唐月華王小平

潰瘍性結(jié)腸炎患者血清IL-1β和IL-18的表達及臨床意義

唐月華王小平

【摘要】目的檢測潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)患者血清白介素-1β(IL-1β)和白介素(IL-18)的變化，探討其在UC發(fā)生發(fā)展過程中的作用。方法活動期UC患者42例，緩解期UC患者20例和正常對照組10例。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測IL-1β和IL-18的含量，評價含量與UC患者病情輕重程度之間的關(guān)系。結(jié)果活動期UC組患者血清IL-1β和IL-18含量顯著高于緩解期UC組患者和對照組(P＜0.05)，緩解期UC組患者與對照組比較，血清IL-1β和IL-18含量明顯升高(P＞0.05) ;血清IL-1β和IL-18含量活動期UC重型組高于中型和輕型組，與病情病情輕重程度均呈正相關(guān)(r值分別為0.623和0.588，P＜0.01)。結(jié)論活動期UC患者血清IL-1β和IL-18含量顯著升高，其可作為病情活動性、嚴重性及療效評價的參考指標。

【關(guān)鍵詞】結(jié)腸炎;潰瘍性;代謝;白介素-1β;白介素-18

作者單位: 211300江蘇省南京市高淳人民醫(yī)院消化科

近年來，隨著人民生活水平的提高，潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative cditis，UC)發(fā)病率有明顯上升的趨勢。雖然UC的發(fā)病機制至今尚未完全明了，但是越來越多的證據(jù)顯示UC的發(fā)生是多因素共同作用的結(jié)果［1］，其中，免疫炎癥損傷是其重要發(fā)病機制之一。有研究發(fā)現(xiàn)NLRP3炎性小體可調(diào)節(jié)白介素-1β(IL-1β)和白介素-18(IL-18)的分泌，其免疫調(diào)節(jié)作用參與多種炎癥疾病［2，3］。然而有IL-1β和IL-18在UC患者中的研究不多，尤其在疾病過程中其含量比例以及功能的動態(tài)變化尚不清楚。本研究檢測UC活動期和緩解期IL-1β和IL-18的變化，評價其在UC病情活動性與嚴重性中的臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇我院2013年6月至2014年6月收住院治療的UC患者62例，其中活動性患者42例，男22例，女20例;年齡30～61歲，平均年齡(45±3)歲。緩解期患者20例，男12例，女8例;年齡29～60歲，平均年齡(48±4)歲。診斷及臨床分度符合中華醫(yī)學會消化病分化炎癥性腸病學科組制定的診斷指南。均排除近期急慢性感染性疾病，自身免疫性疾病，腫瘤性疾病，慢性纖維化增生性疾病和播散性血管內(nèi)凝血，并均未接受任何免疫抑制劑治療［4］。采用Rachmilewitz UC臨床活動指數(shù)評估系統(tǒng)(CAI評分)［5］，評價病情活動性:≥4分活動性，＜4分為緩解期。同期選擇健康志愿者10例(正常組)，男5例，女5例;年齡29～62歲，平均年齡(46±5)歲。3組一般資料具有均衡性。

1.2方法

1.2.1標本收集: UC患者和健康對照者均在清晨空腹抽靜脈血5 ml，離心后取其血清，立即放置于－20℃冰箱中保存待檢。檢測前血清自然融化，期間不曾凍融。

1.2.2主要儀器與試劑: LC2129冰箱，海爾; KDC-2044低速冷凍離心機，北京醫(yī)用離心機廠; FJ 22003/2008PS全自動γ放射免疫計數(shù)器，西安核儀器廠; IL-1β、和IL-18放射免疫分析試劑盒購自福州邁新生物有限公司。

1.2.3血清IL-1β和IL-18的測定:采用放射免疫分析法，試劑盒購自福州邁新生物有限公司，嚴格按照說明書進行操作。使用西安核儀器廠生產(chǎn)的FJ22003/2008PS型全自動γ放射免疫計數(shù)器進行放射性測定。

1.3統(tǒng)計學分析應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，采用t檢驗，相關(guān)分析采用Permang和Spman等級相關(guān)法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.13組IL-1β和IL-18水平比較活動期UC組患者血IL-1β和IL-18高于緩解期UC組和正常組(P＜0.01)，與正常組相比，緩解期UC組IL-1β、和IL-18含量升高(P＜0.05)。見表1。

表1　3組IL-1β和IL-18水平比較　pg/ml，±s

表1　3組IL-1β和IL-18水平比較　pg/ml，±s

注:與正常組比較，*P＜0.05;與緩解期UC組比較，#P＜0.05

組別　IL-1βIL-18正常組(n=10)0.18±0.22　0.26±0.12緩解期UC組(n=20)　0.24±0.32*　0.32±0.25*活動期UC組(n=42)　1.32±0.34* #　2.60±0.32*#

