李 帥，張震中，于福鑫，袁曉霞，辛小紅，巴哈爾·哈德?tīng)枴?/p>

(1.河南省鄲城縣中醫(yī)院，河南鄲城 477150;2.新疆醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，烏魯木齊 830011; 3.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院，烏魯木齊 830000;4.新疆烏魯木齊新市區(qū)銀川路社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，烏魯木齊 830054)

老年性癡呆中醫(yī)證型與血漿乙酰膽堿、β-淀粉樣蛋白相關(guān)性研究*

李 帥1，2，張震中3，于福鑫4，袁曉霞2，辛小紅2，巴哈爾·哈德?tīng)?△

(1.河南省鄲城縣中醫(yī)院，河南鄲城 477150;2.新疆醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，烏魯木齊 830011; 3.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院，烏魯木齊 830000;4.新疆烏魯木齊新市區(qū)銀川路社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，烏魯木齊 830054)

目的:探討AD中醫(yī)證型與血漿Ach、β-淀粉樣蛋白相關(guān)性。方法:將142例納入的AD患者按中醫(yī)辨證分為髓海不足證、肝腎陰虛證、脾腎兩虛證、心肝火旺證、痰濁阻竅證和氣滯血瘀證，并以30例健康老人設(shè)為正常組。采用ELISA法測(cè)定血漿Ach、β-淀粉樣蛋白含量。結(jié)果:AD患者血漿Ach含量明顯低于正常組，AD患者血漿Aβ1-40、Aβ1-42含量均明顯高于正常組。AD患者各證型間比較，髓海不足證血漿Ach的含量低于肝腎陰虛證、心肝火旺證和痰濁阻竅證，而血漿Aβ1-42含量高于心肝火旺證，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。痰濁阻竅證血漿Aβ1-40含量高于肝腎陰虛證、心肝火旺證和氣滯血瘀證，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。痰濁阻竅證和氣滯血瘀證血漿Aβ1-42含量均高于心肝火旺證，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:AD中醫(yī)證型與血漿Ach、β-淀粉樣蛋白含量有相關(guān)性。

老年性癡呆;中醫(yī)證型;血漿乙酰膽堿、β-淀粉樣蛋白;相關(guān)性

老年性癡呆亦稱(chēng)阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)一種常見(jiàn)的進(jìn)行性神經(jīng)退行性疾病，是導(dǎo)致老年前期和老年期癡呆的主要原因，臨床主要表現(xiàn)為進(jìn)行性記憶力減退、認(rèn)知功能下降、語(yǔ)言功能缺失、視空間功能減退、社會(huì)及個(gè)人生活能力下降和情感人格改變等。隨著世界人口老齡化的進(jìn)程，老年性癡呆的發(fā)病率也在逐漸上升，已成為嚴(yán)重威脅老年人健康和生活質(zhì)量的常見(jiàn)病種。在治療上，除使用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)診治手段外，以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，按證型辨證論治也取得了較好的效果。本研究通過(guò)檢測(cè) AD 患者血漿乙酰膽堿(Acetylcholine，Ach)、β-淀粉樣蛋白的含量，以探討該指標(biāo)與中醫(yī)證型的關(guān)系，為提高中西醫(yī)結(jié)合治療老年性癡呆的療效提供一些理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

老年性癡呆的全部病例來(lái)源于2012年3月至2013年10月新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院腦病科和老年病科及烏魯木齊市5家老年公寓確診的老年性癡呆病人。經(jīng)過(guò)篩選符合診斷有效病例共142例，男性48例，女性94例，最大年齡93歲，最小年齡65歲，平均年齡(77.18±7.10)歲。其中髓海不足證30例，肝腎陰虛證20例，脾腎兩虛證27例，心肝火旺證20例，痰濁阻竅證23例，氣滯血瘀證22例。另選擇30例老年健康體檢者為正常組，其中男性13人，女性17人，最小年齡65歲，最大年齡96歲，平均年齡(79.60±8.20)歲。2組在性別、年齡分布上比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) 主要參考照美國(guó)精神病學(xué)會(huì)(APA)修訂的《精神障礙診斷與統(tǒng)計(jì)手冊(cè)》第4版修訂本(DSM-IV-R)有關(guān)老年性癡呆的診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］。

