柯希歡， 李 霞， 張 琛， 王新風(fēng)， 紀(jì)麗蓮

(1.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所，江蘇 南京210014; 2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)院，江蘇 南京210095; 3.淮陰師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，江蘇 淮安223300; 4.江蘇省生物質(zhì)能與酶技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 淮安223300)

黃瓜( Cucumis sativus L.) 起源于印度喜馬拉雅山，喜溫、喜濕，較耐弱光，是人們普遍喜愛的蔬菜［1-4］。中國黃瓜栽種面積始終保持在1 ×106hm2左右，其中保護(hù)地面積約占42%。近年來，隨著設(shè)施園藝的發(fā)展，黃瓜生產(chǎn)已由過去的以露地為主，發(fā)展到春秋露地、春秋大棚和日光溫室等多種栽培方式，尤以日光溫室黃瓜面積為最大［5］。然而在日光溫室黃瓜生產(chǎn)過程中由連作引起的連作障礙［6-8］，造成黃瓜產(chǎn)量降低、品質(zhì)變劣、病害嚴(yán)重等［9-11］。許多學(xué)者認(rèn)為土壤連作障礙的主要影響因子是土壤中微生物群落結(jié)構(gòu)組成的變化，也有研究者將連作障礙歸結(jié)為土傳病蟲害嚴(yán)重、土壤pH 值和酶活性變化、黃瓜根系分泌物的自毒作用等［12-13］。對(duì)土壤連作障礙，目前主要采取的措施有: 改善栽培制度、完善栽培技術(shù)、應(yīng)用抗性品種等。吳鳳芝發(fā)現(xiàn)不同作物間輪作是連作障礙的最佳防范措施［14］。杜社妮等研究了日光溫室中6 種輪作方式對(duì)土壤養(yǎng)分、鹽分、微生物區(qū)系、酶活性的影響，發(fā)現(xiàn)黃瓜-大蒜和黃瓜-玉米輪作是改良土壤生態(tài)效果理想的輪作模式［15］。

菇-熱-酶-肥栽培模式是一種新型草菇-黃瓜輪作方式，該模式首先種植草菇，草菇以稻草為原料生長，收獲草菇之后剩余的草料殘?jiān)礊榫?，菌糠還田再配合使用雞糞等有機(jī)肥，覆土發(fā)酵，這個(gè)過程利用土壤中的微生物產(chǎn)生纖維素酶和漆酶等分解菌糠，分解的菌糠作為后續(xù)黃瓜生產(chǎn)的有機(jī)肥料，進(jìn)一步增加了大棚土壤中全氮、全磷、全鉀、有機(jī)質(zhì)、有效磷的含量，改善土壤結(jié)構(gòu)，此發(fā)酵分解過程還會(huì)產(chǎn)生大量熱量，提高大棚溫度，為冬季日光溫室大棚的黃瓜生長提供有利條件。目前已有報(bào)道從土壤的改良上來研究輪作對(duì)黃瓜產(chǎn)量的影響［16-18］，而有關(guān)日光溫室大棚輪作對(duì)黃瓜的生長形態(tài)、生理以及產(chǎn)量的影響研究卻不多，在一定程度上影響了該模式的應(yīng)用。武玲等研究了通過改善土壤來提高草菇-黃瓜輪作中黃瓜的產(chǎn)量［19］，本試驗(yàn)也選取草菇-黃瓜輪作方式，進(jìn)一步研究日光溫室大棚中菇-熱-酶-肥協(xié)同作用對(duì)黃瓜形態(tài)、生理特性以及產(chǎn)量的影響，為該新型栽培模式的大規(guī)模應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

試驗(yàn)在江蘇省淮安市淮陰區(qū)丁集鎮(zhèn)丁集村日光能大棚進(jìn)行，土壤為砂壤土。大棚寬10 m、長80 m左右，南北向，頂高3.0 m，每個(gè)大棚面積約800 m2。

