高敏感性、特異性并可進(jìn)行早期診斷及評(píng)估預(yù)后的標(biāo)記物，尋找出藥物新靶點(diǎn)進(jìn)行針對(duì)性更強(qiáng)的抗腫瘤治療具有十分重要的意義。本研究擬對(duì)鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)分子標(biāo)志物的研究進(jìn)展做一綜述。

[關(guān)鍵詞] 鼻咽癌；轉(zhuǎn)移；分子標(biāo)志物

[中圖分類(lèi)號(hào)] R739.63 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2015）13-0147-06

[Abstract] Nasopharyngeal carcinoma is a malignant neoplasm which arises from the mucosal epithelium cells of the nasopharynx，it is also one of the common malignant tumors in southern China. Most nasopharyngeal carcinomas are poorly differentiated carcinomas. Nasopharyngeal carcinomas are high degree of malignancy，which prone to distant metastasis.The invasion and metastasis of neoplasm are associated with the perverted movement of cells，which is a dynamic process of biologic behavior interactions among adhesion，degradation and angiogenesis in cancer cells. However， the molecular mechanisms underlying NPC invasion and metastasis have not fully elucidated. With the development of Modem molecular biology，more and more new molecular markers in NPC，such as biomarkers have been gotten to know the related molecules expression and molecular regulation， which play important roles in screening tumor markers with more high sensitivity and specificity，achieving early diagnosis ，predicting treatment prognoses and providing new therapeutic strategies to make it more pertinent in anti-tumor therapy. This study is aimed to review the research progress of molecular marker in metastasis of nasopharyngeal carcinoma.

[Key words] Nasopharyngeal carcinoma；Metastasis；Molecular marker

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）大多數(shù)為低分化癌，惡性程度較高，易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，是患者治療失敗和死亡的主要原因。鼻咽癌轉(zhuǎn)移是一個(gè)多因素、多步驟相互作用的過(guò)程，涉及多種基因及其產(chǎn)物的相互作用，目前機(jī)制尚未完全闡明。本文就鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)分子標(biāo)志物的研究進(jìn)展做一綜述。

1 EBV

1.1 結(jié)構(gòu)與功能

EB病毒（eostein barr virus，EBV）是1964年Eostein和Barr在研究非洲兒童的惡性淋巴瘤時(shí)，從瘤細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)的1種嗜人類(lèi)B淋巴細(xì)胞的皰疹病毒，屬于γ亞科。EB病毒是一種線狀雙鏈DNA病毒，由很多種不同的重復(fù)序列構(gòu)成。在鼻咽癌患者體內(nèi)，EB病毒主要表達(dá)EBER EBV核抗原1基因（EBNA-1）、潛伏膜蛋白基因（LMP-1和LMP-2）[1]。多倫多大學(xué)的實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)，EBER EBV核抗原1基因能夠促使細(xì)胞“永生不死”引起腫瘤細(xì)胞不斷生長(zhǎng)從而導(dǎo)致人體患上某種癌癥的分子事件。該研究闡述了EBNA-1通過(guò)和細(xì)胞中的特殊蛋白結(jié)合，繼而干擾天然細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)、導(dǎo)致細(xì)胞不斷生長(zhǎng)、提高癌變幾率的分子機(jī)制[2]。潛伏膜蛋白基因1在EBV潛伏感染過(guò)程中表達(dá)，現(xiàn)在不但被確定是唯一具有癌基因編碼蛋白特點(diǎn)的EBV基因產(chǎn)物，能夠促進(jìn)細(xì)胞癌變和轉(zhuǎn)移，而且是唯一可在體外轉(zhuǎn)化細(xì)胞的EBV編碼的基因產(chǎn)物，可明顯增強(qiáng)EBV介導(dǎo)的B淋巴細(xì)胞增殖和永生化[1]。潛伏膜蛋白基因1是一種由386個(gè)氨基酸（aa）殘基組成的跨膜蛋白，包括3個(gè)結(jié)構(gòu)域：①親水性氨基端胞漿區(qū)（l～23 aa）；②疏水性跨膜區(qū)（24～186aa）；③親水性羧基端胞漿區(qū)（187～386aa）。有研究表明潛伏膜蛋白基因1主要通過(guò)三個(gè)不同羧基端功能區(qū)發(fā)揮作用[3]：一個(gè)是位于194～231位氨基酸殘基的CTAR1；另一個(gè)是位于352～386位氨基酸殘基的CTAR2；第三個(gè)是275～307位氨基酸殘基構(gòu)成的CTAR3。

