張龍顏，李保珍，李丹，張曉峰，王蘭＊

（1.山西大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，山西 太原 030006；2.山西省煤炭地質(zhì)局，山西 太原 030006）

0 引言

山西擁有豐富的地下巖溶水資源，但是礦化度和硬度很高。經(jīng)測定，太原市清徐縣地下巖溶水的礦化度和硬度（以CaCO3計(jì)）分別高達(dá)3 109 mg·L－1、2 856 mg·L－1，屬于高礦化度和高硬度水，不能直接作為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)用水和生活飲用水［1］。常規(guī)化學(xué)絮凝劑在使用過程中會對水質(zhì)帶來一定危害，例如化學(xué)絮凝劑聚合氯化鋁中的鋁離子對環(huán)境危害主要包括：毒害水生生物和微生物，通過食物鏈和飲用水最終危害人體健康［2］。近年來，微生物作為一種新型的絮凝劑備受關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)，利用微生物進(jìn)行水處理具有良好的效果，體現(xiàn)出活性高、用量少、無二次污染等優(yōu)點(diǎn)［3－6］。

微生物處理污水和廢水的原理是，運(yùn)用微生物菌體或其產(chǎn)生的代謝物對水體中的污染有機(jī)物、固體懸浮顆粒、菌體細(xì)胞及膠體粒子等發(fā)生凝聚、沉淀［7］。郭彥涵［8］發(fā)現(xiàn)用啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）制作的固定化菌可以處理高礦化度和高硬度水，即利用固定化劑海藻酸鈉包埋啤酒酵母制作的固定化小球，較單獨(dú)添加啤酒酵母或海藻酸鈉空白球處理效果更好；其發(fā)現(xiàn)固定化小球在投加量4g·L－1、絮凝時間60 min時，對巖溶水中離子吸附效果最大；分析水樣后發(fā)現(xiàn)，啤酒酵母固定化小球?qū)r溶水中的離子尤其是Ca2＋、Mg2＋具有很強(qiáng)的吸附性能，能夠降低巖溶水的硬度和礦化度。但是，關(guān)于固定化因素對小球物理性質(zhì)及對硬度礦化度處理效率的影響少見報(bào)道。

本研究從制作固定化小球的固定化因素出發(fā)，選出具有最優(yōu)物理性質(zhì)的固定化區(qū)間，再以選出的最優(yōu)物理性能的固定化因素為水平區(qū)間，以巖溶水的硬度和礦化度處理效率為指標(biāo)進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，探討固定化因素對巖溶水硬度和礦化度絮凝效果的影響，研制出固定化小球的最優(yōu)固定化條件。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑

海藻酸鈉（優(yōu)級純，天津光復(fù)精細(xì)化工研究所）；氯化鈣（分析純，天津市巨星圣源化學(xué)試劑有限公司）；鈣和鎂標(biāo)準(zhǔn)液：購自國家標(biāo)準(zhǔn)樣品研究所；

1.1.2 主要儀器

火焰原子吸收儀（美國瓦里安公司，AA240FS）、雷磁便攜式電導(dǎo)率儀（上?；瘜W(xué)精密科學(xué)儀器有限公司，DDB-303A）、空氣恒溫?fù)u床（美國 GXROMAX，SK-767）、醫(yī)用高速離心機(jī)（北京醫(yī)用離心機(jī)廠）、磁力攪拌器（雙向磁力加熱攪拌器，78-2型）、掃描電子顯微鏡（日本，JSM-6360LV）、冷凍干燥機(jī)（上海比朗儀器制造有限公司，F(xiàn)D-1A-50）