1.2.2 中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照國(guó)家藥品監(jiān)督管理局《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》［2］和中醫(yī)診斷學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)對(duì)老年性癡呆患者進(jìn)行辨證分型。本課題采用傅仁杰《老年呆病診斷、辨證分型及療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)》［3］，主要分為髓海不足證、肝腎陰虛證、脾腎兩虛證、心肝火旺證、痰濁阻竅證、氣滯血瘀證6個(gè)證型。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)

符合老年性癡呆診斷標(biāo)準(zhǔn)、年齡在65歲以上的患者，男女不限;入院后確診患者，再用智能障礙相關(guān)量表進(jìn)一步檢測(cè)，簡(jiǎn)易精神狀態(tài)檢查(MMSE)﹤24分;Hachinski缺血評(píng)分量表(HIS)≤4分;Cornell抑郁量表(CSDD)＜8分;患者及(或)家屬簽署知情同意書(shū)。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)

不符合納入標(biāo)準(zhǔn)的老年性患者;患有血管性癡呆、混合性癡呆以及其他癡呆患者;伴有昏迷、失語(yǔ)、聽(tīng)力障礙等不能配合的患者;有腦外傷、中毒、精神性疾病等對(duì)智能影響比較明顯的患者;頭顱CT平掃顯示腦部梗塞灶、軟化灶及其他占位性病變的患者;患有甲狀腺功能減退、腎衰竭或透析性癡呆、感染性腦部疾病、甲狀旁腺疾病、顱腦外傷、腦水腫、惡性腫瘤及維生素缺乏引起的營(yíng)養(yǎng)不良性患者。

1.5 方法

1.5.1 標(biāo)本采集 所有病例組和正常組的檢測(cè)對(duì)象均禁食12 h，清晨空腹安靜狀態(tài)下采肘前靜脈血，取5 ml置EDTA抗凝管中混勻，3000 r/min離心10min，分離血細(xì)胞，取血漿用于測(cè)定Ach和β-淀粉樣蛋白。同天抽取的靜脈血當(dāng)天在實(shí)驗(yàn)室完成分離，－80℃冰箱保存待測(cè)。

1.5.2 實(shí)驗(yàn)方法 試劑盒由北京永輝科技公司提供。檢測(cè)方法:用ELISA法定量測(cè)定人血漿中的Ach和β-淀粉樣蛋白含量。在新疆醫(yī)科大學(xué)一附院實(shí)驗(yàn)中心進(jìn)行檢測(cè)，具體實(shí)驗(yàn)步驟按照說(shuō)明書(shū)內(nèi)容依次操作。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用方差分析，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病例組和正常組血漿 Ach、Aβ1-40及Aβ1-42含量比較

表1顯示，病例組AD患者血漿Ach含量明顯低于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。病例組AD患者血漿Aβ1-40及Aβ1-42含量均明顯高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 病例組和正常組血漿Ach、Aβ1-40及Aβ1-42含量比較(±s)

表1 病例組和正常組血漿Ach、Aβ1-40及Aβ1-42含量比較(±s)

注:與正常組比較:*P＜0.05

組 別 例數(shù) Ach(ng/L) Aβ1-40(ug/L) Aβ1-42(pg/ml)病例組 142 27.31±15.72*72.94±14.73* 45.07±17.07*30 41.22±22.11 62.75± 5.30 35.26± 4.23正常組