1.2 與鼻咽癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系

EBV編碼基因參與免疫逃避和多種信號(hào)通路的調(diào)節(jié)，與鼻咽癌的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。潛伏膜蛋白基因1是EBV基因組中發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)能改變細(xì)胞形態(tài)的癌基因，是誘導(dǎo)侵襲轉(zhuǎn)移的主要因素，通過(guò)活化NF-κB、AP-1、JAK/STAT、PI-PLC-PKC等細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路，促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)化，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞具有很強(qiáng)的侵襲和轉(zhuǎn)移能力[4]。Krishna等[5]實(shí)驗(yàn)證明，較高濃度EBV感染的鼻咽癌組中VEGF表達(dá)較高，提示EBV感染可以使VEGF的表達(dá)升高，從而使NPC血管生成增加。Horikawa T等[6]研究表明EBV-LMP1誘導(dǎo)Twist表達(dá)增加，促進(jìn)鼻咽上皮細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化，同步引起E-Cadherin的下降，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、粘附能力變化，從而使其侵襲和轉(zhuǎn)移能力增加。李剛等[7]研究表明潛伏膜蛋白基因1通過(guò)增加貼壁生長(zhǎng)、基膜穿透以及細(xì)胞移動(dòng)能力等，進(jìn)一步促進(jìn)NPC細(xì)胞轉(zhuǎn)移。EBNA1通過(guò)與USP7結(jié)合和抑制其與p53蛋白的反應(yīng)來(lái)干擾天然細(xì)胞調(diào)節(jié)過(guò)程。我們知道其他所有能刺激細(xì)胞擴(kuò)增的病毒均是直接作用于p53導(dǎo)致癌變的，但實(shí)驗(yàn)證明EBV是通過(guò)影響p53的調(diào)節(jié)來(lái)致癌的[1]。LMP-2有關(guān)NPC轉(zhuǎn)移的報(bào)道較少。EBV靶向治療是一種新的針對(duì)性更強(qiáng)的治療方法，通過(guò)提高對(duì)EBNA1和LMP1、2抗原的細(xì)胞免疫以及誘導(dǎo)癌細(xì)胞溶解來(lái)治療鼻咽癌。目前一期臨床研究已經(jīng)有大量數(shù)據(jù)表明EBV靶向治療對(duì)疾病轉(zhuǎn)歸是安全有效的[8]。

EBV血清學(xué)檢測(cè)是NPC篩查的常規(guī)方法，但EBV抗體檢測(cè)的特異性差，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值低，對(duì)臨床診治意義不大[9]。但是由于EBV-DNA來(lái)源于整合了EBV的鼻咽癌細(xì)胞，血漿EBV-DNA定量檢測(cè)對(duì)NPC的臨床診治可謂前景廣闊。目前國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)認(rèn)為鼻咽癌患者的分期、預(yù)后與EBV水平密切相關(guān)，濃度越高，分期越晚，預(yù)后越差。血漿中的EBV-DNA濃度可以反映腫瘤的增長(zhǎng)和消失，能初步篩選出鼻咽癌殘留和復(fù)發(fā)的患者，是一個(gè)敏感性較高的標(biāo)志物[10]。國(guó)內(nèi)侯雪等[11]分別檢測(cè)69例初治鼻咽癌患者治療前、后血漿EBV-DNA水平，研究表明EBV-DNA水平能夠預(yù)測(cè)鼻咽癌有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。Leung等[12]的研究表明，對(duì)于Ⅰ、Ⅱ期的鼻咽癌患者，治療前血漿EBV-DNA水平>4000 copy/mL，其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移幾率遠(yuǎn)高于<4000 copy/mL者，兩組數(shù)據(jù)比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療前鼻咽癌復(fù)發(fā)患者的血漿中EBV-DNA水平明顯高于不復(fù)發(fā)的病例，治療后評(píng)估為臨床完全緩解的患者血漿中EBV-DNA水平非常低下甚至測(cè)不到。治療前血漿中EBV-DNA水平<1500 copy/mL患者的無(wú)復(fù)發(fā)生存率遠(yuǎn)低于濃度>1500 copy/mL的無(wú)復(fù)發(fā)生存率[1]。假如將NPC和鼻咽部其他腫瘤進(jìn)行鑒別時(shí)，EBV血清學(xué)濃度檢測(cè)可以幫助初步診斷。有研究表明頸部淋巴結(jié)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移癌，當(dāng)EBV血清學(xué)濃度檢測(cè)呈陽(yáng)性時(shí)，提示原發(fā)腫瘤很可能是鼻咽癌[1]?？傊?，血漿EBV-DNA定量檢測(cè)作為一種非侵入性檢測(cè)方法，對(duì)鼻咽癌早期診斷、評(píng)估療效、預(yù)測(cè)有無(wú)復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移很有意義，并且可行性大，患者容易接受。