1.1.3 實(shí)驗(yàn)菌種

啤酒酵母（取自山西大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室），所需培養(yǎng)基如下：種子培養(yǎng)基：馬鈴薯20 g，葡萄糖2 g，蒸餾水100 m L；121℃滅菌30 min［9］。擴(kuò)大培養(yǎng)基：葡萄糖2 g，麥芽糖3 g，蛋白胨10 g，氯化鈉5 g，酵母粉10 g，牛肉膏5 g，蒸餾水1 000 m L；121℃滅菌30 min［10］。培養(yǎng)方法：取一環(huán)保藏的啤酒酵母菌種接種到種子培養(yǎng)基上，恒溫?fù)u床110 r·min－1、28℃培養(yǎng)3 d，再以3% 的接種量接種到擴(kuò)大培養(yǎng)基上。在110 r·min－1、28℃條件下進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)3 d后［11］，取啤酒酵母菌液在離心機(jī)上以4 000 r·min－1、10 min離心得到菌體之后，用無菌蒸餾水沖洗菌體再次離心。重復(fù)3次后得到菌體備用。

1.1.4 水樣

巖溶水（采自太原市清徐縣北營村井下700 m處），經(jīng)原子吸收儀測定水樣離子含量后，計(jì)算出開采出來的水樣總硬度（以CaCO3計(jì)）達(dá)到2 856 mg·L－1，礦化度（經(jīng)電導(dǎo)率儀測定后經(jīng)公式換算）達(dá)3 109 mg·L－1，屬于高礦化度高硬度水。

1.2 方法

1.2.1 啤酒酵母絮凝劑的制備流程

絮凝劑的制備流程如下：① 稱取一定質(zhì)量的海藻酸鈉溶于水中，配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的海藻酸鈉溶液；②取一定質(zhì)量的啤酒酵母加入到質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2% 海藻酸鈉溶液中，攪拌均勻后配成菌體占總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的混合液；③ 用10 m L注射器取混合液滴入到預(yù)先配好的質(zhì)量分?jǐn)?shù)2% 的氯化鈣溶液中交聯(lián)成球，4℃ 冰箱靜置6 h，抽濾、洗滌后放入保藏培養(yǎng)基中備用［6，12］。

1.2.2 啤酒酵母包埋菌的馴化培養(yǎng)

配置保藏馴化培養(yǎng)基，保藏馴化培養(yǎng)基成分為：葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、p H自然，保藏培養(yǎng)基所用水為巖溶水。其中將制備好的固定化啤酒酵母以一定的質(zhì)量比例加到裝有保藏培養(yǎng)基的250 m L三角錐瓶中，在空氣恒溫?fù)u床上以110 r·min－1、28℃ 條件培養(yǎng)馴化3 d，期間保藏培養(yǎng)基每天一換。

1.2.3 啤酒酵母包埋菌絮凝巖溶水的分析方法

取上述制作馴化了的固定化啤酒酵母0.8 g投入到200 mL巖溶水中，在磁力攪拌器上（以750 r·min－1轉(zhuǎn)速）常溫處理60 min，之后取樣過濾，稀釋，測鈣、鎂離子含量及電導(dǎo)率，并計(jì)算硬度和礦化度及絮凝率［15－17］。

1.3 固定化因素對啤酒酵母絮凝劑物理性能的影響

1.3.1 海藻酸鈉濃度、菌體質(zhì)量比、交聯(lián)時間及氯化鈣濃度對固定化小球物理性能的作用

在其他條件不變的情況下，相應(yīng)的海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為1.0%－4.0%、菌體質(zhì)量比分別為4%、6%、8%、10%、12%，交聯(lián)時間4 h、6 h、8 h、12 h、24 h以及氯化鈣濃度分別為1%、2%、3%、4%、5%。制作方法與1.2.1的方法相同，選取一定量的小球過濾、抽濾、洗滌測其成球性能、機(jī)械強(qiáng)度和滲透性能。成球效果：肉眼觀察；機(jī)械強(qiáng)度測定：取制作好的10粒大小一樣的固定化小球放在兩個干凈的載玻片之間，用濾紙吸干小球水分，用載玻片緩慢壓小球，以小球破碎瞬間的電子天平指示的數(shù)值作為小球（換算成10－2N）機(jī)械能力指標(biāo)，連測3次取平均值［13］；滲透性能測試：選取形態(tài)完好、大小均勻的固定化小球，浸入惰性紅墨水中，記錄小球被紅墨水完全滲透的時間［14］。