1.2 試驗(yàn)材料

草菇V28 菌種，由江南生物科技有限公司惠贈(zèng);津優(yōu)35 黃瓜，購自淮安市中園園藝發(fā)展有限公司。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2013 －2014 年進(jìn)行，第1 年處理組大棚在前茬黃瓜拉秧后，棚內(nèi)施以牛糞為主的有機(jī)肥，6月底或7 月初栽培草菇，干稻草用量為45.0 ～52.5 t /hm2，草菇收獲后保持菌糠覆土狀態(tài)，9 月中旬向棚內(nèi)施發(fā)酵好的雞糞作為基肥，翻耕整地;對(duì)照組大棚為上一年栽種黃瓜后擱置的大棚，進(jìn)行常規(guī)栽培。9 月底黃瓜采用基質(zhì)育苗，10 月上中旬嫁接并直接移栽到大棚，12 月底采收至第2 年6 月，6 月下旬拉秧，完成草菇-黃瓜輪作。于第2 年3 －4 月，測定黃瓜的形態(tài)和生理指標(biāo)。

1.4 干物質(zhì)的累積及累積速率

在黃瓜生長旺盛時(shí)期( 2014 年3 －4 月) ，測定黃瓜干物質(zhì)的累積及累積速率。在菇-熱-酶-肥處理組大棚和對(duì)照組大棚各選取10 株生長狀況( 植株高度、葉片數(shù)、結(jié)瓜數(shù)、瓜大小、健康狀況等) 較為一致的黃瓜植株作為研究對(duì)象，從中取5 株，剪下地上部分，將各株植株分成瓜、莖、葉3 部分，置于烘箱中105 ℃殺青30 min，再將溫度調(diào)至80 ℃烘干至恒質(zhì)量，稱量各部分干質(zhì)量。將剩下5 株植株于一周后剪下地上部分烘干稱質(zhì)量，過程同上。

1.5 植株形態(tài)指標(biāo)的測定

植株形態(tài)包括地上部分和地下部分。從處理組和對(duì)照組各隨機(jī)選取5 株黃瓜植株測其葉片數(shù)、葉片長、葉片寬、莖寬、莖窄、株高和根體積、側(cè)根數(shù)、根長，并測定根鮮質(zhì)量。

1.6 生理指標(biāo)的測定

1.6.1 葉綠素含量 從處理組大棚和對(duì)照組大棚各隨機(jī)選取5 株黃瓜植株。采用SPAD-502 葉綠素儀測定每張葉片從上往下數(shù)第4、5、6 共3 個(gè)葉位5個(gè)不同位點(diǎn)葉綠素含量，取平均值作為葉片的相對(duì)葉綠素含量值［20］。然后將對(duì)應(yīng)葉片用80%的丙酮浸提法提取葉綠素［21］，用紫外可見分光光度計(jì)( T6新世紀(jì)，北京普析通用儀器責(zé)任有限公司生產(chǎn)) 分別在663 nm 和645 nm 波長下測定吸光值并根據(jù)Arnon 公式換算成單位面積的葉綠素含量［22］。

1.6.2 根系活力 采用TTC 法測定根系活力［23］，以單位根鮮質(zhì)量單位時(shí)間內(nèi)轉(zhuǎn)化TTC 生成TTF 的量衡量根系活力。

1.6.3 葉片硝酸還原酶活性 黃瓜3 個(gè)葉位葉片硝酸還原酶活性參照文獻(xiàn)［24］進(jìn)行測定。

1.7 數(shù)據(jù)處理

用SPPS 19.0 軟件，通過單因素方差分析檢驗(yàn)來分析數(shù)據(jù)的差異顯著性和Pearson 參數(shù)系數(shù)的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 菇-熱-酶-肥栽培方式對(duì)黃瓜生物量積累的影響

由圖1 可知，不同處理方式下黃瓜的干物質(zhì)積累量表現(xiàn)出很大的差異，處理組瓜干物質(zhì)累積量是對(duì)照組的1.8 倍，莖干物質(zhì)累積量是對(duì)照組的2.9 倍，葉干物質(zhì)累積量是對(duì)照組的11.5 倍。菇-熱-酶-肥處理組黃瓜各器官干物質(zhì)積累量以及總干物質(zhì)積累量均顯著大于常規(guī)栽培對(duì)照組( P ＜0.05) 。

圖1 菇-熱-酶-肥栽培方式處理后黃瓜干物質(zhì)的累積量Fig.1 Dry matter accumulation of cucumber in a mushroomcucumber rotation system featured by mushroom-heatenzyme-fertilizer synergism

由圖2 可知，處理組的瓜、莖、葉這3 種器官生物量的累積速率均顯著高于對(duì)照組( P ＜0.05) 。處理組瓜的干物質(zhì)累積速率比對(duì)照組高73.4%，莖的干物質(zhì)累積速率比對(duì)照組高170.9%，葉的干物質(zhì)累積速率比對(duì)照組高1 038.5%。處理組生物量的累積主要集中在瓜和葉2 種器官上，而對(duì)照組葉片上干物質(zhì)累積較少?？梢娎霉?熱-酶-肥新型栽培方式能夠有效提高黃瓜各器官的生長速率，從而達(dá)到提高產(chǎn)量、增加效益的作用。

