常秀娟，陸蔭英，曾珍，曲建慧，許桂林，高旭東，王鋐，樓敏，王春平，楊永平

進(jìn)展期肝癌患者氬氦刀冷凍消融術(shù)前中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值與術(shù)后預(yù)后關(guān)系研究

常秀娟，陸蔭英，曾珍，曲建慧，許桂林，高旭東，王鋐，樓敏，王春平，楊永平

目的探討氬氦刀術(shù)前中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值（neutrophil/lymphocyte ratio,NLR）與進(jìn)展期肝癌患者術(shù)后生存期的關(guān)系。方法回顧性分析2008—2009年在我院行氬氦刀冷凍消融治療的150例進(jìn)展期肝癌患者臨床資料，根據(jù)術(shù)前NLR中位數(shù)（2.94）將患者分為2組（高NLR組和低NLR組），對(duì)2組進(jìn)行生存分析和Cox回歸分析。結(jié)果氬氦刀冷凍消融術(shù)前病理組織分化程度、NLR和肝硬化Child-Pugh分級(jí)是術(shù)后進(jìn)展期肝癌患者生存期的影響因素。術(shù)前高NLR組患者生存期為5個(gè)月（95%CI 3.5～6.4），而低NLR組患者生存期為9個(gè)月（95%CI 6.9～11.0），2組生存期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論NLR＞2.94的進(jìn)展期肝癌患者行氬氦刀冷凍消融治療預(yù)后較差。

肝腫瘤；激光器，氣體；存活率分析

已有研究表明宿主對(duì)腫瘤的炎性反應(yīng)與腫瘤抑制有一定關(guān)系[1]，中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值（neutrophil/lymphocyte ratio,NLR）作為全身免疫系統(tǒng)狀態(tài)的評(píng)價(jià)指標(biāo)之一，可以反映全身炎性狀態(tài)，已被認(rèn)為是多種腫瘤預(yù)后影響因素之一，在肺癌、腸癌、胃癌等患者的研究中已證實(shí)術(shù)前NLR可反映患者的炎癥狀態(tài)、臨床分期及預(yù)測(cè)生存期，高NLR的腫瘤患者預(yù)后不良[2-5]。目前關(guān)于NLR與肝癌預(yù)后關(guān)系方面的研究不多。本研究是對(duì)我院收治的進(jìn)展期肝癌患者臨床資料進(jìn)行回顧性分析，探討氬氦刀術(shù)前NLR對(duì)患者術(shù)后預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象對(duì)象為2009年6月—2010年6月在我院住院并行氬氦刀冷凍消融治療的根據(jù)巴塞羅那標(biāo)準(zhǔn)[6]診斷為進(jìn)展期肝癌（巴塞羅那標(biāo)準(zhǔn)將肝癌分為早期、中期、進(jìn)展期和晚期）的患者共150例。

1.1.1 入選標(biāo)準(zhǔn)原發(fā)性肝癌患者同時(shí)伴有乙型肝炎肝硬化（代償期Child-Pugh A或B級(jí)），并且行氬氦刀冷凍消融治療。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)①糖尿病、高血壓等其他臟器慢性疾??；②酒精性肝病或者HCV感染、自身免疫性肝病或肝衰竭；③腹膜炎或其他臟器感染，以及伴隨發(fā)熱、出血癥狀；④用粒細(xì)胞刺激因子類提高血細(xì)胞的藥物；⑤脾切除術(shù)后；⑥ALT及AST增高在2倍以上；⑦早期、中期、晚期肝癌。

1.2 研究方法回顧性分析患者臨床資料，根據(jù)NLR中位數(shù)2.94（由于對(duì)NLR的高低值目前無(wú)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，所以以中位數(shù)為界值）將150例患者分為高低2組，＞2.94為高NLR組，≤2.94為低NLR組，各組75例，比較2組臨床特點(diǎn)，同時(shí)用生存曲線對(duì)2組進(jìn)行生存分析。用Cox回歸模型分析患者術(shù)后影響因素。