1.3.2 用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化制作啤酒酵母固定化小球的固定化因素

以SA濃度、菌體質(zhì)量比、交聯(lián)時間和氯化鈣濃度為正交實(shí)驗(yàn)因素，分別記作A、B、C、D，以單因素最優(yōu)物理性質(zhì)為水平區(qū)間，以硬度、礦化度絮凝率為指標(biāo)，通過正交實(shí)驗(yàn)選出最優(yōu)固定化條件。

1.4 硬度和礦化度及絮凝率分析方法

總硬度測定方法用文獻(xiàn)［18-19］的方法，先用火焰原子吸收儀測定水樣中鈣和鎂離子的濃度，后用如下公式（1）計(jì)算總硬度，其中，TH 為總硬度，［Ca2＋］為 Ca2＋濃度（mg·L－1），［Mg2＋］為 Mg2＋濃度（mg·L－1），總硬度（TH）以CaCO3計(jì)，計(jì)算每升巖溶水中鈣鎂離子的總物質(zhì)的量（mmol），并與系數(shù)100.08相乘得到每L巖溶水中所含CaCO3的質(zhì)量（mg）即為總硬度。硬度絮凝率的計(jì)算如式（2）所示，其中R為絮凝率，C0為原巖溶水的硬度，C為經(jīng)絮凝劑處理后巖溶水的硬度。

礦化度的測定參照公式（3）時紅［20］的方法，其中，y為礦化度（mg·L－1），x為電導(dǎo)率（mS·cm－1），先用電導(dǎo)率儀測定水樣中的電導(dǎo)率，再通過公式（3）計(jì)算礦化度，并計(jì)算絮凝率，絮凝率的計(jì)算如式（2）。

2 結(jié)果

2.1 包埋菌形態(tài)及表面微觀結(jié)構(gòu)

新制備的包埋菌小球（如圖1a）為直徑約1～2 mm的規(guī)則小球，其中小球凝膠部分為白色呈半透明狀，整體顏色因包埋活性啤酒酵母而成肉眼可見的乳白色，小球表面光滑且有彈性，機(jī)械強(qiáng)度良好，無異味。將固定化小球冷凍干燥后、噴金、在掃描電子顯微鏡下觀察（圖1b、c、d），可以發(fā)現(xiàn)固定化小球表面凹凸不平并有大量凸起，分別放大300和1 000倍后，發(fā)現(xiàn)固定化小球表面附著著大量的啤酒酵母菌，海藻酸鈉跟氯化鈣的交聯(lián)能夠?yàn)槠【平湍柑峁┝己玫纳姝h(huán)境；在凸起處有許多球形突起，說明啤酒酵母與包埋凝膠體表面結(jié)合緊密。而菌團(tuán)狀的啤酒酵母則增強(qiáng)了其對金屬離子的集中絮凝能力；菌越集中，則受到水的沖刷力就越小。在包埋菌馴化絮凝巖溶水后發(fā)現(xiàn)，小球表面變化較大（圖1e），其中小球表面附著大量的似菌體代謝產(chǎn)物的絮狀物，小球表面多出許多孔隙和空洞，能夠?yàn)榕c金屬離子結(jié)合提供條件，而菌代謝產(chǎn)物蛋白質(zhì)、核酸上的活性基團(tuán)能夠與金屬離子絡(luò)合并形成絡(luò)合物并附著在小球表面。

Fig.1 Shape and SEM pictures of immobilization pellets圖1 固定化小球形態(tài)與表面微觀結(jié)構(gòu)

2.2 海藻酸鈉濃度對固定化小球物理性能的影響

表1 海藻酸鈉濃度對固定化效果的影響Table 1 Effect of sodium alginate concentration on immobilization effect