2.2活動期UC患者IL1β、和IL18與病情嚴重性的關(guān)系活動期UC患者IL-1β和IL-18在病情重型組和中型組中明顯高于輕型組(P＜0.05)。在病情重型組UC患者與中型組相比，IL-1β和IL-18含量明顯升高(P＜0.05)?；顒悠赨C患者IL-1β與病情嚴重性呈正相關(guān)(r=0.623，P＜0.05)，活動期UC組患者IL-18與病情嚴重性呈正相關(guān)(r=0.588，P＜0.05)。見表2。

表2　活動期UC患者IL-1β和IL-18與病情的關(guān)系pg/ml，±s

表2　活動期UC患者IL-1β和IL-18與病情的關(guān)系pg/ml，±s

注:與輕型組比較，*P＜0.05;與中型組比較，#P＜0.05

組別　IL-1βIL-18輕型組(n=15)0.38±0.12　0.16±0.04中型組(n=12)　0.58±0.54*　1.60±0.32*重型組(n=15)　1.58±0.54* #　2.80±0.32*#

3　討論

UC是一種主要累及直腸的非特異性炎性疾病，腸道局部炎性損傷是其重要病理改變，以大量炎性細胞浸潤腸壁和持續(xù)活化為特征［6，7］。評價UC的活動性和嚴重性，是制定正確治療方案和評估預(yù)后所必須臨床上測評價UC治療過程需要客觀指標來評價病情的活動性，嚴重性，然而目前缺乏一些簡單實用，客觀敏感的評價指標。近年的研究發(fā)現(xiàn)。內(nèi)源性信號，即損傷相關(guān)分子模式(damage associated molecularpattern，DAMPs)，從而啟動固有免疫的應(yīng)答［2，3］。多種因素(如高血壓，代謝，免疫，感染，藥物等異常等)均可以導致腸道損傷，引起NLRP3炎性小體的激活，NLRP3激活caspase-1，caspase-1可以成功地促進IL-1β、IL-18的成熟及分泌。

IL-1β主要由單核巨噬細胞產(chǎn)生，但幾乎所有有核細胞在受到外界抗原刺激后均可合成與分泌IL-1β。UC組織中生成的大量IL-1β，可激活T淋巴細胞和B淋巴細胞，從而上調(diào)免疫功能。同時，IL-1β可促進IL-2受體表達。IL-2作為一種重要的細胞因子與T淋巴細胞、B淋巴細胞、單核細胞表面的IL-2受體結(jié)合后，能引起T淋巴細胞活化、增殖，促進B淋巴細胞分泌抗原，促進細胞毒T細胞的殺傷作用，增強NK細胞活性等。IL-1β可促進其他炎性細胞因子表達，并協(xié)同作用，促進中性粒細胞浸潤［8］。更重要的是，IL-1β促使中性粒細胞和巨噬細胞活化及脫顆粒，促進炎性細胞釋放前列腺素、血栓素、血小板活化因子等，增加上皮細胞和內(nèi)皮細胞的通透性。這些因素均使腸黏膜炎癥加重，黏膜充血、水腫、屏障功能減弱，引起腸道細菌移位，有利于炎性始動因子的作用［9］。本研究表明，血清中IL-1含量高低與UC患者病情輕重和病變累及的范圍有關(guān)，提示血清中IL-1的含量可作為觀察UC患者病情的發(fā)展和判斷預(yù)后的重要指標之一。

IL-18又名干擾素-γ誘生因子，是由Arifa等［10］從中毒性休克小鼠肝臟中克隆而得到的一種應(yīng)激誘生蛋白。IL-18主要由巨噬細胞樣細胞產(chǎn)生，研究表明，其由非活性的前體形式合成，經(jīng)IL-1β轉(zhuǎn)化酶轉(zhuǎn)化為成熟的IL-18而發(fā)揮生物活性，IL-18具有促進IL-1和GM-CSF產(chǎn)生、誘導Th1細胞產(chǎn)生IFN-γ、誘導TNF-α和多種趨化因子的基因表達與蛋白質(zhì)合成等多種生物學功能，還作為炎癥前細胞因子(preinflammation cytokine)，參與多種免疫性疾病的發(fā)生［11］。從UC患者的腸黏膜中可檢測到IL-18 mRNA的表達，且IL-18陽性細胞主要集中于固有層單個核細胞(尤其是巨噬細胞、樹突狀細胞)和腸上皮細胞;分泌IL-18的細胞呈彌漫性分布，主要位于潰瘍底部、黏膜表面、隱窩膿腫中［12］。本研究表明，血清中IL-18含量高低與UC患者病情輕重和病變累及的范圍有關(guān)，其可作為觀察UC患者病情發(fā)展和判斷預(yù)后的重要指標之一。

本研究結(jié)果表明活動期UC患者IL-1β和IL-18變化可作為評價病情活動性與嚴重性的良好指標，有助于判斷臨床治療效果，評價預(yù)后。

參考文獻

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(收稿日期:2014－12－21)

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2015.10.031

【文章編號】1002－7386(2015) 10－1534－02

【文獻標識碼】A

【中圖分類號】R 574.621