摘 要 以6個品種的龍眼果實為試驗材料，監(jiān)測了低溫[（4±0.5）℃]貯藏期間25個常規(guī)指標，運用相關分析、因子分析和逐步回歸分析方法對果實的貯藏性能進行綜合評估。結果表明：（1）分別得到了與褐變指數、自溶指數、衰老度和失重率等顯著相關的指標公因子組成及其解釋指標，并構建了相應的數學預測模型；（2）通過逐步回歸分析，得到了不同貯藏效果的有效評價指標，其中，褐變指數包括失重率、皮電導率、皮果糖和皮還原糖，自溶指數為肉還原糖，失重率包括肉還原糖和皮蔗糖，衰老度包括皮果糖、皮電導率和失重率； （3）6個品種中，石硤貯藏性能最好，其次為儲良、立冬本、水眼、東壁，后壁埔最差，評價指標中，皮電導率作用最大，其次是失重率、皮果糖和皮還原糖，肉還原糖作用最??； （4）本研究得到的4個預測模型中，除自溶指數外，其它3個均具有較好的解釋作用。

關鍵詞 龍眼果實；貯藏性能；統(tǒng)計分析；評價體系

中圖分類號 Q814 文獻標識碼 A

Evaluation System Based on the Conventional Indicators

Established for the Storability of Longan Fruit

Under Low Atmospheric Temperature

HAN Dongmei1，3， YANG Wu2， NIU Jiajia2， WU Zhenxian2，4*，

LI Jianguang1，3， PAN Xuewen1，3， GUO Dongliang1，3

1 Institute of Fruit Tree Research，Guangdong Academy of Agriculture Science，Guangzhou，Guangdong 510640，China

2 College of Horticulture，South China Agricultural University，Guangzhou，Guangdong 510642，China

3 Key Laboratory of South Subtropical Fruit Biology and Genetic Resource Utilization，

Ministry of Agriculture，Guangzhou，Guangdong 510640，China

4 Guangdong Key Lab for Postharvest Science of Fruit and Vegetable，Guangzhou，Guangdong 510642，China

Abstract This research was conducted to establish the evaluation system for the storability of longan fruit.Twenty-five conventional indicators were monitored for 6 varieties of longan fruit stored under low atmospheric temperature[（4±0.5）℃]. Correlation，factor and stepwise regression analyses were used to comprehensively evaluate the fruit storability. The results showed that the common factors and their interpretive indicators were screened from the related indicators to the different effects of storage，including pericarp browning，aril autolysis，mass loss and aging degree，and 4 mathematical models for them were also established respectively. By stepwise regression analysis，the indicator databases for different storage effects were established as the following：Indicators including rate of mass loss （RML），relative electricconductivity of pericarp（RECP）， fructose in pericarp（FP） and reducing sugar in pericarp（RSP）were screened for pericarp browning， reducing sugar in aril（RSA）for autolysis index；RSA and sucrose in pericarp（SP） for mass loss， and fructose in pericarp （FP），RML and RECP for aging degree. Among the 6 varieties，Shixia had the best storability，followed by Chuliang，Lidongben，Shuiyan and Donbi，and lastly Houbipu. As the effective indicators for evaluating fruit senescence，RECP played the most important role，then RML，FP，RSP，and the least is RSA. In addition，except for the model for aril autolysis，the other 3 ones among the 4 models above were all basically provided with statistical significance.