圖2 菇-熱-酶-肥栽培方式處理后黃瓜各器官干物質(zhì)的累積速率Fig.2 Dry matter accumulation rate of cucumber in a mushroom-cucumber rotation system featured by mushroomheat-enzyme-fertilizer synergism

2.2 菇-熱-酶-肥栽培方式對(duì)黃瓜植株生長形態(tài)的影響

由表1 可看出，通過菇-熱-酶-肥新型栽培方式處理的黃瓜植株地上部分除了莖寬、莖窄與對(duì)照組沒有顯著性差異之外，其他指標(biāo)均顯著高于對(duì)照( P ＜0.05) 。處理組黃瓜植株有較多的葉片數(shù)，較大的葉長和葉寬，保證了葉片能夠接收更多的光能，積累更多的有機(jī)物。黃瓜植株地下部分各指標(biāo)處理組均顯著大于對(duì)照組( P ＜0.05) ，處理組的黃瓜植株有較多的根部體積、側(cè)根數(shù)、根鮮質(zhì)量，這就為根部吸收更多的營養(yǎng)物質(zhì)提供了基礎(chǔ)，并進(jìn)而利于植株積累更多的有機(jī)物。

表1 菇-熱-酶-肥栽培方式黃瓜地上部分形態(tài)指標(biāo)的變化Table 1 The changes of morphological indices of cucumber in a cucumber-mushroom rotation system featured by mushroom-heat-enzyme-fertilizer synergism

2.3 菇-熱-酶-肥栽培方式對(duì)黃瓜不同葉位葉片葉綠素含量的影響

葉片葉綠素含量與葉綠素儀所測得的SPAD 值具有良好的一致性［25-27］。圖3 顯示，菇-熱-酶-肥新型栽培方式處理和常規(guī)栽培處理下黃瓜同一葉位的SPAD 值沒有顯著性差異。

進(jìn)一步通過浸提法測定離體葉片的葉綠素含量及其組分的變化( 表2) ，可知，對(duì)照組黃瓜3 個(gè)葉位葉片葉綠素a 含量、葉綠素b 含量及總?cè)~綠素含量與對(duì)照組相比均無顯著差異。

圖3 菇-熱-酶-肥栽培方式處理后黃瓜葉片的SPAD 值Fig.3 The SPAD value of cucumber leaves in a mushroon-cucumber rotation system featured by mushroom-heat-enzyme-fertilizer synergism

表2 不同栽培方式不同葉位黃瓜葉片葉綠素含量Table 2 The chlorophyll content of leaves on different leaf positions of cucumber in a cucumber-mushroom rotation system featured by mushroom-heat-enzyme-fertilizer synergism

2.4 菇-熱-酶-肥栽培方式對(duì)黃瓜根系活力的影響

對(duì)照組根系活力為89. 9 μg/( g·h) ，處理組根系活力為137.8 μg/( g·h) ，處理組黃瓜根系活力比對(duì)照組高53. 3%，顯著大于對(duì)照組( P ＜0. 05) 。

2.5 菇-熱-酶-肥栽培方式對(duì)黃瓜葉片硝酸還原酶活性的影響

由圖4 可知，菇-熱-酶-肥處理組黃瓜葉片葉位4、葉位5 的硝酸還原酶活性顯著高于常規(guī)栽培對(duì)照組; 葉位6 兩種處理間硝酸還原酶活性沒有表現(xiàn)出顯著性差異，但處理組比對(duì)照組的硝酸還原酶活性高14. 9%?？傮w來看，菇-熱-酶-肥新型栽培方式下黃瓜葉片硝酸還原酶的活性較高。

圖4 菇-熱-酶-肥栽培方式處理后黃瓜葉片的硝酸還原酶活性Fig.4 The activities of nitrate reductase of cucumber leaves in a mushroom-cucumber rotation system featured by mushroom-heat-enzyme-fertilizer synergism