2.2 老年性癡呆不同中醫(yī)證型及正常組血漿Ach、Aβ1-40及Aβ1-42含量比較

表2顯示，AD髓海不足證、脾腎兩虛證和氣滯血瘀證的患者，血漿Ach的含量均低于正常組(P＜0.01)，而肝腎陰虛證、心肝火旺證和痰濁阻竅證的AD患者，血漿Ach的含量與正常組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。AD不同中醫(yī)證型患者的血漿Aβ1-40的含量均明顯高于正常組(P＜0.01或P＜0.05)。AD除心肝火旺證型外，其他5個(gè)證型患者的血漿Aβ1-42含量均顯著高于正常組(P＜0.01或P＜0.05)。AD患者各證型組間比較，髓海不足證血漿Ach的含量低于肝腎陰虛證、心肝火旺證和痰濁阻竅證(P＜0.05);髓海不足證血漿Aβ1-42含量高于心肝火旺證(P＜0.05);痰濁阻竅證血漿Aβ1-40的含量均高于肝腎陰虛證、心肝火旺證和氣滯血瘀證(P＜0.01或 P＜0.05);痰濁阻竅證和氣滯血瘀證血漿Aβ1-42的含量均高于心肝火旺證(P＜0.05或P＜0.01)。

3 討論

AD已成為嚴(yán)重危害人類(lèi)生活的高發(fā)疾病，目前是導(dǎo)致老年人死亡的主要原因之一，僅次于心腦血管疾病和惡性腫瘤。其特征性病理學(xué)改變是大腦皮層和皮層下結(jié)構(gòu)細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)元纖維纏結(jié)(NFT)、細(xì)胞外大量老年斑(SP)形成及神經(jīng)元缺失。而β淀粉樣肽(Aβ)是SP的主要成分。β-AP是由39～43個(gè)氨基酸組成的多肽，是淀粉樣前體蛋白(APP)的代謝產(chǎn)物，其主要成分為Aβ1-40和Aβ1-42兩種［4］。目前，針對(duì)AD的發(fā)病機(jī)制，多數(shù)醫(yī)家廣泛接受膽堿能受損假說(shuō)。該假說(shuō)認(rèn)為，腦內(nèi)乙酰膽堿(Ach)被認(rèn)為與記憶密切相關(guān)，AD患者腦中乙酰膽堿酯酶活性以及乙酰膽堿的合成和釋放等功能下降，乙酰膽堿缺失是導(dǎo)致AD發(fā)病的關(guān)鍵原因［5］。而Aβ在腦內(nèi)的沉積可使膽堿能神經(jīng)元數(shù)量減少或變性，從而引起膽堿能系統(tǒng)功能異常［6］。本研究結(jié)果顯示，AD患者血漿Ach含量明顯降低，Aβ1-40、Aβ1-42含量明顯升高，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。

表2 各證型和正常組血漿Ach、Aβ1-40及Aβ1-42含量比較(±s)

表2 各證型和正常組血漿Ach、Aβ1-40及Aβ1-42含量比較(±s)

注:與正常組比較:*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與髓海不足證比較:▲P＜0.05;與肝腎陰虛證比較:△P＜0.05;與心肝火旺證比較:#P＜0.05，##P＜0.01;與氣滯血瘀證比較:★P＜0.01

組 別 例數(shù) Ach(ng/L) Aβ1-40(ug/L) Aβ1-42(pg/ml)髓海不足證 30 22.08±12.39＊＊ 70.66±16.37＊＊ 42.39±12.58*30 41.22±22.11 62.75±5.30 35.26±4.23肝腎陰虛證 20 32.13±15.46▲ 66.48±18.09＊＊ 47.52±24.46＊＊脾腎兩虛證 27 24.36±13.37＊＊ 71.55±16.68＊＊ 42.46±15.97＊＊心肝火旺證 20 33.45±11.08▲ 65.87±17.38* 35.67±11.38▲痰濁阻竅證 23 28.62±11.58▲ 78.63±14.68＊＊△##★44.47±17.93＊＊##氣滯血瘀證 22 23.27±19.38＊＊ 67.05±16.39＊＊ 43.84±13.28＊＊#正 常 組