從表1可以看出，隨著SA濃度的增大，固定化小球機(jī)械強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)，滲透時間逐漸增加。當(dāng)SA溶液濃度在1.0%－1.5%時，固定化小球不成球或者成球形狀不規(guī)則。滲透時間短表明紅墨水傳質(zhì)性能良好；機(jī)械強(qiáng)度低使得抗壓力差、容易破碎，導(dǎo)致不能重復(fù)利用。當(dāng)SA溶液在2.0%－3.0% 時，固定化小球成球形狀規(guī)則、有彈性，滲透時間較短、傳質(zhì)性能良好；機(jī)械強(qiáng)度隨著SA溶液濃度的增加而增加，增加重復(fù)利用性。然而，當(dāng)SA溶液濃度高于3.0%時，固定化小球成球有嚴(yán)重的拖尾現(xiàn)象，機(jī)械強(qiáng)度雖然大但是傳質(zhì)性能不理想，不利于菌體發(fā)揮其活性。故選用2.0%－3.0% 濃度的SA作為包埋劑包埋菌體。

2.3 菌體包埋比、交聯(lián)時間與氯化鈣濃度對固定化小球物理性能的影響

依據(jù)海藻酸鈉濃度對固定化菌物理性質(zhì)的實(shí)驗(yàn)分析方法，同理可得，當(dāng)啤酒酵母菌體與SA質(zhì)量比例為6%－10%時，固定化小球成球規(guī)則，機(jī)械強(qiáng)度好，達(dá)到32.61×10－2N以上，傳質(zhì)性能好。交聯(lián)時間是指菌體－SA混合液滴入交聯(lián)劑氯化鈣溶液后的成球反應(yīng)時間，由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，當(dāng)交聯(lián)時間為6～10 h時，其小球成球規(guī)則，機(jī)械強(qiáng)度高、傳質(zhì)性能良好。同理，應(yīng)選用2%－4% 氯化鈣作為其最佳包埋交聯(lián)劑濃度。

2.4 正交實(shí)驗(yàn)因素與結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)采用正交表L9（34）進(jìn)行試驗(yàn)，即四因素三水平，共有9組實(shí)驗(yàn)組，每組三次重復(fù)。以海藻酸鈉、菌體質(zhì)量比、氯化鈣和交聯(lián)時間為因素，以單因素物理性質(zhì)實(shí)驗(yàn)選出的最優(yōu)水平為正交實(shí)驗(yàn)水平，分別以硬度和礦化度絮凝率為試驗(yàn)指標(biāo)。正交試驗(yàn)因素及水平如下表2所示，正交試驗(yàn)結(jié)果及方差分析如表3、表4、表5、表6所示，其中礦化度絮凝率結(jié)果及方差分析如表3、表4所示，硬度絮凝率結(jié)果及方差分析如表5、表6所示。

表2 正交試驗(yàn)因素及水平Table 2 Factors and levels of orthogonal array design

表3 礦化度正交試驗(yàn)結(jié)果Table 3 Orthogonal results of salinity

表3是以礦化度絮凝率為指標(biāo)計(jì)算出的各因素條件下的實(shí)驗(yàn)結(jié)果之和與極差，分別用k1、k2、k3表示，極差用R表示，k越大表示條件越優(yōu)，從表可以看出：比較k1、k2、k3的大小可以得出，A2B3C3D3為各個因素的最佳水平組合，分析極差R大小可以得出各因素對礦化度絮凝率影響順序?yàn)椋築（菌體質(zhì)量比）＞D（交聯(lián)時間）＞A（SA濃度）＞C（氯化鈣濃度）。當(dāng)P＜0.01時，表明該因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響極顯著；當(dāng)0.01＜P＜0.05時，表明該因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響為顯著；而P＞0.05為不顯著。由表4方差分析結(jié)果可知，菌體質(zhì)量比對絮凝劑礦化度絮凝率影響呈極顯著；交聯(lián)時間影響顯著；而SA濃度和氯化鈣濃度則影響不顯著，比較P值和F值大小可得絮凝劑對礦化度絮凝率影響大小順序?yàn)椋壕w質(zhì)量比＞交聯(lián)時間＞SA濃度＞氯化鈣濃度，與直觀極差分析相吻合。綜合來看，對礦化度絮凝率最優(yōu)的絮凝劑的制作條件為：3%SA濃度、10%的菌體質(zhì)量比、4%的氯化鈣濃度和10h的交聯(lián)時間。絮凝劑對礦化度絮凝率影響大小順序?yàn)椋壕w質(zhì)量比＞交聯(lián)時間＞SA濃度＞氯化鈣濃度。

