董自艷 戴翚

氯霉素滴眼液的抑菌效力評(píng)價(jià)

董自艷 戴翚

目的 測(cè)定氯霉素滴眼液中抑菌劑對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉的抑菌效力。方法 采用微生物學(xué)方法, 根據(jù)各間隔時(shí)間的菌數(shù)1 g值相對(duì)于初始值減少程度評(píng)價(jià)氯霉素滴眼液對(duì)細(xì)菌、真菌的抑菌效力。結(jié)果 氯霉素滴眼液對(duì)細(xì)菌和真菌的抑菌效力均符合規(guī)定。結(jié)論 該方法可有效控制產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量。

氯霉素滴眼液；抑菌劑；抑菌效力

2010版《中國(guó)藥典》規(guī)定, 在制劑通則中要求具有抗菌活性的制劑應(yīng)驗(yàn)證最終容器中的抑菌劑效力不因貯藏條件而降低［1］。氯霉素(chloroamphenicol)滴眼液主要用于眼科沙眼、角膜炎、結(jié)膜炎、眼瞼緣炎, 不僅本身具有抑菌效力, 制劑中也添加抑菌劑, 而且為眼用多劑量包裝制劑, 貯藏和使用過程中容易發(fā)生微生物污染和繁殖, 對(duì)藥物的質(zhì)量以及療效產(chǎn)生影響, 而氯霉素滴眼液抑菌效力研究尚未見報(bào)道, 因此本文對(duì)市售氯霉素滴眼液的抑菌效力進(jìn)行了測(cè)定。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 全封閉無菌試驗(yàn)過濾培養(yǎng)器(北京牛?；蚣夹g(shù)有限公司, 批號(hào)20120801)；SteritestTM智能集菌儀(Milliproe)。沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基(SDB, 批號(hào)：120305)；沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA, 批號(hào)：1203062)；胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA, 批號(hào)：120730)；胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB,批號(hào)：100114), 均來自北京三藥科技開發(fā)公司；氯化鈉(北京化學(xué)試劑公司, 批號(hào)：050223)；氯霉素滴眼液(遼寧某藥廠,規(guī)格8 ml：12.5 g)。

1.2 菌種 大腸埃希菌(escherichia coli)［CMCC(B) 44 102］；銅綠假單胞菌(pseudomonas aeruginosa)［CMCC(B) 10 104］；金黃色葡萄球菌(staphylococcus aureus) ［CMCC(B) 26 003］；白色念珠菌(candida albicans) ［CMCC(F) 98 001］；黑曲霉(aspergillus niger) ［CMCC(F)98 003］。

1.3 方法

1.3.1 菌液制備 接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中, 34℃培養(yǎng)24 h；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中, 24℃培養(yǎng)48 h；分別用TSA、SDA培養(yǎng)基劃線培養(yǎng), 采用比濁法制成含菌數(shù)108 cfu/ml的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中, 24℃培養(yǎng)1周,加入5 ml含0.05%聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液洗下孢子, 用含0.05%聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液病采用比濁法制成含孢子數(shù)108 cfu/ml的孢子懸液［2,3］。

1.3.2 測(cè)定方法 取供試品5份, 8 ml/份, 每份接種一個(gè)試驗(yàn)菌, 接種菌液80 μl, 充分混合, 每種試驗(yàn)菌平分2份, 將接種的供試品室溫保存并防止被污染。在供試品剛接種(0 h)、24 h、7、14、28天分別從上述每個(gè)容器中取供試品1 ml, 用0.9%無菌氯化鈉溶液以l0倍量稀釋, 采用薄膜過濾法貼膜培養(yǎng), 測(cè)定每份供試品中所含的菌數(shù)。根據(jù)菌數(shù)測(cè)定結(jié)果計(jì)算1 ml供試品各試驗(yàn)菌所加的菌數(shù)及各間隔時(shí)間的菌數(shù)并換算成1 g值。

2 結(jié)果

按照抑菌劑抑菌效力判斷標(biāo)準(zhǔn), 本品抑菌效力對(duì)細(xì)菌和真菌能夠達(dá)到1類產(chǎn)品的要求, 該滴眼液抑菌效力符合規(guī)定。見表1。

表1 抑菌效力實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

3 小結(jié)

3.1 計(jì)數(shù)時(shí)間點(diǎn)的選擇 由于該氯霉素滴眼液試驗(yàn)菌加入后的7 d以后計(jì)數(shù)均已降為0, 計(jì)數(shù)時(shí)間點(diǎn)增加了24 h的計(jì)數(shù)。

3.2 抑菌劑使用的量一直都界限模糊, 過了則容易導(dǎo)致人體受損, 不足則增加微生物污染的可能性。因此, 在眼用制劑中添加抑菌劑, 必須進(jìn)行充分的試驗(yàn)研究, 權(quán)衡利弊, 保證用藥安全。

［1］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(二部).北京:化學(xué)工業(yè)出版杜, 2010:附錄215, 1031.

［2］ 王衛(wèi)平.人工淚液氯霉素滴眼液中防腐劑防腐效力的測(cè)定.中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥, 2010, 5(6):62-63.

［3］ 丁勃, 鞏麗萍, 謝元超.阿奇霉素滴眼液抑菌劑篩選與抑菌效力研究.中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn), 2012, 13(4):281-284.

Evaluation of bacteriostatic effect of chloramphenicol eye drops

DONG Zi-yan, DAI Hui.
Liaoning Fushun City Institute for Food and Drug Control, Fushun 113006, China

Objective To detect bacteriostatic effect of chloramphenicol eye drops for escherichia coli, pseudomonas aeruginosa, staphylococcus aureus, candida albicans, and aspergillus niger.Methods The microbiological method and various time-gap colony counting 1 g, compared with original value, were applied to evaluate bacteriostatic effects of chloramphenicol eye drops for bacteria and fungus.Results Bacteriostatic effects of chloramphenicol eye drops for bacteria and fungus were up to specification.Conclusion This method can effectively control immanent quality of products.

Chloramphenicol eye drops； Bacteriostatic agent； Bacteriostatic effect

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.13.181

2014-12-19］

113006 遼寧省撫順市食品藥品檢驗(yàn)所(董自艷)；中國(guó)食品藥品檢定研究院(戴翚)