在臨床工作中，發(fā)現(xiàn)部分鼻咽癌未轉(zhuǎn)移前的患者EBV-DNA水平甚至比轉(zhuǎn)移后更高，其原因可能是：①有的微轉(zhuǎn)移灶治療前已經(jīng)轉(zhuǎn)移到血液系統(tǒng)中，但是由于現(xiàn)在的檢驗(yàn)學(xué)、影像學(xué)等檢查水平的限制，無(wú)法檢查出來(lái)；②經(jīng)過(guò)抗腫瘤治療后EBV-DNA水平明顯下降。另外部分鼻咽癌患者在放化療綜合治療后，還可檢測(cè)出較高水平的EBV-DNA，原因可能是有的醫(yī)師過(guò)于擔(dān)心化療藥物或放療副作用會(huì)影響到患者生活質(zhì)量，使用的藥物劑量比較保守，或放療處方劑量未達(dá)標(biāo)，導(dǎo)致少量微轉(zhuǎn)移灶沒(méi)有被完全殺滅掉。

2 VEGF

2.1 結(jié)構(gòu)與功能

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF），早期稱(chēng)為血管通透因子（vascular perm eability factor，VPF），能在體內(nèi)誘導(dǎo)新的血管形成。1989年有研究人員在牛垂體星形膠質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)VEGF，通過(guò)克隆與基因測(cè)序，證實(shí)VPF和VEGF是相同基因編碼的同一種蛋白。VEGF基因位于6p21.3，全長(zhǎng)為14kb。VEGF基因由8個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子構(gòu)成，共有A、B、C、D、E 5種亞型。VEGF家族全部成員均可與細(xì)胞表面酪氨酸激酶受體結(jié)合，構(gòu)成異二聚體，促使酪氨酸磷酸化，從而激活RAS-RAF-MEK-ERK和PI3信號(hào)通路，使轉(zhuǎn)錄因子激活或mRNA降解，進(jìn)一步促進(jìn)血管生成。VEGF-A具有促使內(nèi)皮細(xì)胞加速有絲分裂、遷移的功能；VEGF-B主要促使胚胎血管的形成；VEGF-C、D可使淋巴管的形成加速[13]。

2.2 與鼻咽癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系

1990年，美國(guó)哈佛大學(xué)Folkman博士提出著名的Folkman理論[14]：腫瘤組織的生長(zhǎng)，需要依靠新生血管的生成來(lái)供應(yīng)足夠的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)維持。我們知道新生血管是實(shí)體瘤生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是迄今為止發(fā)現(xiàn)的唯一能夠特異地在血管內(nèi)皮細(xì)胞作用的因子，有望廣泛應(yīng)用于臨床。VEGF在大部分惡性腫瘤中都呈高表達(dá)[15]，但其機(jī)制不清。癌癥患者微血管密度數(shù)量越高，預(yù)后越差。研究證實(shí)NPC的發(fā)生、發(fā)展也有血管生成依賴性。VEGF可以使腫瘤血管的形成加速，在惡性腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移過(guò)程中具有十分重要的作用。駱梅青等[13]研究表明癌組織中的微淋巴管密度與VEGF-C、VEGFR-3的表達(dá)顯著相關(guān)（P<0.01），證實(shí)VEGF-C與VEGFR-3的結(jié)合能夠加速淋巴管的形成，為惡性腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移創(chuàng)造有利條件。Qian等[16]通過(guò)測(cè)量NPC轉(zhuǎn)移組、未轉(zhuǎn)移組、健康人群的VEGF-C水平，實(shí)驗(yàn)證實(shí)VEGF-C與NPC轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，與局部浸潤(rùn)無(wú)關(guān)；國(guó)內(nèi)李欽等[17]實(shí)驗(yàn)表明，VEGF-C在鼻咽癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率為77.5%，并且VEGF-C陽(yáng)性表達(dá)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，在鼻咽正常黏膜組中呈弱表達(dá)。由此可見(jiàn)VEGF有望作為初步診斷NPC有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、評(píng)估預(yù)后的分子標(biāo)志物。