表4 礦化度方差分析Table 4 Anova for salinity

表5 硬度正交試驗(yàn)結(jié)果Table 5 Orthogonal results of hardness

表6 硬度方差分析Table 6 Anova for hardness

由表5同理可知，比較k值大小可以得出，A1B2C1D3為各個因素的最佳水平組合，即2%的SA濃度、8%的菌體質(zhì)量比例、2%的氯化鈣濃度和10 h的交聯(lián)時間。比較極差R大小可知各因素對礦化度絮凝率影響順序?yàn)椋篈（SA濃度）＞B（菌體質(zhì)量比）＞D（交聯(lián)時間）＞C（氯化鈣濃度）。由表6可知：氯化鈣濃度對絮凝劑硬度絮凝率影響不顯著，其余因素都呈極顯著，比較P值和F值大小可得絮凝劑對硬度絮凝率影響大小順序?yàn)椋篠A濃度＞菌體質(zhì)量比＞交聯(lián)時間＞氯化鈣濃度。

對硬度絮凝率較好的最優(yōu)組合為：A1B2C1D3；而礦化度最優(yōu)組合為：A2B3C3D3，故對因素A（SA濃度）來說，可以選取A1A2二種情況。但是從極差與方差分析來看，A因素對硬度絮凝率影響較大，結(jié)合成本來考慮，應(yīng)選A1即2.0%的海藻酸鈉。對于因素B來說，可取B2B3，但由于因素B對礦化度絮凝率影響較大，即選擇B310% 的菌體海藻酸鈉質(zhì)量比作為最佳包埋比例。因素C對硬度礦化度影響都比較小，可得C1或者C3即2%、4% 的氯化鈣濃度都可以作為其最佳交聯(lián)劑濃度。結(jié)合處理率考慮，選擇C3即4%作為最佳氯化鈣濃度；同理可得交聯(lián)時間D3即10 h為其最佳交聯(lián)時間。綜合考慮各因素確定固定化小球最佳制作方案為：A1B3C3D3，即2.0% 的海藻酸鈉濃度、10% 的菌體包埋比、4.0% 氯化鈣和10 h的交聯(lián)時間，并且硬度礦化度處理率分別達(dá)到76.97% 和59.77%，礦化度從3 109 mg·L－1降到1 258 mg·L－1，硬度從2 856 mg·L－1降到了658 mg·L－1。

2.5 固定化啤酒酵母絮凝巖溶水的機(jī)理初探

一般情況下，微生物絮凝重金屬離子有以下幾種情況：胞外富集，表面吸附或者絡(luò)合，胞內(nèi)富集。其中，表面的吸附和絡(luò)合對死、活微生物都存在，而胞外和胞內(nèi)的大量富集則往往要求微生物具有活性［21］。在一個絮凝體系中，可能會存在上述一種或幾種過程。本實(shí)驗(yàn)中啤酒酵母對巖溶水進(jìn)行絮凝，其特點(diǎn)有攪拌快速、處理時間較短、絮凝率高，而一般微生物的胞內(nèi)或胞外富集則用時較長且絮凝率低，表明主要發(fā)揮作用的是菌體表面吸附或絡(luò)合。根據(jù)郭彥涵對啤酒酵母絮凝劑的研究，本實(shí)驗(yàn)所用的啤酒酵母包埋菌在處理巖溶水時還應(yīng)該包括固定化劑（即高聚合化合物）對金屬離子吸附作用，而高聚合化合物對金屬離子的吸附作用主要是螯合架橋作用。因此，啤酒酵母固定化菌是在雙重作用下表現(xiàn)出良好的絮凝效果。