Key words Longan fruit；Storability；Statistic analysis；Evaluation system

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2015.09.023

龍眼（Dimocarpus longanLour.）果實風味甜美，營養(yǎng)豐富，具有較高的醫(yī)療保健價值，但其不耐貯藏，極易褐變，有時甚于荔枝，因品種而異。影響其貯藏性能的因素在于育種、栽培、采收、采后處理等每一個環(huán)節(jié)，采收時貯藏品質是決定其貯藏性能的首要條件，而貯藏期間果實品質水平和衰老程度則體現了果實貯藏性能的優(yōu)劣，并表現在各類衡量指標的變化規(guī)律上。關于龍眼果實貯藏期間各種生理生化變化和分子生物學方面的研究已經很多，包括果肉品質[1-3]、果皮褐變[4-7]、果肉自溶[8-9]、細胞壁變化[10-12]、呼吸作用[13-14]等，但其中的關鍵影響因子及其作用方式、作用大小等尚不明確，不能達到有效調控的目的，這也是保鮮技術難以獲得重大突破的主要原因之一。關于利用多元統(tǒng)計分析法研究果實貯藏過程中不同指標的變化與貯藏效果之間的關系，僅在芒果上有過類似報道[15]，但對不同因素的作用大小及其相互關系并未作深入研究，而在龍眼采后研究中也尚未見有相關報道。2011年筆者比較了30個品種龍眼果實的貯藏效果，根據果皮褐變與果肉自溶結果進行綜合分析后，將其分為強、中、弱3種類型；2012年從中各選擇2個品種為材料[16]，研究了貯藏期間不同糖組分及部分常規(guī)采后生理生化指標對低溫下龍眼不同貯藏效果的影響，探討不同作用因子之間的相互關系和作用方式，構建預測模型，為今后龍眼果實貯藏性能的簡便評價以及采后保鮮調控新目標的尋找和鎖定提供理論參考和實踐指導，并為進一步完善龍眼果實貯藏性能的科學評價體系奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

6個供試龍眼品種分別為石硤、水眼、東壁、后壁埔、儲良、立冬本，成熟度為85%～90%，于2012年7～9月采自廣東省農業(yè)科學院果樹研究所龍眼種質資源圃，依據果肉可溶性固形物含量和果實內外形態(tài)變化來判斷果實成熟度[17]。生長結果期間，6個品種管理水平一致，近期引進品種立冬本和后壁埔也已經連續(xù)結果3～4 a以上，果實品種特征基本穩(wěn)定。樣品采收后，2 h內運回實驗室進行分析測定和貯藏試驗。

1.2 方法

果實采收后，于當天選擇成熟度均勻一致且無病、蟲、傷、褐的龍眼果實，在500 mg/kg的施?？巳芤褐薪? min，晾干，采用0.03 mm厚的聚乙烯袋包裝，于低溫[（4 ± 0.5）℃]中貯藏，每袋30個果實，每個品種18袋。在果實貯藏0、7、14、21、28、35 d時分別觀察和取樣，每次用3袋，每個果實各取一半果皮和一半果肉，分別以液氮徹底凍結后用錫紙包好，再裝入自封袋，于-30 ℃低溫冰箱貯藏，重復3次。

（果皮）褐變指數和果實失重率：參照韓冬梅等[13]的方法；（果肉）自溶指數參照劉熙東[8]的方法；果實好果率：以無霉變和自溶的為好果，好果率/%=好果數/總果數×100；呼吸強度：參照季作梁等[18]的方法。

果實糖組分：以凍樣為材料，參照王靜等[19]的方法并有所改進，使用德國Agilent 1 200 LC高效液相色譜儀測定，以購自Sigma公司的分析純果糖、葡萄糖和蔗糖作標樣制定標準曲線，通過保留時間和峰面積的比較來測定果皮和果肉中葡萄糖、果糖、蔗糖的種類和含量，重復3次。還原糖=葡萄糖+果糖，總糖=葡萄糖+果糖+蔗糖。

果肉品質：可溶性固形物（TSS）用ATAGO-32α數顯折光儀直接測定，可滴定酸（TA）測定參照寧正祥[20]的方法，維生素C（Vc）測定參照Kampfenkel等[21]的Fe3+還原法，可溶性蛋白質含量測定參照Bradfod[22]的方法。

果皮（相對）電導率：參照朱廣廉等[23]的方法。另以果皮凍樣為材料，分別測定以下指標：維生素C含量、類黃酮和總酚含量（均參照張永麗等[24]的方法）、多酚氧化酶（PPO）活性（參照譚興杰等[25]的方法）、過氧化物酶（POD）活性（參照曾韶西等[26]的方法）。