1.3 治療方法氬氦刀冷凍消融治療采用氬氦超導(dǎo)手術(shù)系統(tǒng)（美國(guó)Endocare公司,CRYO40F），手術(shù)的具體操作方法見(jiàn)參考文獻(xiàn)［7］。在氬氦刀術(shù)中通過(guò)超聲引導(dǎo)下肝臟穿刺取肝癌組織，送病理檢查。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)根據(jù)術(shù)前患者血常規(guī)結(jié)果計(jì)算NLR。HBV DNA定量＜105IU/ml為低載量，105～107IU/ml為中載量，＞107IU/ml者為高載量[8]。所有患者在術(shù)中取腫瘤組織，行病理檢查。病理結(jié)果根據(jù)Edmondsons進(jìn)行分級(jí)，將Ⅰ級(jí)或Ⅰ～Ⅱ級(jí)定義為腫瘤細(xì)胞分化高，Ⅱ級(jí)或Ⅱ～Ⅲ級(jí)為中，Ⅲ級(jí)或Ⅲ～Ⅳ級(jí)為低[9]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。2組定性資料比較用四格表χ2檢驗(yàn)，2組定量資料比較用成組t檢驗(yàn)。用Kaplan-Meier生存分析法估計(jì)生存率，2組曲線比較采用log-rank檢驗(yàn)?；颊呱嫫谟绊懸蛩胤治鲇肅ox回歸分析。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組臨床指標(biāo)比較高NLR組PLT為（153.4±75.2）×109/L，低NLR組PLT為（127.2± 74.3）×109/L，2組PLT比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其他指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

2.2 生存分析起點(diǎn)事件為患者接受氬氦刀冷凍消融術(shù)治療，終點(diǎn)事件為患者死亡。采用Kaplan-Meier生存分析法估計(jì)生存率。2組曲線比較采用log-rank檢驗(yàn)。低NLR組患者術(shù)后中位生存期為9個(gè)月（95%CI 6.9～11.0），而高NLR組為5個(gè)月（95%CI3.5～6.4）。2條曲線差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 6.920，P=0.009）。見(jiàn)圖1。

2.3 Cox回歸分析多因素Cox回歸分析結(jié)果顯示，病理組織分化程度、術(shù)前NLR和肝硬化Child-Pugh分級(jí)對(duì)進(jìn)展期肝癌患者氬氦刀術(shù)后生存期的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，患者組織分化程度上升1級(jí)，術(shù)后死亡風(fēng)險(xiǎn)降低為原來(lái)的0.653，高NLR患者術(shù)后死亡風(fēng)險(xiǎn)是低NLR患者的1.615倍。Child-Pugh B級(jí)患者死亡風(fēng)險(xiǎn)是A級(jí)的1.639倍。見(jiàn)表2。

3 討論

原發(fā)性肝癌發(fā)病率在全球惡性腫瘤中居第5位。中國(guó)是原發(fā)性肝癌的高發(fā)國(guó)，肝癌的病死率居惡性腫瘤的第2位[10-11]。原發(fā)性肝癌早期無(wú)明顯癥狀，出現(xiàn)癥狀時(shí)多為進(jìn)展期，這也是肝癌病死率居高的原因之一，對(duì)于進(jìn)展期肝癌患者生存期的評(píng)估一直是研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。

表1 2組臨床指標(biāo)比較(例)Table 1 Comparison of clinical indicators between the two groups(cases)

圖1 2組術(shù)后生存曲線Figure 1 Post-operative survival curves of the two groups

研究發(fā)現(xiàn)高NLR組PLT明顯高于低NLR組，這與既往對(duì)結(jié)腸癌的研究結(jié)果一致[3]，白細(xì)胞釋放生物活性物質(zhì)促進(jìn)PLT聚集和激活，PLT的聚集和激活促進(jìn)凝血；另外，PLT通過(guò)配體與腫瘤細(xì)胞結(jié)合，進(jìn)而被激活促進(jìn)腫瘤細(xì)胞聚集，有利于癌栓的形成?；罨腜LT還可以通過(guò)釋放促血管形成因子如PLT衍化生長(zhǎng)因子、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子等促進(jìn)腫瘤血管生成。

表2 Cox回歸分析結(jié)果Table 2 Results of Cox regression analysis

通過(guò)對(duì)氬氦刀冷凍消融術(shù)前臨床特點(diǎn)的分析發(fā)現(xiàn)術(shù)前NLR、肝硬化Child-Pugh分級(jí)和病理組織分化程度是影響術(shù)后進(jìn)展期肝癌患者生存期的影響因素。肝硬化Child-Pugh分級(jí)和病理組織分化程度可以判斷進(jìn)展期肝癌患者預(yù)后，已被研究報(bào)道[12]。然而，進(jìn)展期肝癌患者取組織行病理檢查較為困難，創(chuàng)傷大，患者難以接受，因此病理組織分化程度雖然可以用以判斷預(yù)后，但不是較為方便的手段。肝硬化Child-Pugh分級(jí)受術(shù)前內(nèi)科治療影響較大，不穩(wěn)定。外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)較易獲得，計(jì)算NLR值方便快捷，且在排除感染等因素影響的情況下，NLR值較為穩(wěn)定。

