羅川等

【摘要】目的：對重慶金佛山地區(qū)升麻、小升麻和南川升麻三種升麻的化學(xué)成分進行初步研究。方法：在三種升麻生物堿、皂苷、黃酮、有機酸存在判定基礎(chǔ)上，分別測定四種大類的含量。結(jié)果：三種升麻的生物堿與有機酸的含量呈明顯的負相關(guān)關(guān)系，金佛山地區(qū)三種升麻的生物堿、總皂苷和總黃酮含量分布一致，以南川升麻的含量最高。結(jié)論：研究結(jié)果可為南川升麻的保護性研究提供科學(xué)依據(jù)，對金佛山地區(qū)升麻藥材的野生撫育栽培提供支持。

【關(guān)鍵詞】升麻；小升麻；南川升麻；化學(xué)成分

【中圖分類號】R2841【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2015）03-0023-02

升麻屬（Cimicifuga）植物為毛茛科（Ranunculaceae）多年生草本[1]，大多可作藥用。升麻始載于《名醫(yī)別錄》，是一味常用中藥。李時珍曰：“其葉似麻，其性上升，故名。”升麻性味甘、辛、微寒，入肺、脾、胃經(jīng)。升麻具有清熱解毒、升舉陽氣、發(fā)表透疹的功效，主治風(fēng)熱頭痛、齒痛、咽喉痛、子宮脫垂等癥[2]。藥理研究表明，升麻屬植物所含的異阿魏酸（IFA）和阿魏酸（FA）具有抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛、抗?jié)?、降壓、?zhèn)靜、解痙、抗驚厥、抑制核苷轉(zhuǎn)運及抗病毒等作用[3-4]。其藥理活性成分主要分布大類為生物堿類、皂苷類、黃酮類、有機酸類[5]。

重慶市金佛山為國家級自然保護區(qū)，是我國中亞熱帶常綠闊葉林森林生態(tài)系統(tǒng)保存最完好的地區(qū)之一，共有植物資源5000余種。有小升麻、短果升麻、升麻、南川升麻、單穗升麻等分布[6]，其中小升麻、升麻、南川升麻三個品種分布較為集中，在海拔1400～1800m區(qū)域相互交錯。通過對金佛山幾種升麻主要化學(xué)成分的研究，為以后進一步的研究工作打下基礎(chǔ)。

1儀器與材料

11儀器梅特勒（上海）AL-104型分析天平；JA21002型上海越平電子天平；上海龍躍DHG-9623A型立式鼓風(fēng)干燥器；北京興時利和ZN-08中藥粉碎機；上海摩爾MoLecuLar標準智能型純水機；SmartTester CP-401型酸度計；攪拌器；索氏提取器；抽濾器。

12材料藥材采自重慶金佛山北坡地區(qū)，經(jīng)項目組鄧才富副研究員鑒定分別為升麻Cfoetida Linn、小升麻Cacerian（SiebEt Zucc）Tanaka和南川升麻Cnanchuanensis Hsiao三種；所用試劑均為分析純；水為現(xiàn)制純水。

2方法與結(jié)果

21生物堿的測定

211生物堿存在判定碘化鉍鉀試驗：取試樣的稀酸水溶液1ml，加碘化鉍鉀試劑1～2滴，顏色為棕黃色至棕紅色，屬陽性反應(yīng)；碘液試驗：取樣品水溶液1ml，加碘-碘化鉀試劑1～2滴，生成沉淀為褐色或暗褐色，屬陽性反應(yīng)；雷氏銨鹽試驗：取試樣的稀酸水溶液（pH3～4）1ml，加2%雷氏銨鹽試劑，生成沉淀為黃紅色，屬陽性反應(yīng)；苦味酸試驗：取試樣的中性水溶液，加苦味酸飽和水溶液一滴，生成沉淀為黃色，屬陽性反應(yīng)。

212生物堿含量測定取樣品粉末50g，置于1000ml錐形瓶中，加入水約600ml，用20%鹽酸調(diào)至pH為2，浸泡過夜，尼龍布過濾，得濾液，用濃氨水調(diào)pH至8～9，然后迅速用氯仿萃取得到氯仿液，無水硫酸鈉干燥，回收氯仿至干，得總生物堿（油狀物），同時做空白。

