向曉黎，王 靜，王國紅

（1.新疆農(nóng)墾科學(xué)院分析測試中心，新疆 石河子832000；2.農(nóng)業(yè)部食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心，新疆 石河子832000）

1 引言

磷是人體含量較多元素之一，是構(gòu)成人體骨骼主要元素，鈣磷比值是判斷軟骨癥的重要指標(biāo)［1］，是細胞膜和核酸的構(gòu)成成分，還參與生命活動的很多代謝過程［2］，因此檢測食品中磷的含量很有意義。實際工作中發(fā)現(xiàn)，GB/T5009.87—2003鉬藍分光光度法測定食品中磷含量顯色時間長，所用試劑不夠穩(wěn)定，方法不夠靈敏［3］，為此，本方法通過對消解液酸度的調(diào)節(jié)，顯色劑進行了改進，簡化了操作過程，得到了較好的精密度和準(zhǔn)確度，滿足日常檢測的需要，大大提高了工作效率。

2 材料與方法

2.1 儀器

紫外可見分光光度計（TU－1901型，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；數(shù)控電熱板（Lab tech EG－35A型，昆山恒儀電子科技有限公司）等實驗室常用設(shè)備。

2.2 試劑

（1）氫氧化鈉溶液（2mol/L）：80.0g氫氧化鈉（分析純）溶于水，用水定容到1L。

（2）硫酸溶液（4.52mol/L）：吸取28.0mL濃硫酸（分析純），緩緩注入水中，并用水定容到1L。

（3）2，4—二硝基酚（或2，6—二硝基酚）指示劑：溶解0.20g 2，4—二硝基酚溶于100mL水中。

（4）釩鉬酸銨溶液：

A：稱取25.0g鉬酸銨溶于400mL水中。

B：稱取1.25g偏釩酸胺溶于300mL沸水中，冷卻后加250mL硝酸，冷卻。

再攪拌下將A液緩緩注入B液中，用水稀釋至1L，混勻，貯于棕色瓶中。

（5）磷（P）標(biāo)準(zhǔn) 儲備溶液（100μg/mL）：精確稱取0.4390g在105℃烘干2h的磷酸二氫鉀（優(yōu)級純），用水溶解后，轉(zhuǎn)入1L容量瓶中，加入5mL濃硫酸（防腐，分析純），用水定容到1L，該溶液1mL含磷（P）100μg。此溶液可以長期保存。

（6）磷（P）標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（50μg/mL）：吸取100μg/mL（P）標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液50mL于100mL容量瓶中，加水定容，此溶液1mL含磷（P）50μg。

2.3 測定方法

2.3.1 方法原理

待測液在一定酸度下，其中的磷酸根離子與偏釩酸和鉬酸反應(yīng)形成黃色三元雜多酸。在一定濃度范圍［1mg/L～20mg/L］內(nèi)，黃色溶液的吸光度與含磷量成正比例關(guān)系，用分光光度法定量分析磷含量［4］。

2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

分別移取磷標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（每毫升相當(dāng)于50μg磷）0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0 mL，置于50mL容量瓶中，加水至15～20ml，依次加入2，4—二硝基酚指示劑2滴，用前述稀氫氧化鈉溶液和稀硫酸（1.2.2）溶液調(diào)節(jié)pH值至溶液剛呈微黃色，以標(biāo)準(zhǔn)曲線零管為參照。加入10.00mL釩鉬酸銨溶液，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，靜止30min后，在分光光度計波長440nm處用2cm光徑比色皿，以零管溶液作參比調(diào)節(jié)儀器零點，進行比色，測定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.3.3 未知樣品中磷的測定法

將瓷蒸發(fā)器在火上加熱灼燒、冷卻，準(zhǔn)確稱取均勻樣品0.3（精確0.0001）g，在火上灼燒成炭分，再于550℃下成灰分。直至灰分呈白色為止（必要時，可在加入濃硝酸濕潤后再灰化，有促進樣品灰化至白色的作用），加稀鹽酸（1＋1）10mL及硝酸2滴，在水浴上蒸干，再加稀鹽酸（1＋1）2mL，用水分數(shù)次將殘渣完全洗入100mL容量瓶中，并用水稀釋至刻度，搖勻，過濾（如無沉淀則不須過濾）。取濾液5mL（視磷量多少定）置于50mL容量瓶中，以空白試驗溶液作參比調(diào)零，以下同標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。

同時做樣品空白試驗。

3 結(jié)果與討論

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性關(guān)系

用本法和國標(biāo)法同時做磷標(biāo)準(zhǔn)曲線系列，其比對測定結(jié)果見表1。

表1 兩種方法所測的標(biāo)準(zhǔn)系列比對

由表1可以發(fā)現(xiàn)，國標(biāo)法磷含量在磷0～10μg的標(biāo)準(zhǔn)系列得到的吸光值低，而且不時出現(xiàn)“跳管”現(xiàn)象，線性關(guān)系差，不能滿足測量需要［5，6］；本法磷含量在0～450μg范圍時符合比爾定律，具有良好的線性關(guān)系，其相關(guān)系數(shù)r＝1.000，回歸方程為改進后的方法標(biāo)準(zhǔn)曲線顯色明顯，吸光度大，靈敏度高。

3.2 準(zhǔn)確度試驗

分別稱取國家標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)奶粉（GWB10017），雞肉（GWB10018），按照本法進行樣品檢測，6次測定的平均值均與標(biāo)準(zhǔn)參考值相符，結(jié)果見表2。

表2 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中磷元素的測定結(jié)果 （n＝6）

由表2可以看出用改進法測定食品中磷的含量，2種國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測定平均值均在其標(biāo)準(zhǔn)參考值范圍內(nèi)，測定值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.41%～2.61%之間。這表明本方法具有良好的準(zhǔn)確度，樣品分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

3.3 加標(biāo)回收實驗

選擇上述2個已知本底的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為樣品，每份樣品中添加低、高2個不同含量的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，按本法分別測定2次其含量并計算回收率，結(jié)果見表3。由此表看出平均回收率在94%～97%之間，符合分析方法要求。

表3 樣品加標(biāo)回收率試驗

4 結(jié)論

建立釩鉬黃比色法測定食品中磷的檢測技術(shù)具有在顯色前預(yù)先調(diào)節(jié)消解液酸度，加入較穩(wěn)定顯色劑和曲線線性較好的優(yōu)點，與國標(biāo)法［7］相比，操作方便，重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度較好，避免了有毒試劑對試驗人員的危害及對環(huán)境的污染，故而適用于食品中磷的測定。

［1］郭經(jīng)燕.食品衛(wèi)生手冊［M］.鄭州：河南科學(xué)技術(shù)出版社，1984：47.

［2］孫夢里.臨床營養(yǎng)學(xué)［M］.北京：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2005：19.

［3］衛(wèi) 敏，LIURuihai，DINGLiang.食品中磷的檢測方法［J］.中國科學(xué)：化學(xué)，2010，40（7）：914～921.

［4］中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.NY/T 2017－2011植物中氮、磷、鉀的測定［S］.北京：中華人民共和國農(nóng)業(yè)部，2011.

［5］陳 澍，向仕學(xué)，宋建莉.食物中磷測定方法的改進［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2004，31（5）：796～797.

［6］羅頌華.分光光度法測定食品中磷酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)曲線選擇［J］.計量與測試技術(shù)，2007，34（10）：54～55.

［7］中華人民共和國衛(wèi)生部.GB/T5009.87—2003食品中磷的測定［S］.北京：中華人民共和國衛(wèi)生部，2003.