以上指標，除注明使用凍樣外，其它均用鮮樣測定，并設置3個樣品重復。

1.3 數據處理

運用SPSS19.0統(tǒng)計軟件[27-28]對所有測定指標進行相關的統(tǒng)計分析，主要運用了雙變量相關分析、因子分析和多元線性回歸分析方法。以6個龍眼品種的6個貯藏時期（6×6）共36個貯期材料為樣本，以25個監(jiān)測指標為變量，包括失重率、呼吸強度、肉TSS、肉TA、果肉和果皮共同指標（維生素C、可溶性蛋白、蔗糖、葡萄糖、果糖、還原糖、總糖、單雙糖比）、果皮電導率、總酚和類黃酮、PPO和POD。首先分析其與貯藏效果指標褐變指數、自溶指數、好果率、失重率的相關性，篩選出相關性顯著的變量，再對其進行因子分析或逐步回歸分析，綜合得出公因子及其解釋變量，得到能夠預測果實貯藏效果的有效指標及其預測模型。

從研究方法可知好果率僅是對完全無褐變、無腐爛癥狀的果實進行統(tǒng)計，不能充分反映全部試驗果的褐變及自溶程度，故采用主成分分析法綜合評估褐變指數和自溶指數，得到與之相對應的果實衰老度，并以之為目標展開一系列的指標分析工作。

為了對6個品種的貯藏效果進行直觀比較，以6個品種果實的不同貯藏時期材料為樣本，運用SPSS19.0統(tǒng)計軟件，以自溶指數和褐變指數標準化后的數值構建四分圖，對樣本的貯藏效果進行分類。以與2個貯藏效果（褐變指數、自溶指數）相關的5個有效評價指標（皮電導率、失重率、皮果糖、肉還原糖、皮還原糖）為樣本，并以這5個有效評價指標與2個貯藏效果指標的偏相關系數構建四分圖，直觀分析不同指標對褐變和自溶的作用大小。

2 結果與分析

2.1 與龍眼果皮褐變指數相關的指標篩選和作用模型的建立

將各品種龍眼果實在不同貯藏時期的果皮褐變指數及其相關指標進行相關分析。與之顯著相關的指標（r值，*顯著相關，**極顯著相關）有：失重率0.693**、皮電導率0.685**、皮Vc-0.535**、皮還原糖0.444**、皮果糖0.506**、皮單雙糖比0.524**、皮PPO -0.330*。因子分析結果得到2個公因子，累積貢獻率為70.571%（表1），選擇載荷值大于0.6的指標作為解釋變量（表1中加粗且下劃線部分，下文同）。因子F1（果皮氧化還原因子）為42.443%（因子貢獻率），解釋變量包括：皮還原糖、皮果糖、皮單雙糖比、皮PPO-；因子F2（其它因子）為28.127%，包括皮Vc（-）、皮電導率、失重率?？梢娸^高的皮電導率、失重率、皮還原糖、單雙糖比例，較低的Vc含量，都有助于促進貯藏過程中龍眼果皮的褐變。根據回歸方程F褐變綜合評分=0.424 43F1′+0.281 27F2′，F1′和F2′是系統(tǒng)自動給出的各品種各貯藏時期的公因子得分（下文同），系數為其權重（貢獻率），由此計算出F褐變綜合評分，其與果皮褐變指數的相關系數為0.783**（表2），說明這些指標的選擇比較合理，具有較好的信息完整度。

以褐變指數為因變量、7個相關指標為自變量進行逐步回歸，得到預測模型（表3）：Y理論褐變指數=-1.593+0.444X失重率+0.077X皮電導率+0.564X皮果糖-0.288X皮還原糖，決定系數為0.866， P值為0；得到有效指標X失重率、X皮電導率、X皮果糖、X皮還原糖，其與褐變指數的偏相關系數分別為0.757、0.693、0.482、-0.370（表3），反應出它們的作用大?。粚⒏髦笜酥荡肽Ｐ?，計算出的Y理論褐變指數與實際褐變指數的相關系數為0.931**（表2），說明該預測模型能夠較為真實地反應果實褐變能力。其中，皮還原糖與褐變指數的相關系數、偏相關系數的正負方向不一致，因為后者比前者更能反應變量之間的內在線性關系，且消除了其它因素的影響，因此選擇偏相關系數來反應皮還原糖對褐變指數的作用大小和方向更為合理。