2.6 黃瓜植株生理形態(tài)各指標(biāo)的相關(guān)性

從表3 可以看出，黃瓜干物質(zhì)的累積量與葉片數(shù)、葉片長、葉片寬、根體積、側(cè)根數(shù)、根系活力、硝酸還原酶活性達(dá)顯著性相關(guān)，其中與葉片寬、側(cè)根數(shù)、根系活力極顯著相關(guān)，表明菇-熱-酶-肥新型栽培方式通過影響葉片數(shù)量、葉片大小、根部形態(tài)與活性以及葉片硝酸還原酶活性，增強(qiáng)了有機(jī)物的積累。

表3 菇-熱-酶-肥栽培方式處理后黃瓜植株生理、形態(tài)各指標(biāo)的相關(guān)性分析Table 3 The correlation analysis between morphological and physiologcal indices of cucumber in a mushroom-cucumber rotation system featured by mushroom-heat-enzyme-fertilizer synergism

3 討論

光合作用是植物將光能轉(zhuǎn)換為可用于生命過程的化學(xué)能，并進(jìn)行有機(jī)物合成的生物過程［28］，植物干物質(zhì)的90%以上來自光合作用［29］。在本研究中菇-熱-酶-肥處理組的黃瓜各部分干物質(zhì)的累積量和累積速率都顯著高于對(duì)照組( P ＜0.05) ，反映出處理組黃瓜能積累更多的干物質(zhì)。葉綠素是植物葉綠體內(nèi)參與光合作用的重要色素，是光反應(yīng)進(jìn)行的基礎(chǔ)，長期以來葉綠素含量被作為衡量葉片光能吸收和利用能力的指標(biāo)［30］。本研究中同一葉位處理組與對(duì)照組之間的葉綠素含量并沒有顯著差異，說明處理組提高黃瓜的產(chǎn)量以及莖、葉干物質(zhì)的累積并不是通過提高單個(gè)葉片的光能吸收和利用能力，而是通過增大葉片面積和增多葉片數(shù)來捕獲更多的光能，提高群體光合利用效率。根系是植物長期適應(yīng)陸地生活的重要器官之一，植物根系形態(tài)構(gòu)型在很大程度上決定了植物根系在土壤中的空間分布和所接觸到土壤體積大小，因而對(duì)植物的養(yǎng)分吸收速率十分重要［31］，根系活力越強(qiáng)，吸收表面積越大，就越有利于吸收水分和養(yǎng)分［32］。硝酸還原酶活性直接影響到土壤中無機(jī)氮的利用效率，從而對(duì)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)產(chǎn)生影響［33］?？傮w上處理組黃瓜有較多的根、較大的根體積、較高的根系活力以及較高的葉片硝酸還原酶活力，這為其積累更多的有機(jī)物提供了形態(tài)基礎(chǔ)和生理基礎(chǔ)。

菇-熱-酶-肥新型栽培方式實(shí)行草菇-黃瓜輪作在生產(chǎn)上可以實(shí)現(xiàn): ( 1) 資源的合理利用。稻草秸稈為水稻生產(chǎn)過程中的副產(chǎn)物，在現(xiàn)代的生產(chǎn)中一般作為廢棄物拋棄或者直接燃燒，這樣不但會(huì)浪費(fèi)稻草中所儲(chǔ)存的有機(jī)物，燃燒產(chǎn)生的大量煙霧還會(huì)污染空氣。將稻草秸稈用于生產(chǎn)草菇可以實(shí)現(xiàn)資源的合理利用，同時(shí)綠色環(huán)保。( 2) 節(jié)約能源。稻草秸稈在生產(chǎn)完草菇之后剩下的菌糠殘?jiān)?，可作為基質(zhì)供土壤微生物產(chǎn)生的纖維素酶和漆酶分解，分解后的產(chǎn)物是后續(xù)生產(chǎn)黃瓜的肥料。在過去的日光溫室黃瓜生產(chǎn)中，一般都會(huì)將化肥作為黃瓜生產(chǎn)的施用肥料。實(shí)行菇-熱-酶-肥新型栽培方式不但可以節(jié)省化肥，微生物在分解菌糠以及雞糞等有機(jī)肥的過程中產(chǎn)生大量的熱，這為冬季日光溫室黃瓜生長提供了有利條件，達(dá)到節(jié)約能源的作用。( 3) 緩解連作障礙。在之前的日光溫室大棚生產(chǎn)中常會(huì)因?yàn)檫B作而引起連作障礙，草菇-黃瓜輪作不但可以改善土壤的成分還可以顯著提高黃瓜的產(chǎn)量，起到實(shí)質(zhì)性的緩解連作障礙的作用。

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