宋向芹等[18]實(shí)驗(yàn)證實(shí)VEGF基因沉默能夠影響細(xì)胞的侵襲和遷移。蔡鑫章等[19]通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)對(duì)VEGF進(jìn)行基因沉默能夠抑制實(shí)體腫瘤的生長(zhǎng)。利用基因沉默技術(shù)進(jìn)行惡性腫瘤靶向治療已成為當(dāng)今科研的熱點(diǎn)。目前已開(kāi)發(fā)出抑制VEGF抗腫瘤藥物[20]，如阿瓦斯汀、恩度等，但藥物尚處于試驗(yàn)階段，加上藥物昂貴，臨床上患者未能廣泛使用。

3 MMP

3.1 結(jié)構(gòu)與功能

基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）屬于鋅蛋白酶超家族成員，1962年Woessner在哺乳動(dòng)物子宮內(nèi)發(fā)現(xiàn)能夠降解膠原的第一個(gè)MMP，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)26個(gè)成員，能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)（ECM），并與金屬蛋白酶抑制劑（TMP）共同調(diào)節(jié)ECM的動(dòng)態(tài)平衡及基膜的完整性。依據(jù)作用底物和片段同源性[21]，基質(zhì)金屬蛋白酶可分為8類(lèi)，分別為膠原酶（MMP-la、lb、8、13、18）、明膠酶（MMP-2、9）、間質(zhì)溶解素（MMP-3、10、11）、基質(zhì)溶解素（MMP-7、26 ）、金屬?gòu)椥缘鞍酌福∕MP-12）、膜型金屬基質(zhì)蛋白酶（MMP-14、15、16、17、24、25）、釉質(zhì)溶解素（MMP20）以及分泌型MMP（MMP-19、21、23A、23B、27、28）。研究證明MMP-2和MMP-9可以降解Ⅳ型膠原，從而促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)移。MMP-2和MMP-9是發(fā)現(xiàn)的與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移最密切相關(guān)[22]，研究也最為透切的。MMP-2、MMP-9呈高表達(dá)已然成為腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的先決條件[23]。研究表明[24]，MMP-2不但能夠降解ECM，而且降解非ECM，能明顯抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡；MMP-9不但能降解蛋白聚糖等多種底物，而且能夠降解VEGF，加速血管生長(zhǎng)，促進(jìn)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。

3.2 與鼻咽癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系

惡性腫瘤轉(zhuǎn)移時(shí)，細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）和基底膜是腫瘤生長(zhǎng)、擴(kuò)散的自然屏障。腫瘤細(xì)胞對(duì)ECM的降解是腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程的一個(gè)關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，通過(guò)激活蛋白酶引起細(xì)胞外基質(zhì)酶的降解發(fā)揮作用。國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)表明基質(zhì)金屬蛋白酶與金屬蛋白酶抑制劑生成水平與激活程度的失衡是腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素，MMP-2/TMP-2、 MMP-9 /TMP-1的比例失衡與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移關(guān)系最為重要。熊丹寧等[25]利用實(shí)驗(yàn)證實(shí)MMP-9的活性高低與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移潛能呈正相關(guān)。羅國(guó)慶等[26]研究表明，不但NPC組織中MMP-2和MMP-9的陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于正常對(duì)照組（P<0.05），而且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05）。研究報(bào)道[27]，NPC中MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)率為83.87%，癌旁組織中為35.56%，且腫瘤越大、轉(zhuǎn)移范圍越廣，MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)率越高。因此，MMP-2和MMP-9很有可能在NPC發(fā)生發(fā)展、突破基膜向外擴(kuò)散及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過(guò)程中起到關(guān)鍵作用。MMP-2和MMP-9在轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞和腫瘤組織血管的內(nèi)皮細(xì)胞中高表達(dá)，可引起癌細(xì)胞侵入基質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)移，加速腫瘤生長(zhǎng)、血管生成?？梢?jiàn)MMP-2和MMP-9有望成為鼻咽癌抗腫瘤治療的新靶點(diǎn)。