2.2 與龍眼果肉自溶指數相關的指標篩選和作用模型的建立

與各品種不同時期的自溶指數顯著相關的指標有：失重率0.415*、肉TSS -0.386*、肉葡萄糖 -0.414*、肉果糖 -0.463**、肉還原糖 -0.485**、肉總糖 -0.404*，經因子分析后得到2個公因子，累積貢獻率為85.586%（表4）。因子F1（果肉還原糖和質量損耗因子）為50.667%，包括肉還原糖、肉果糖、肉葡萄糖、失重率（-）；因子F2（總糖因子）為34.919%，包括肉總糖，肉TSS。根據回歸方程F果肉完好度綜合評分=0.506 67F1′+0.349 19F2′，計算F果肉完好度綜合評分，其與自溶指數的相關性為-0.555**（表2），說明選擇的指標信息基本能夠反應出果肉自溶的程度，較高的果肉還原糖、總糖和TSS含量及較低的失重率有助于延緩自溶的發(fā)生。

以龍眼果肉自溶指數為因變量、各相關指標為自變量進行逐步回歸，得到預測模型（表3）如下：Y理論自溶指數=1.886-0.026X肉還原糖，決定系數為0.235，P值為0.003；有效指標X肉還原糖與自溶指數的偏相關系數為-0.485，由此計算出Y理論自溶指數與實際自溶指數的相關系數為0.485**，說明二者具有較好的一致性（表2）。

2.3 與衰老度相關的指標篩選和作用模型的建立

相關分析結果顯示，好果率與褐變指數、自溶指數的相關系數分別為-0.793**和-0.937**，后兩者之間的相關系數為0.840**。以6個品種果實不同貯藏時期的自溶指數和褐變指數為變量進行主成分分析，得到1個公因子，方差貢獻率為91.991%。根據回歸模型F衰老度=0.919 91F1′，計算出每個品種各貯藏時期的F衰老度，其大小在-0.73～2.09之間，相當于好果率在100%～14.67%之間，F衰老度與好果率、褐變指數和自溶指數的相關系數分別為：-0.902**、0.959**和0.959**（表2），說明F衰老度不僅能夠很好地反應果實的實際好果率，而且比好果率更能體現自溶指數和褐變指數在果實綜合貯藏能力評估中的作用。

將F衰老度與所有指標進行相關分析，與之顯著相關的指標有：失重率0.578**、肉TSS -0.353*、肉Vc -0.379*、肉葡萄糖 -0.470**、肉果糖 -0.639**、肉還原糖 -0.610**、肉總糖 -0.387*、皮電導率0.696**、皮Vc -0.508**、皮總糖0.349*、皮還原糖0.539**、皮葡萄糖0.379*、皮果糖0.592**、皮單雙糖比0.549**、皮PPO -0.392*，共15個指標。

因子分析結果得到4個公因子，累積貢獻率達86.888%（表5）。因子F1（皮糖組分和肉總糖因子）的方差貢獻率為44.487%，包括皮葡萄糖、皮果糖、皮還原糖皮總糖、肉TSS（-）、肉總糖（-）、皮PPO（-）、肉Vc（-）；因子F2（果肉單糖和質量損耗因子）的方差貢獻率為23.262%，包括肉還原糖、肉果糖、肉葡萄糖、失重率（-）；因子F3（果皮活力因子）的方差貢獻率為10.505%，包括皮Vc（-）、皮電導率；因子F4的方差貢獻率為8.633%，僅有皮單雙糖比。根據回歸模型F衰老度綜合評分=0.444 87F1′+0.232 62F2′+0.105 05F3′+0.086 33F4′，計算得出F衰老度綜合評分，其與好果率、衰老度的相關性分別為-0.385*、0.278（表2）。可見F衰老度綜合評分與F衰老度一致性較差，說明選擇的指標不太合理，第一、二主成分中果皮、果肉糖分含量占據67.749%的權重，糖類指標太多，其分析結果不能充分體現果實的貯藏效果，一些與衰老度關系密切的指標作用被弱化。