在我國(guó)古代醫(yī)籍中，雖然沒(méi)有老年性癡呆的病名，但卻有很多相關(guān)的記載，根據(jù)其病因病機(jī)及其臨床表現(xiàn)，此病可見(jiàn)于愚癡、郁證、呆病、善忘、神呆等疾病的論述中。本研究結(jié)果顯示，AD病例數(shù)以髓海不足證、脾腎兩虛證最多，且血漿乙酰膽堿的含量明顯低于正常組，血漿Aβ1-40、Aβ1-42含量明顯高于正常組，說(shuō)明該病的發(fā)生與腎精不足、髓海虧虛有密切關(guān)系。從AD各證型組間來(lái)看，AD的發(fā)病與痰濁和瘀血有關(guān)。正如清·陳士鐸在《石室秘錄》指出:“痰氣最盛，呆氣最深”，“治呆之奇法，治痰即治呆也”，明確說(shuō)明老年性癡呆與痰濁的關(guān)系。同時(shí)，清·唐容川在《血證論》指出:“又凡心有瘀血，亦令健忘……血在上則濁蔽而不明矣。凡失血家猝得健忘者，每有瘀血?！闭J(rèn)為瘀血也是導(dǎo)致AD發(fā)生的重要原因。從本研究中可以看出，AD為虛多實(shí)少、虛實(shí)夾雜、虛瘀痰互見(jiàn)。目前文獻(xiàn)較一致的觀(guān)點(diǎn)是，AD是一種全身性疾病，病位在腦，與腎、脾、心、肝等臟腑功能失調(diào)均有關(guān)，而關(guān)鍵在腎。其病理性質(zhì)為本虛標(biāo)實(shí)，五臟虛衰、氣血虧損、髓海空虛、心神失養(yǎng)、清陽(yáng)不升、腦竅失養(yǎng)為本，瘀血、痰濁內(nèi)阻，濁陰不降、上蒙清竅為標(biāo)［7］。

本次研究選取的AD患者臨床病例及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析顯示，AD血漿Ach、β-淀粉樣蛋白與中醫(yī)證型具有一定的相關(guān)性，并有其內(nèi)在的客觀(guān)機(jī)制。課題組將繼續(xù)進(jìn)行更大規(guī)模的臨床研究，探討AD中醫(yī)證型與血漿Ach、β-淀粉樣蛋白含量的相關(guān)性，以便在AD中醫(yī)辨證分型方面有更多的生化指標(biāo)作為分型標(biāo)準(zhǔn)，也為中醫(yī)證候?qū)W研究提供理論依據(jù)，更好地指導(dǎo)臨床實(shí)踐。

［1］賈建平，崔麗英，王偉.神經(jīng)病學(xué)［M］.6版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2008:217-218.

［2］鄭筱萸.中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則(試行)［S］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2002:91-99.

［3］傅仁杰.老年呆病的診斷、辨證分型及療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)(討論稿)［J］.中醫(yī)雜志，1991，32(2):56-57.

［4］徐寶鋼.β淀粉樣多肽1-42(Aβ42)多克隆抗體的制備及其鑒定［J］.放射免疫學(xué)雜志，2003，16(6):322-325.

［5］鄭清川，楚慧郢，牛瑞娟，等.人類(lèi)乙酰膽堿酯酶(AChE)與抑制劑小分子的對(duì)接研究［J］.中國(guó)科學(xué)，2009，39(11):1454-1460.

［6］Harkany T，O'mahony S，Kelly JP，et al.Beta-amyloid［Phe (S03H)24］25-35 in rat nucleus basalis induces behavioral dysfunctions，impairs learning and memory and disrupts cortical cholinergic innervation［J］.Behav Brain Res，1998，90(2):133-145.

［7］白慧梅.中醫(yī)藥治療老年性癡呆臨床研究概況［J］.河北中醫(yī)，2008，30(6):658-660.

R285.5

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1006-3250(2015)01-0076-02

2014-10-06

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81260563)-老年性癡呆維醫(yī)分型與中醫(yī)辨證分型規(guī)律的交互性研究

李 帥(1981-)，男，河南鄲城人，住院醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事中醫(yī)腦病學(xué)研究。

△通訊作者:巴哈爾·哈德?tīng)?，?維吾爾族)，新疆哈密人，副主任醫(yī)師，教授，碩士研究生導(dǎo)師，Tel:0991-4366153，E-mail:1301885416@qq.com。