值得一提的是[28]，MMP家族在生物體內(nèi)自己就具有天然的抑制劑家族——MMP組織抑制劑（TIMP）。20世紀(jì)70年代發(fā)現(xiàn)了第一個(gè)天然MMP組織抑制劑（TIMP-1）以后，目前已發(fā)現(xiàn)TIMP-2 、-3和-4共四個(gè)成員。TIMP-1能夠抑制可溶性的基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）。TIMP-2、-3、-4不但能夠抑制可溶性的MMP，而且能夠抑制膜型MMP。

4 LDH

4.1結(jié)構(gòu)與功能

1954年Hill等率先報(bào)道惡性腫瘤患者血清乳酸脫氫酶（LDH）活力增高達(dá)96%，引起學(xué)者關(guān)注。迄今為止在人體血清中共發(fā)現(xiàn)5種LDH同工酶[29]，可分為骨骼肌型（M型）和心肌型（H型） 兩種亞基。M、H亞基以不同比例構(gòu)成四聚體同工酶，有以下5種：LDH1=H4、LDH2=H3M1、LDH3=H2M2、LDH4= H1M3、LDH5=M4。LDH主要分布在心、肝、腎、肺及紅細(xì)胞等器官和組織的細(xì)胞質(zhì)中。腫瘤組織的代謝主要是糖酵解，明顯高于正常組織，所以參與糖酵解過(guò)程的LDH活性亦明顯升高。其機(jī)制表現(xiàn)為腫瘤細(xì)胞壞死增加，代謝轉(zhuǎn)換率增快，細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)，繼而癌組織參與代謝的酶類(lèi)釋放至血液，導(dǎo)致血清LDH水平增加。有研究表明[30]，癌癥患者的血清和腫瘤組織都提示LDH及其同工酶有變化，而且LDH活性和M亞基的增加與細(xì)胞惡性過(guò)程相平行。研究表明[30]，大多數(shù)惡性腫瘤以LDH3升高為主，少數(shù)見(jiàn)LDH5升高，伴隨LDH1、LDH2下降。所以在臨床和科研工作中，監(jiān)測(cè)患者血清LDH及其同工酶水平，可望作為惡性腫瘤的篩選指標(biāo)、評(píng)價(jià)療效、判斷預(yù)后的方法，目前己用于淋巴瘤、卵巢癌兩種惡性腫瘤。但有部分良性疾病，如急慢性肝功能損害、阻塞性黃疽、心肌損害及骨骼肌疾病，其血清LDH及其同工酶也可以升高，這需要臨床醫(yī)生完善患者臨床資料，增加檢查項(xiàng)目鑒別。

4.2與鼻咽癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系

眾所周知，腫瘤細(xì)胞的糖代謝存在瓦博格效應(yīng)[31]，即癌細(xì)胞不同于正常細(xì)胞，無(wú)論供氧充足與否，均以無(wú)氧酵解作為獲得能量的方式。作為糖酵解代謝途徑中的限速酶，LDH起著非常重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤患者血清中的LDH水平會(huì)明顯升高。因此可根據(jù)患者血LDH水平初步篩選出患者是否有惡性腫瘤。林馮杰等[31]對(duì)NPC患者及健康人群進(jìn)行血清LDH水平檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)治療前鼻咽癌患者血清LDH水平明顯高過(guò)健康人群。陳建華等[32]報(bào)道1例鼻咽癌全身多處轉(zhuǎn)移患者的血清LDH水平最高時(shí)是正常值的30余倍。Cheng等[33]報(bào)告鼻咽癌患者血清LDH水平偏高者較偏低者易出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，但不影響局部復(fù)發(fā)率。但也有研究表明NPC患者不論是初診組或者復(fù)發(fā)組，其血清LDH水平與正常對(duì)照組比較無(wú)顯著差異。在臨床工作中，發(fā)現(xiàn)部分鼻咽癌患者治療前血清LDH已經(jīng)升高甚至數(shù)倍于正常值，分析其原因：第一，患者治療前有可能已存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或亞臨床轉(zhuǎn)移病灶；第二，由于血清LDH來(lái)源于全身多種組織，不僅取決于腫瘤的大小，有部分良性疾病的血清LDH也可以升高；第三，正常情況下，血清LDH水平也不是一成不變的。另外有的鼻咽癌患者治療前LDH水平不高，但治療后患者的LDH水平反而升高，影響因素可能是：①化療藥物對(duì)心肌、肝腎細(xì)胞等損害；②放射治療對(duì)鼻咽腫物殺傷及放射野其他組織損傷的結(jié)果。目前原因不明，尚需進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)和系統(tǒng)臨床研究以明確。

