姚曉坤，潘志鵬，倫永志

（大連大學(xué) 醫(yī)學(xué)院 遼寧省高校生物物理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連 116622）

人類和小鼠的絲氨酸蛋白酶抑制劑基因超家族

姚曉坤，潘志鵬，倫永志*

（大連大學(xué) 醫(yī)學(xué)院 遼寧省高校生物物理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連 116622）

絲氨酸蛋白酶抑制劑（Serine protease inhibitor, Serpin）家族是由結(jié)構(gòu)相似，功能多樣的蛋白質(zhì)組成。最初的serpin是根據(jù)他們的功能而命名的，其中許多成員不是抑制劑而是伴侶，它們參與儲存，運(yùn)輸及其他作用。在所有領(lǐng)域的基因組中，serpin含有36個編碼人蛋白質(zhì)基因和5個假基因。小鼠則有60個serpin的功能基因，其中有許多是直系同源人的serpin基因，一些基因已擴(kuò)展到多個旁系同源基因。絲氨酸蛋白酶抑制因子（serpins）分布于全身組織；其中大多數(shù)在細(xì)胞外，也有一些在細(xì)胞內(nèi)。經(jīng)研究顯示，serpins可能對炎癥，免疫功能，腫瘤發(fā)生，血液凝固，癡呆和腫瘤轉(zhuǎn)移都有作用。根據(jù)這些蛋白的特性，可能將會進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)疾病的潛在生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。

絲氨酸蛋白酶抑制劑；血液凝固；補(bǔ)體；細(xì)胞死亡

Serpins代表規(guī)模最大的蛋白酶抑制劑家族，其功能也最多樣化的。serpin這個名稱，最初來源于對這個家族功能的描述，即絲氨酸蛋白酶抑制劑。在他們的初始狀態(tài)中，serpins作為單體蛋白質(zhì)存在，大多數(shù) serpin的家族成員能抑制糜蛋白酶家族的絲氨酸蛋白酶[1]，從而抑制蛋白級聯(lián)反應(yīng)。然而，一些serpins具有激素運(yùn)輸和其他機(jī)制的功能，這與抑制催化活性無關(guān)。大約有1500個serpin的序列已經(jīng)被確定，它們?nèi)看嬖谟谖鍌€領(lǐng)域的基因組當(dāng)中[2]。其中有 36個被推定為人的功能蛋白編碼基因[3]。Serpins具有非常保守的二級結(jié)構(gòu)，帶有裸反應(yīng)中心環(huán)（RCL），這種結(jié)構(gòu)能通過與蛋白酶活性位點(diǎn)的相互作用來抑制蛋白酶活性[4]。對于 serpins的功能來說，具有構(gòu)象變化的能力起著關(guān)鍵作用，原理機(jī)制是serpins通過自殺底物表現(xiàn)出抑制功能[2,5]。雖然大多數(shù)serpins選擇性地抑制絲氨酸蛋白酶，但還有一些抑制半胱氨酸蛋白酶，比如胱天蛋白酶和組織蛋白酶；有一些serpins有運(yùn)輸激素和調(diào)節(jié)血壓的的功能[5]。serpins在運(yùn)輸激素，皮質(zhì)類固醇的結(jié)合與凝結(jié)，調(diào)節(jié)血壓中都發(fā)揮重要的生理作用。

1 人和小鼠絲氨酸蛋白酶抑制劑的主要亞型

serpin的超家族根據(jù)它們序列相似性而分組，稱為亞型。亞型被劃分為 A-P，亞型 A-I代表人類的serpins[5]。其中A和B的亞型是最重要的，也是最多見的，下文著重介紹這兩者。

1.1 亞型A

Serpins的A亞型被歸為抗胰蛋白酶類，屬于細(xì)胞外蛋白質(zhì)。在八個細(xì)胞外serpins當(dāng)中，亞型A是最大的亞型。SERPINA含有11個人功能蛋白編碼基因和兩個假基因[6,7]。

SERPINA1又稱為抗胰蛋白酶，對嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶有抑制性作用[3,8]。

SERPINA2之前被歸類為假基因；然而，最近的研究表明，它是一個位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的編碼蛋白[9]。通過多個種族的基因組測序而開展了一項(xiàng)關(guān)于SERPINA2的研究，通過部分刪除而顯示出陽性篩選的提示模式，對于部分丟失的 SERPINA2的功能蛋白具有單倍型特征。表明在人體的局部假基因化可暗示正在進(jìn)行假基因化的過程[10]。

SERPINA3先前被稱為糜蛋白酶的抑制蛋白。它能抑制胰凝乳蛋白酶和組織蛋白酶 G的活性[11]。此抑制物通常分布在血液、肝、腎和肺中。

SERPINA4原被稱為kallistatin（PI4），是一種抑制蛋白，抑制激肽釋放酶的活性。在血液、肝、腎、和心臟中分布。

SERPINA5，原為蛋白C抑制劑，抑制活性蛋白C。分布于血液，腎臟和肝臟[12]。

SERPINA6又稱為結(jié)合皮質(zhì)甾類球蛋白。是一種非抑制性蛋白結(jié)合的激素，即皮質(zhì)醇。

SERPINA7，之前為甲狀腺素結(jié)合球蛋白，參與非抑制甲狀腺激素的運(yùn)輸。在血液，腎臟和心臟中表達(dá)。

SERPINA8現(xiàn)稱為血管緊張素原（AGT），是一種激素前體。它有一個獨(dú)特的serpin域和一個更小的AGT域。這種特殊的serpin域似乎可以更緊密地把SERPINF和SERPING聯(lián)系在一起[13]。