22有機酸的測定

221有機酸存在判定取粗粉5g，加10倍量水，回流提取2次，1h/次，過濾，合并提取濾液，取適量濾液，測其pH值，為弱酸性。

222有機酸含量測定分取樣品20g兩份，用索氏提取器，加10倍量95%甲醇，用水浴加熱回流提取2次，5h/次；將提取液轉(zhuǎn)移到500ml容量瓶中，用95%甲醇定容，用移液管準確吸取50ml提取液于錐形瓶中；用NaOH標準溶液進行滴定。同時做空白試驗。

23皂甙的測定

231皂甙存在判定取藥材粗粉5g，加10倍量水，回流提取2次，1h/次，過濾，合并提取濾液，振搖后生成的氣泡在15min內(nèi)不消失，屬陽性反應(yīng)。

232皂苷含量測定取兩份樣品各20g，先用石油醚脫脂；將水液倒入索氏提取器，加入95%乙醇200ml，水浴加熱回流2次，5h/次；將提取液濃縮后加入丙酮，進行過濾（以100ml為量，反復(fù)多次加入，以不再產(chǎn)生沉淀為止）；干燥沉淀，稱量得總皂苷。

24黃酮的測定

241黃酮存在判定取樣品粗粉10g，加5倍95%乙醇及60%乙醇在水浴上分別回流2次，1h/次，過濾，合并提取濾液，（取濾液濃縮成浸膏）加少量1～2%鹽酸溶液過濾，附在濾紙上的殘渣以少量乙醇溶解，得乙醇液；取乙醇液適量置試管中，加少許鎂粉振搖，再滴加幾滴濃鹽酸，水浴上加熱1～2min，觀察顏色有明顯變化，屬陽性反應(yīng)；取乙醇液適量滴于濾紙上，與1%三氯化鋁乙醇液紙斑反應(yīng)后，置于紫外燈下觀察，有明顯熒光，屬陽性反應(yīng)。

242黃酮含量測定稱取15g的石灰粉（CaO），置于干凈的小研缽中，加入10ml水后研成乳液備用；將樣品20g置于500ml燒杯中，加水300ml，在攪拌下加入上述制備的石灰乳，調(diào)節(jié)pH值至8～9，加熱至微沸，維持pH值至30min，趁熱抽濾；棄去濾渣，冷至60～70℃，用濃HCL調(diào)節(jié)pH至4～5，靜置1h，析出粗制蘆丁，抽濾，棄去濾液，收集粗制蘆??；將粗制蘆丁懸浮于蒸餾水中，加熱煮沸15min，然后趁熱過濾，棄去不溶物，充分靜置，過濾，收集蘆丁結(jié)晶，在60～70℃條件下干燥，得精制蘆丁。

25不同品種升麻的化學(xué)成分含量不同品種升麻四類化學(xué)成分差異較大。生物堿含量與有機酸呈明顯的負相關(guān)關(guān)系，結(jié)果見表1。

3結(jié)論與討論

研究對金佛山地區(qū)在海拔1400～1800 m區(qū)域分布較為集中的升麻、小升麻和南川升麻三個品種的生物堿、有機酸、總皂苷和總黃酮含量進行了初步研究，從實驗結(jié)果可以看出，除生物堿與有機酸的含量呈明顯的負相關(guān)關(guān)系外，金佛山地區(qū)三種升麻的生物堿、總皂苷和總黃酮含量分布一致，都以南川升麻的含量最高，其中南川升麻的生物堿含量是小升麻的25倍左右，是升麻的4倍多，優(yōu)勢明顯。

南川升麻為金佛山地區(qū)的特有種，只在金佛山北坡海拔1700m以上的地區(qū)有少量分布[7]。本研究的結(jié)果可以為南川升麻的保護性研究提供科學(xué)依據(jù)，同時對金佛山地區(qū)升麻藥材的野生撫育栽培提供支持。

參考文獻

[1]中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志（第27卷）[M].北京：科學(xué)出版社，1979：93-103.

[2]潘瑞樂，陳迪華，斯建勇.升麻地上部分化學(xué)成分研究[J].藥學(xué)學(xué)報，2003，38（4）：272.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：50.

[4]《全國中草藥匯編》編寫組.全國中草藥匯編（上冊）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1979：220.

[5]劉穎，張小茜.升麻質(zhì)量標準的研究[J].中草藥，2005，36（9）：1402-1404.

[6]劉正宇.重慶金佛山生物資源名錄[M].重慶：西南師范大學(xué)出版社，2007：70.

[7]羅川，鄧才富，劉開陽，等.南川升麻化學(xué)成分的初步研究[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐，2010，24（5）：38-39.

（收稿日期：20141027）