5 ALP

5.1結(jié)構(gòu)與功能

血清堿性磷酸酶譜[34]（包括血清堿性磷酸酶ALP、骨型堿性磷酸酶B-ALP）是一組磷酸單酯水解酶，在堿性條件下能夠催化磷酸基團(tuán)的水解和轉(zhuǎn)移。ALP幾乎存在于人體所有組織中，在骨骼（成骨細(xì)胞）和肝臟含量最高。ALP主要由成骨細(xì)胞分泌，在骨折、惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移等損傷骨骼時(shí)，分泌堿性磷酸酶增加使磷酸鹽沉積，從而修復(fù)骨骼，可引起血清ALP活性升高。骨型堿性磷酸酶來(lái)源于成骨細(xì)胞，如果骨形成大于骨吸收，其血清中濃度會(huì)明顯升高。

5.2與鼻咽癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系

崔炳強(qiáng)等[35]研究表明NPC骨轉(zhuǎn)移組、未轉(zhuǎn)移組血清ALP水平遠(yuǎn)高于正常組（P<0.01）；NPC骨轉(zhuǎn)移組血清ALP水平遠(yuǎn)高于未轉(zhuǎn)移組（P<0.01）；多發(fā)骨轉(zhuǎn)移組遠(yuǎn)高于單發(fā)骨轉(zhuǎn)移組（P<0.05）。提示鼻咽癌患者骨轉(zhuǎn)移程度越重，血清ALP的水平越高。血清ALP是診斷骨骼病變的重要指標(biāo)，已成為大家共識(shí)。研究報(bào)道，婦女40歲以后，血清B-ALP水平隨年齡增加而升高，特別是絕經(jīng)后10年，增加達(dá)77%，但于60～80歲開(kāi)始下降至低水平。對(duì)20～80歲的女性志愿者進(jìn)行調(diào)查，證實(shí)絕經(jīng)后B-ALP水平較絕經(jīng)前升高，和年齡呈顯著相關(guān)性，特別是在骨量減少及骨質(zhì)疏松患者中，B-ALP水平迅速增高，表明B-ALP能夠作為一種敏感標(biāo)志物來(lái)反映骨轉(zhuǎn)換率[36]。Sham等[37]報(bào)道ALP>70 U/L[正常參考值為（31.0～115.0）U/L]的N3期鼻咽癌患者遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移發(fā)生率高。

在臨床工作中，我們發(fā)現(xiàn)鼻咽癌未轉(zhuǎn)移患者的ALP水平升高甚至數(shù)倍于正常值，其原因可能是：①鼻咽癌患者已經(jīng)有微小骨轉(zhuǎn)移灶，但是由于目前檢驗(yàn)學(xué)、核醫(yī)學(xué)、影像學(xué)等條件的限制，無(wú)法找到微小骨轉(zhuǎn)移灶；②堿性磷酸酶雖然在骨骼和肝臟含量最高，但亦存在于人體其他組織中，血清ALP水平增高，反映存在其他部位或器官微小骨轉(zhuǎn)移灶（除外骨轉(zhuǎn)移灶）可能。這就需要我們進(jìn)行大樣本的科學(xué)實(shí)驗(yàn)和臨床研究以明確ALP水平與鼻咽癌轉(zhuǎn)移幾率是否呈正相關(guān)。

6 展望

在臨床工作中，我們發(fā)現(xiàn)很多早期的鼻咽癌患者治療后短時(shí)間內(nèi)就已經(jīng)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。因此與鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的分子標(biāo)志物扮演著越來(lái)越重要的角色。一方面治療前可通過(guò)測(cè)定患者鼻咽癌組織或血清、血漿中分子標(biāo)志物，預(yù)測(cè)治療后轉(zhuǎn)移危險(xiǎn)度的高低，有利于進(jìn)行個(gè)體化治療，從而降低患者復(fù)發(fā)率和轉(zhuǎn)移率。另一方面，根據(jù)鼻咽癌相關(guān)分子標(biāo)志物，尋找出藥物新靶點(diǎn)進(jìn)行針對(duì)性更強(qiáng)的抗腫瘤治療，可以提高鼻咽癌患者的治愈率。但是目前絕大多數(shù)鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)移標(biāo)志物，存在敏感性差、特異性更差的普遍問(wèn)題，進(jìn)一步尋找具有較高敏感性、特異性的標(biāo)志物任重而道遠(yuǎn)。另外很多分子標(biāo)志物的研究還處于初步探索階段，還需要進(jìn)行更系統(tǒng)、更大樣本的科學(xué)實(shí)驗(yàn)和臨床研究，以明確其發(fā)生、發(fā)展和調(diào)控機(jī)制，進(jìn)而更好地指導(dǎo)臨床診斷和治療。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 賴輝紅，馬廉. EB病毒相關(guān)惡性腫瘤研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)小兒血液與腫瘤雜志，2013，18（6）：245-249.