已有學(xué)者在肺癌、胃癌、腸癌、胰腺癌等領(lǐng)域進(jìn)行研究[2-5]，結(jié)果表明NLR升高是影響癌癥預(yù)后的影響因素，這與本研究結(jié)果一致。研究表明慢性炎癥對(duì)腫瘤的發(fā)展尤其是侵襲轉(zhuǎn)移有促進(jìn)作用[1]。NLR作為評(píng)價(jià)全身免疫狀態(tài)的指標(biāo)之一，也可反映患者的炎癥狀態(tài)。NLR值升高反映中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)相對(duì)增高和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)相對(duì)減少。研究發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)高往往伴隨著腫瘤抑制現(xiàn)象，并觀察到有不成熟和無(wú)功能的中性粒細(xì)胞參與，故過(guò)度發(fā)育的中性粒細(xì)胞可能是對(duì)正常功能喪失細(xì)胞的一種代償[13]。另外，中性粒細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子的主要來(lái)源，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子的過(guò)度表達(dá)是促進(jìn)腫瘤血管生成和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的必備條件之一[14]。研究表明中性粒細(xì)胞會(huì)抑制淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和活性T細(xì)胞的溶細(xì)胞活性，而且這種抑制能力與中性粒細(xì)胞數(shù)量成正比[15]。CD4+T淋巴輔助細(xì)胞減少并CD8+T淋巴抑制細(xì)胞增多提示宿主細(xì)胞免疫功能下降。淋巴細(xì)胞減少可能降低宿主免疫系統(tǒng)抗腫瘤的免疫反應(yīng)[16-18]。

通過(guò)本研究發(fā)現(xiàn)，NLR可作為進(jìn)展期肝癌氬氦刀術(shù)前評(píng)估生存期的預(yù)測(cè)指標(biāo)。NLR結(jié)合肝硬化Child-Pugh分級(jí)以及病理組織分化程度用于術(shù)前判斷進(jìn)展期肝癌患者預(yù)后，提高了判斷的準(zhǔn)確性，又不必增加患者的痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，是一項(xiàng)較好的預(yù)后預(yù)測(cè)指標(biāo)。

[1]Cou ss en s LM,Werb Z.Inflammation and cancer［J］.Nature,2002, 420(6917):860-867.

[2]Vaguliene N,Zemaiti s M,Lavin s kiene S,etal.Local and s y s temic neutrophilic inflammation in patient s with lung cancer and chronic ob s tructive pulmonary di s ea s e［J］.BMC Immunol,2013,14:36.

[3]Shibutani M,Maeda K,Nagahara H,et al.A high preoperative neutrophil-to-lymphocyte ratio i s a ss ociated with poor s urvival in patient s with colorectal cancer［J］.Anticancer Re s,2013,33(8): 3291-3294.

[4]Sugiura T,Ue s aka K,Kanemoto H,et al.Elevated preoperative neutrophil-to-lymphocyte ratio a s a predictor of s urvival after ga s troentero s tomy in patient s with advanced pancreatic adenocarcinoma［J］.Ann Surg Oncol,2013,20(13):4330-4337.

[5]Shimada H,Takiguchi N,Kainuma O,et al.High preoperative neutrophil-lymphocyte ratio predict s poor s urvival in patient s with ga s tric cancer［J］.Ga s tric Cancer,2010,13(3):170-176.

[6]Llovet JM,BrúC,Bruix J.Progno s i s of hepatocellular carcinoma: the BCLC s taging cla ss ification［J］.Semin Liver Di s,1999,19(3): 329-338.

[7]陳艷，王春平，陸蔭英，等.小肝癌氬氦刀治療后復(fù)發(fā)因素預(yù)計(jì)分析［J］.解放軍醫(yī)學(xué)雜志，2010，35(2):137-143.

[8]Gao L,Trinh HN,Li J,et al.Tenofovir i s s uperior to entecavir for achieving complete viral s uppre ss ion in HBeAg-po s itive chronic hepatiti s B patient s with high HBV DNA［J］.Aliment Pharmacol Ther,2014,39(6):629-637.

[9]Choi SH,Choi GH,Kim SU,et al.Role of s urgical re s ection for multiple hepatocellular carcinoma s［J］.World JGa s troenterol,2013, 19(3):366-374.