3 討論

合適的微生物固定化小球必須具備包埋操作簡單、成本低、對微生物無害、固定化細(xì)胞密度大、機(jī)械強(qiáng)度大、機(jī)制通透性和傳質(zhì)性能好以及較好的物理強(qiáng)度和化學(xué)穩(wěn)定性等特點(diǎn)［22］。在本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，選擇海藻酸鈉作為包埋劑、氯化鈣作為交聯(lián)劑，不論從制作難易程度上還是制成球后的機(jī)械強(qiáng)度和傳質(zhì)性能上，固定化小球均達(dá)到了一定的效果；固定化小球的傳質(zhì)性能隨著的機(jī)械強(qiáng)度的增大而減小，在考慮機(jī)械強(qiáng)度的同時，也要考慮傳質(zhì)性能，因?yàn)槠浜芸赡苡绊懝潭ɑ∏蛭叫阅堋＞C合物理性質(zhì)考慮，選取制作固定化小球的最優(yōu)區(qū)間為海藻酸鈉濃度2.0%－3.0%、菌體包埋比例為6%－10%、交聯(lián)時間為6～10 h、氯化鈣濃度2.0%－4.0%。這也與辛蘊(yùn)甜、包木太［13－14］等對固定化小球的研究結(jié)果相似。

通過正交實(shí)驗(yàn)分析我們得出，最佳固定化條件為：2.0% 的海藻酸鈉濃度、10% 的菌體包埋比、4.0% 氯化鈣和10 h的交聯(lián)時間，較郭彥涵［11］方法制作的固定化條件分別在菌體包埋比、氯化鈣濃度和交聯(lián)時間上都有所增加，機(jī)械強(qiáng)度也具有一定的提高，硬度礦化度處理率分別達(dá)到76.97% 和59.77%，分別提高了4.53%和3.68%，礦化度從3 109 mg·L－1降低到1 258 mg·L－1，，達(dá)到了《地下水質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB／T14848-93）的Ⅳ類用水標(biāo)準(zhǔn)，硬度從2 856 mg·L－1降到了658 mg·L－1，接近《地下水質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB／T14848-93）的Ⅳ類用水標(biāo)準(zhǔn)。通過正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果及其方差分析發(fā)現(xiàn)，四個因素影響礦化度和硬度處理率的主次順序并不相同。用極差和方差分析看出，菌體包埋比對硬度礦化度結(jié)果影響都比較顯著，這也驗(yàn)證了郭彥涵［7］對微生物固定化小球的探究，即微生物固化菌發(fā)揮作用是兩方面共同作用的結(jié)果，一是具有活性的微生物對巖溶水中離子的吸附作用，另一方面固定化包埋劑也對水中的離子具有一定的吸附活性，微生物固定化小球是這兩方面因素共同作用的結(jié)果，所以兩者之間合適的比率必然會影響固定化小球的性能。通過分析我們選擇絮凝效果最好的10%的菌體包埋比作為固定化的最佳包埋比，也是機(jī)械強(qiáng)度能夠達(dá)到最好時的包埋比例。從極差分析可以看出，海藻酸鈉（SA）濃度對硬度處理率的影響要大于礦化度，所以在微生物固定化小球的制作過程中，如果著重降低硬度可以選擇低濃度即SA為2.0% 的濃度，礦化度則偏重選擇較高的SA濃度，交聯(lián)時間對硬度和礦化度影響則都不顯著。

4 結(jié)論

（1）制作微生物啤酒酵母固定化小球最優(yōu)物理性能區(qū)間為：海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%－3.0%、菌體海藻酸鈉質(zhì)量比6%－8%、交聯(lián)時間為6～10 h和氯化鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%－4.0%。

（2）通過正交實(shí)驗(yàn)得出，海藻酸鈉濃度與菌體包埋比對絮凝劑絮凝率影響較大。以礦化度和硬度為指標(biāo)可以得出制作固定化小球最優(yōu)固定化條件分別為：2%的海藻酸鈉濃度、10%的菌體包埋比、4%氯化鈣濃度和10 h的交聯(lián)時間，此時巖溶水的硬度礦化度絮凝率分別達(dá)到76.97% 和59.77%，巖溶水礦化度從3 109 mg·L－1降到1 258 mg·L－1，達(dá)到《地下水質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB／T14848-93）的Ⅳ類用水標(biāo)準(zhǔn)；硬度從2 856 mg·L－1降到658 mg·L－1，接近《地下水質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB／T14848-93）的Ⅳ類用水標(biāo)準(zhǔn)。

［1］ 孫中惠，馮金仙.對太原巖溶地下水的一些初淺看法［J］.山西水利科技，1996，11（4）：20-24.