[2] Saridakis V，Sheng Y，Sarkari F，et al. Structure of the P53 binding domain of HAUSP/USP7 bound to epstein-barr nuclear antigen 1 implications for EBV-mediated immortalization[J]. Mol Cell，2012，18（3）：25-36.

[3] Repic AM，Shi M，Scott RS，et al. Augmented latent membrane protein 1 expression from Epstein-Barr virus episomes with minimal terminal repeats[J]. J Viro1，2010，84（5）：2236-2244.

[4] Wang Z，Luo F，Li L，et al. STAT3 activation induced by Epstein-Barr virus latent membrane protein l causes vascular endothelial growth factor expression and cellular invasiveness via JAK3 and ERK signaling[J]. Eur J Cancer，2011，46（16）：2996-3006.

[5] Krishna SM，James S，Balaram P，et al. Expression of VEGF as prognosticator in primary nasopharyngeal cancer and its relation to EBV status[J]. Virus Research，2006，115（1）：85-90.

[6] Horikawa T，Yang J，Kondo S，et al. Twist and epithelial mesenchymal transition are induced by the EBV oncoprotein latent membrane protein 1 and are associated with metastatic nasopharyngeal carcinoma[J]. Cancer Res，2007， 67（5）：1970-1978.

[7] 李剛，李湘平，劉雄，等. DNA載體介導(dǎo)RNA干擾抑制LMP-1基因?qū)Ρ茄拾┘?xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響[J]. 中華腫瘤雜志，2006，28（10）：724.

[8] Smith C，Tsang J，Beagley L，et al. Effective treatment of metastatic forms of Epstein-Barr virus-associated nasopharyngeal carcinoma with a novel adenovirus-based adoptive immunotherapy[J]. Cancer Res，2012，72（5）：1116-1125.

[9] 柳青，黃啟洪，廖建，等. 廣東四會(huì)市和廣西蒼梧縣鼻咽癌篩查結(jié)果分析[J]. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2011，45（7）：664-665.

[10] Jiang W，Liao Y. The dynamic study between EBV DNA with nasopharyngeal carcinoma[J]. Lin Chuang Er Bi Yan Hou Ke Za Zhi，2012，19（20）：920.

[11] 侯雪，張力，趙充，等. 血漿EB病毒DNA濃度預(yù)測(cè)鼻咽癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的研究[J]. 癌癥，2006，25（7）：785.

[12] Leung SF，Chan AT，Zee B，et al. Pretherapy quantitative measurement of circulating Epstein-Barr virus DNA is predictive of posttherapy distant failure in patients with early stage nasopharyngeal carcinoma of undiferentiated type[J]. Cancer，2003，98（2）：288-291.

[13] 駱梅青，李錫清. VEGF-C和VEGFR-3在鼻咽癌組織中的表達(dá)及其意義[J]. 實(shí)用癌癥雜志，2010，25（6）：568-570.

[14] 王曉雪，王光明，潘云，等. VEGF與鼻咽癌的研究現(xiàn)況及其臨床意義[J]. 中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2014，11（2）：149-151.

[15] 蔣偉，張成，羅元，等. VEGF蛋白表達(dá)與鼻咽癌臨床特征相關(guān)性研究[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2013，18（12）：2354-2357.

[16] Qian CN，Zhang CQ，Guo X，et al. Elevation of serum vascular endothelial grow factor inmale patients with metastatic nasopharyngeal carcinoma[J]. Cancer，2000，88（2）：255.

[17] 李欽，陳彥林，孔平，等. 鼻咽癌組織中COX-2和VEGF-C的表達(dá)及意義[J]. 山東醫(yī)藥，2007，47（12）：7.