以F衰老度為因變量、各相關指標為自變量進行逐步回歸，得到預測模型（表3）：Y理論衰老度=-2.684+0.176X皮果糖+0.357X失重率+0.075X皮電導率，決定系數為0.833，P值為0；得到有效指標X皮果糖、X失重率、X皮電導率，其與F衰老度的偏相關系數分別為0.773、0.689、0.665，由此計算出Y理論衰老度，其大小在-1.17～2.04之間，其中負值對應的好果率都在98%以上，其與F衰老度和實際好果率的相關系數分別為0.908**和-0.804**，具有較好的一致性（表2）。

2.4 與失重率相關的指標篩選和作用模型的建立

與失重率顯著相關的指標如下：肉葡萄糖-0.448**、肉果糖-0.704**、肉還原糖-0.630**、肉單雙糖比-0.515**、皮電導率0.390*、皮Vc -0.431**、皮總酚0.654**、皮蔗糖-0.385*、皮單雙糖比0.344*，共9個指標。因子分析結果得到3個公因子，累積方差貢獻率為76.569%，選擇載荷值大于0.7的指標作為解釋變量（表6）。因子F1（果肉還原糖因子）的方差貢獻率為40.324%，包括肉還原糖、肉葡萄糖、肉果糖；因子F2（果皮存儲因子）的方差貢獻率為22.165%，包括皮總酚（-）、皮蔗糖；因子F3的方差貢獻率為14.079%，僅有皮單雙糖比。依據回歸模型F失重率綜合評分=0.403 24F1′+0.221 65F2′+0.140 79F3′，計算得到F失重率綜合評分，其與失重率的相關系數為-0.670**（表2），說明選擇的變量基本能夠解釋不同品種不同貯藏時期的失重率差異。

以失重率為因變量、各相關指標為自變量進行逐步回歸，得到預測模型（表3）如下：Y理論失重率=6.329-0.061X肉還原糖-0.190X皮蔗糖，決定系數為0.701，P值為0.02，得到有效指標X肉還原糖、X皮蔗糖，其與失重率的偏相關系數分別為-0.806、-0.710，由此計算出Y理論失重率與實際失重率的相關系數為0.837**（表2），說明該模型具有較高的可靠性。

2.5 不同品種龍眼果實低溫貯藏性能評估和有效評價指標的作用大小

圖1顯示，龍眼果實不同貯藏效果表現為規(guī)律性分布，褐變指數與自溶指數具有較好的一致性。水眼、東壁、儲良、立冬本和后壁埔貯藏21 d、石硤貯藏35 d之前，均保持較低的褐變指數和自溶指數，效果接近；東壁和后壁埔貯藏28 d和35 d、水眼和立冬本貯藏35 d時，褐變指數和自溶指數均達到高水平；立冬本、水眼貯藏28 d，儲良貯藏28 d和35 d時，自溶指數中等偏低，但褐變指數中等偏高。由此可以看出，石硤貯藏效果最好，其次儲良、立冬本、水眼、東壁，后壁埔貯藏效果最差。

圖2顯示，在綜合貯藏效果中，距離中心0值越遠的指標，發(fā)揮的作用越大，反之則越小。其中，果皮相對電導率作用最大，然后依次是失重率、皮果糖、肉還原糖和皮還原糖，作用較大的前3個指標與2.3中的衰老度預測指標構成一致?？梢姡A藏后期或衰老度增加的龍眼果實明顯具有較高的果皮相對電導率、失重率和皮果糖含量，較高的皮還原糖含量對降低褐變指數和自溶指數有一定作用，肉還原糖作用最小。