［2］ 李桂嬌，尹華，彭輝.生物絮凝劑的研究與開發(fā)［J］.工業(yè)水處理，2002，22（3）：9-12.

［3］ 羅德芳，邵孝侯，袁燦生，等.EM 菌與化學(xué)絮凝劑復(fù)配實(shí)驗(yàn)研究［J］.環(huán)境工程學(xué)報(bào)，2010，4（6）：1313-1316.

［4］ Feng D L，Xu S H.Characterization of Bioflocculant MBF3-3 Produced by an Isolated Bacillus sp［J］.World Journal of Microbiology Biotechnology，2008，24（9）：1627-1632.

［5］ Asha S，Thiruvenkatachari V.Oil Removal from Water Using Biomaterials［J］.Bioresource Technology，2010，4：6594-6600.

［6］ 張?jiān)扑桑跞蕠?，陳沿利，?乙醇?xì)溲趸c預(yù)處理對面包酵母菌吸附Cu2＋的影響［J］.環(huán)境化學(xué)，2008，27（2）：206-209.

［7］ 馬放，段姝悅，孔祥，等.微生物絮凝劑的研究現(xiàn)狀及其發(fā)展趨勢［J］.中國給水排水，2012，28（2）：14-17.

［8］ 郭彥涵，李佳月，李保珍，等.固定化白地霉處理高礦化度和高硬度水的研究［J］.環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2012，32（7）：1579-1588.

［9］ 徐冠珠，徐純錫，王世桌，等.影響深紅酵母和白地霉產(chǎn)生胞外蛋白和多膚的因素［J］.真菌學(xué)報(bào)，1983，2（2）：127-133.

［10］ 岳艷利，周林成，王耀龍，等.微生物絮凝劑的制備及其應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.水處理技術(shù)，2012，38（1）：6-16.

［11］ 郭彥涵.利用微生物絮凝劑處理太原市高礦化度和高硬度地下巖溶水的研究［D］.太原，山西大學(xué)，2012：13-17.

［12］ 樊鵬躍，崔建國，賈賀.固定化白腐真菌處理含酚廢水［J］.環(huán)境工程學(xué)報(bào)，2014，8（5）：1977-1981.

［13］ 包木太，田艷敏，陳慶國.海藻酸鈉包埋固定化微生物處理含油廢水的研究［J］.環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，2012，35（2）：167-172.

［14］ 辛蘊(yùn)甜，趙曉祥.芽孢桿菌 H-1菌株的固定化及降解動力學(xué)研究［J］.環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，2013，36（11）：67-73.

［15］ 王璐.包埋固定化顆粒在微污染原水中的應(yīng)用研究［D］.上海：上海交通大學(xué)，2008：26-58.

［16］ Lu M Z，Lan H L，Wang F F，et al.A Novel Cell Encapsulation Method Using Photosensitive Poly［J］.Journal of Microencapsulation，2000，17（2）：245-251.

［17］ Pazarlioglu N K，Urek R O，Ergun F.Biodecolourization of Direct Blue15 by immobilized Phanerochaete chrysosporium［J］.Proc Biochem，2005，40：1923-1929.

［18］ 張萬鋒.火焰原子吸收法測水的總硬度［J］.安康學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，2（20）：86-87.

［19］ 邱洪久，廖堅(jiān)萍.火焰原子吸收光譜法連續(xù)測定啤酒中鉀、鈉、鈣、鋅、銅、鐵、鎂、錳［J］.中國公共衛(wèi)生，1993，9（3）：122-123.

［20］ 時紅.水質(zhì)分析方法與技術(shù)［M］.北京：地震出版社，1989：109-203.

［21］ Zheng Y，Ye Z L，F(xiàn)ang X L，et al.Production and Characteristics of a Bioflocculant Produced by Bacillus sp F19［J］.Bioresource Technology，2008，16（99）：7686-7691.

［22］ 馮雅男，李軍，王立軍，等.包埋固定化去除水中氨氮的研究進(jìn)展［J］.遼寧化工，2010，39（2）：164-167.