[18] 宋向芹，司秀文，張芳，等. VEGF基因沉默對(duì)肝癌HepG 2細(xì)胞侵襲和遷移的影響[J]. 山東醫(yī)藥，2012，52 （46）：42-43.

[19] 蔡鑫章，危維，趙素萍，等. microRNA抑制鼻咽癌VEGF基因表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2012，24（15）：703-707.

[20] 郭翌安. 鼻咽癌患者調(diào)強(qiáng)放療與常規(guī)放療對(duì)比研究[J]. 中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2013，10（11）：23-24.

[21] Lindsey ML，Zamilpa R. Temporal and spatial expression of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases following myocardial infarction[J]. Cardiovasc Ther，2012，30（1）：31-41.

[22] Iyer RP，Patterson NL，F(xiàn)ieldsGB，et al. The history of matrix metalloproteinases：milestones，myths，and misperceptions[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol，2012，303（8）：919-934.

[23] Li S，Shen X，Yang Z，et al. Clinical significance of MMP2 overexpression in endometrial adenocarcinoma[J]. Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao，2014，34（3）：423-425.

[24] Rodriguez D，MorrisonCJ，Overall CM. Matrix metalloproteinases；What do they not do？ New substrates and biological roles identified by murine models and proteomics[J].Biochim Biophys Acta，2013，1803（1）：39-54.

[25] 熊丹寧，趙勇，曾慶富，等. 未分化型鼻咽癌中MMP-9表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系[J]. 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，25（6）：328.

[26] 羅國(guó)慶，周慧，曹慶碩，等. MMP-2，MMP-9在鼻咽癌組織中表達(dá)的免疫組化研究[J]. 齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，29（14）：1665.

[27] 杜心佳，夏繼云，邱芳，等. E-鈣粘蛋白、表皮生長(zhǎng)因子受體、基質(zhì)金屬蛋白酶9表達(dá)與鼻咽癌預(yù)后的關(guān)系[J]. 中國(guó)處方藥，2013，12（1）：42-44.

[28] Khoicha R，Murthy A，Weiss A. Metalloproteinases and their natural inhibitors in inflammation and immunity[J]. Nat Rev Immunol，2013，13（9）：649-665.

[29] 崔英，鄺國(guó)乾，岳惠芬，等. 鼻咽癌患者血清和癌組織中乳酸脫氫酶及其同工酶的研究[J]. 廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，16（2）：150-152.

[30] 王順祥，魏經(jīng)建，王奕鵬，等. 血清LDH同工酶檢測(cè)在癌癥診斷上的應(yīng)用[J]. 癌變，畸變，突變，2001，13（1）：29-31.

[31] 林馮杰，張瑜. 鼻咽癌患者血清乳酸脫氫酶檢查的臨床意義[J]. 中外醫(yī)學(xué)研究，2014，12（28）：17-18.

[32] 陳建華，鐘忠輝，夏向南，等. 鼻咽癌全身骨轉(zhuǎn)移出現(xiàn)乳酸脫氫酶明顯增高一例[J]. 福州總醫(yī)院學(xué)報(bào)，2004， 11（4）：287.

[33] Cheng SH，Jian JJ，Tsai SY，et al. Prognostic features and treatmetn outcome in locoregionalyy advanced nasopharyngeal carcinoma following concurrent chemotherapy and radiotherapy[J]. Int J Radiat Oncol Biol Phys，1998， 41（4）：755-762.

[34] 陳旭芳. 血清堿性磷酸酶檢測(cè)惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移診斷價(jià)值的探討[J]. 中華腫瘤防治雜志，2009，16（12）：953-954.

[35] 崔炳強(qiáng)，向陽(yáng). 全身骨顯像聯(lián)合血清堿性磷酸酶譜對(duì)鼻咽癌患者骨轉(zhuǎn)移的診斷價(jià)值[J]. 中國(guó)臨床醫(yī)學(xué)影像雜志，2011，22（9）：672-674.

[36] 張紅，羅湘杭，謝輝，等. 基質(zhì)金屬蛋白酶-1、-2與女性年齡、骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)及骨密度的關(guān)系[J]. 中華內(nèi)科雜志，2011，4（45）：306-309.

[37] Sham JS，Choy D，Choi PH. Nasopharyngeal carcinoma the significance of neck node involvement in relation to the pattern of distant failure[J]. Br J Radiol，1990，63（746）：108-113.

（收稿日期：2015-03-23）