[10]蘇淑慧，常秀娟，韋照永，等.失代償期肝硬化合并進(jìn)展期原發(fā)性肝癌自發(fā)性破裂出血行經(jīng)導(dǎo)管肝動(dòng)脈栓塞的療效分析［J］.傳染病信息，2014，27(2):86-88，92.

[11]Siegel R,Nai s hadham D,Jemal A.Cancer s tati s tic s 2013［J］.CA Cancer JClin,2013,63(1):11-30.

[12]Fu SJ,Shen SL,Li SQ,et al.Progno s tic value of preoperative peripheral neutrophil-to-lymphocyte ratio in patient s with HBV-a ss ociated hepatocellular carcinoma after radical hepatectomy［J］. Med Oncol,2013,30(4):721.

[13]Bui JD,Schreiber RD.Cancer immuno s urveillance,immunoediting and inflammation:independent or interdependent proce ss e s?［J］. Curr Opin Immunol,2007,19(2):203-208.

[14]Chri s toffer ss on G,V a gesj?E,Vandooren J,etal.VEGF-A recruit s a proangiogenic MMP-9-delivering neutrophil s ub s et that induce s angiogene s i s in tran s planted hypoxic ti ss ue［J］.Blood,2012,120 (23):4653-4662.

[15]Dunn GP,Bruce AT,Ikeda H,et al.Cancer immunoediting:from immuno s urveillance to tumor e s cape［J］.Nat Immunol,2002,3(11): 991-998.

[16]Jeong WI,Park O,Suh YG,et al.Suppre ss ion of innate immunity (natural killer cell/interferon-γ)in the advanced s tage s of liver fibro s i s in mice［J］.Hepatology,2011,53(4):1342-1351.

[17]Ryan SO,John s on JL,Cobb BA.Neutrophil s confer T cell re s i s tance to myeloid-derived s uppre ss or cell-mediated s uppre ss ion to promote chronic inflammation［J］.J Immunol,2013,190 (10):5037-5047.

[18]Teramoto K,Oh s hio Y,Fujita T,etal.Simultaneou s activation of T helper function can augment the potency of dendritic cell-ba s ed cancer immunotherapy［J］.JCancer Re s Clin Oncol,2013,139(5): 861-870.

（2015-02-08收稿 2015-04-15修回）

（責(zé)任編委 辛紹杰 本文編輯 張?jiān)戚x）

Association between neutrophil/lym phocyte ratio before argonhelium cryoablation and the prognosis of patientsw ith advanced liver cancer

CHANG Xiu-juan,LU Yin-ying,ZENG Zhen,QU Jian-hui,XU Gui-lin,GAO Xu-dong, WANG Hong,LOU Min,WANG Chun-ping,YANG Yong-ping*
Liver Tumor Diagnosis,Treatment and Research Center,302 Hospital of PLA,Beijing 100039,China
*Corresponding author,E-mail:yongpingyang@hotmail.com

Objective To investigate the association between neutrophil/lymphocyte ratio(NLR)before argon-helium cryoablation and the prognosisofadvanced liver cancer.M ethods Clinical data of150 patientswith advanced liver cancer,who underwentargon-helium cryoablation in our hospital between 2008-2009,were retrospectively analyzed.The patientswere divided into 2 groups (high NLR group and low NLR group)according to themedian of NLR(2.94)before argon-helium cryoablation.Survivalanalysis and Cox regression analysis of the 2 groupswere conducted.Results Pathology,the NLR before argon-helium cryoablation and Child-Pugh gradewere independent risk factors for the survival of patientswith advanced liver cancer.The survival of high NLR group was 5 months(95%CI3.5-6.4),while the survivalof low NLR group was9months(95%CI6.9-11.0).The difference between the 2 groupswas significant.Conclusion The prognosis of patientswith advanced liver cancerwho have a NLR ofgreater than 2.94 before argon-helium cryoablation is poor.

liverneoplasms;lasers,gas;survivalanalysis

R735.7

A

1007-8134(2015)04-0241-03

10.3969/j.issn.1007-8134.2015.04.014

軍隊(duì)“十二五”面上課題（CWS12J024）

100039北京，解放軍第三○二醫(yī)院肝臟腫瘤診療與研究中心（常秀娟、陸蔭英、曾珍、曲建慧、許桂林、高旭東、王鋐、樓敏、王春平、楊永平）

楊永平，E-mail:yongpingyang@hotmail.com