3 討論與結論

3.1 研究指標的選擇、貯藏效果相關指標的篩選和簡化研究

為了實現簡便、快捷評價龍眼果實低溫貯藏性能的目的，本研究以常規(guī)指標為研究對象，監(jiān)測了果實貯藏過程中的內外品質和生理變化。一類為貯藏效果指標，一類為品質與常規(guī)衰老生理指標，能夠直接反應果實衰老、品質保持和細胞結構完整程度等。在生產中，經常使用TSS含量來代替糖含量，但龍眼屬于高糖、強呼吸類型的水果，不同糖組分在采后貯藏過程中對呼吸作用、果實貯藏壽命和貯后品質的影響不可忽視。本研究篩選出的貯藏效果評價指標具備較高的可靠性，能夠直觀地評價果實的衰老程度和貯藏性能。其中一些監(jiān)測指標在個別品種中能夠較好地解釋果實衰老的原因，但在多品種大樣本的研究中，則不一定具有普遍性；也可能出現一些新的指標關系，但需要進一步研究與驗證。

因子分析法在大樣本多變量研究中，可以起到篩選特征指標、抽取綜合因子和簡化分析結果的作用[29-30]，本研究運用該法得到龍眼果實4種貯藏效果的綜合評價，得到的特征指標、公因子及其貢獻率基本上能夠反映出不同品種不同貯藏時期的貯藏效果差異及其發(fā)生原因。而衰老度綜合評分結果還表明，只有正確選擇分析變量，綜合評價結果才會可靠；而筆者在開展相關研究工作時，選擇的指標很可能不能量化地反映所要研究的問題，需要進一步分析其作用大小，才能確定指標的意義。

3.2 影響各貯藏效果的常規(guī)有效指標的篩選和預測模型的意義

運用逐步回歸分析方法，對褐變指數、自溶指數、衰老度和失重率分別建立了預測模型，決定系數分別為 0.866、0.235、0.833、0.701，可見，除自溶指數外，其它3個模型基本上能夠滿足預測要求，解釋水平>70%，其中褐變指數預測模型解釋度最高。本研究僅是對影響龍眼果實低溫貯藏效果的常規(guī)指標開展研究，其結果具備的是常規(guī)指標的預測意義，隨著研究方法的改進和研究思路的開拓，不斷引入新的指標，可以得到更為理想的預測模型，為今后龍眼果實貯藏特性和保鮮技術研究提供更加明確的研究目標。

3.3 各有效評價指標與果實貯藏期間衰老的關系

關于失重率和皮電導率在龍眼采后衰老過程中的作用和表現已有不少報道[13，31-32]，而本研究則明確了它們在龍眼貯藏性能評估中的作用大小與評估方式；其它指標如皮果糖與褐變、肉還原糖與失重率、果肉糖組分與自溶的關系，尚未見有相關報道。作為重要的品質因子，果肉糖組分水平變化與自溶的發(fā)生和發(fā)展具有明顯的一致性[1-3]；在板栗種子成熟前后[33]、香菇貯藏期間[34]，還原糖含量與果實褐變程度都顯著相關，研究認為果實褐變與非酶促褐變有關，或者與酶促褐變同時存在。龍眼果皮中含有的黃酮類化合物槲皮素[35]為含鄰位酚羥基黃酮類化合物，與自由基反應后可以形成較為穩(wěn)定的共軛半醌式自由基，表現為較強的抗氧化性，但黃酮3位上的羥基被糖基化后，其抗氧化性則會明顯降低[36]。用微波處理胡柚后，其中的黃烷酮糖苷可分解為對應的抗氧化能力更強的黃烷酮糖苷配基，并顯著提高胡柚皮的抗氧化能力[37]。由此推測，龍眼果皮中的糖類物質可能通過非酶促褐變或形成黃酮糖苷的方式影響果皮褐變，本研究也證實，果皮中較高的果糖含量可以促進褐變發(fā)生，但其內在的作用機理有待進一步深入研究。

另外，失重率既是一項常規(guī)的生理變化指標，也是貯藏效果指標，其與龍眼果皮褐變程度具有較高的一致性[13，31]，而失重是果肉呼吸消耗的重要表現形式。貯藏期間果肉糖組分的變化與果皮褐變的進程是并行關系還是相互影響，需要進一步探索研究。

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