SERPINA9對幼稚B細(xì)胞可能有保護(hù)作用。之前被稱為centerin，在血漿和肝臟中表達(dá)[14]。

SERPINA10是抑制凝血因子 Z和凝血因子 11活化的抑制蛋白[3]。最初為蛋白質(zhì)Z-依賴蛋白酶抑制劑，在血液和肝臟中表達(dá)。

SERPINA11可能是一個假基因，無特征。

SERPINA12，之前被稱為vaspin，是抑制激肽釋放酶，對胰島素敏感性有一定作用?？赡茉谘獫{，血小板，肝和心臟中表達(dá)。

在小鼠中，Serpina1已擴(kuò)大到六個，a-f。Serpina3已擴(kuò)大到九個，a-c和f-n。Serpina8，現(xiàn)今在鼠類中稱為Agt，對于腎素 - 血管緊張素系統(tǒng)的功能和進(jìn)化起著至關(guān)重要的作用。在人類中與AGT同源。

1.2 亞型B

亞型B由細(xì)胞內(nèi)的serpins組成，包括ovserpins，與細(xì)胞外的serpins是一個根系。相對于典型的A亞型這個亞家族具有更短的C，N末端，也同樣缺乏分泌信號肽序列[5]。在亞型B中有13個人類基因和一個假基因。對于炎癥、免疫系統(tǒng)功能以及粘液的產(chǎn)生，亞型B起重要作用。SERPINB1，B6，B7，B9都參與免疫系統(tǒng)功能，對于嗜中性粒細(xì)胞和巨核細(xì)胞的發(fā)育也有作用，同時對于細(xì)胞毒性顆粒蛋白酶粒酶 B有抑制作用。SERPINB3和與其密切同源的B4對粘液的產(chǎn)生均有抑制作用，分布在上皮組織，如舌、扁桃體、子宮、宮頸、陰道，以及上呼吸道和胸腺。

SERPINB3可能參加細(xì)胞凋亡和免疫功能的調(diào)節(jié)，證明 B3對腫瘤轉(zhuǎn)移和自身免疫是有作用的。SERPINB5作為一種腫瘤抑制劑，在乳腺和前列腺腫瘤中有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的作用。此外，在 B亞型中多數(shù)的 serpins與口腔鱗狀細(xì)胞腫瘤有關(guān)，特別是SERPINB12，SERPINB13，SERPINB4，SERPINB3，SERPINB11，SERPINB7和 SERPINB2。對于SERPINB10-B13的作用鮮為人知。然而，最近的研究表明，SERPINB13對自身免疫性糖尿病進(jìn)展和炎癥有作用。

SERPINB1是嗜中性彈性蛋白酶的抑制劑。又稱為單核細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑，它的分布無處不在。

SERPINB2抑制 PLAU（UPA）。又稱為纖溶酶原激活物抑制劑 2（PAI2），并在血液，腎臟和肝臟中都有分布。

SERPINB3是組織蛋白酶L和V的跨類抑制劑。也稱為鱗狀細(xì)胞腫瘤抗原1時，在血液，免疫細(xì)胞，腎，肺，心臟和大腦以及眾多的粘膜細(xì)胞中均有分布[15]。

SERPINB4之前稱為鱗狀細(xì)胞腫瘤抗原 2；在SERPINB3中發(fā)現(xiàn)。是組織蛋白酶G和食糜酶的跨類抑制劑，分布于血漿，血小板，腎臟和心臟，以及唾液中。

SERPINB5是一種非抑制蛋白，曾被稱為乳腺絲抑蛋白?？赡茉谘?，腎，肝，肺，以及唾液中分布。

會后，各有關(guān)單位要切實(shí)做好會議精神的貫徹落實(shí)，認(rèn)真?zhèn)鬟_(dá)和貫徹好會議精神，制訂切實(shí)可行的工作方案和措施，扎扎實(shí)實(shí)把各項(xiàng)工作落到實(shí)處。各?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市）參加會議的同志要向黨委政府分管領(lǐng)導(dǎo)匯報，向廳（局）黨組匯報，重點(diǎn)匯報好陳雷部長的重要講話精神，使地方黨委政府全面了解水利改革發(fā)展中必須關(guān)注的重大問題，對本地區(qū)2012年水利規(guī)劃計劃工作盡早做出具體的安排部署。對貫徹落實(shí)本次會議精神，我提四點(diǎn)要求：

SERPINB6，稱蛋白酶抑制劑 6（PI6），是顆粒蛋白酶抑制劑，組織蛋白酶G。分布廣泛。

SERPINB7參與腎小球膜細(xì)胞增殖。之前稱為megsin，在血液和肝臟中表達(dá)。

SERPINB8是一種抑制性蛋白質(zhì)。又稱為蛋白酶抑制劑8（PI8），在血液和心臟中表達(dá)。

SERPINB9也是一種抑制性蛋白質(zhì)。又被稱為蛋白酶抑制劑9（PI9），在血液，肝，肺，心臟中表達(dá)。

SERPINB10是參與造血和骨髓發(fā)育的抑制蛋白。也稱為骨髓相關(guān)制絲蛋白，在血液中表達(dá)，也可能在大腦中表達(dá)。

SERPINB11在人體中為非抑制性serpin，但在小鼠中仍保留胰蛋白酶抑制劑的活性。在HEK細(xì)胞中可表達(dá)[16]。

SERPINB12是一種胰蛋白酶抑制劑，原名為yukopin。它分布在血液，腎臟，肝臟，心臟和腦。

SERPINB13，原名為hurpin，分布于血液，腎臟和唾液。

在B亞型中，小鼠的Serpinb1已擴(kuò)大到三個成員，a–c；Serpinb3以及Serpinb6已分別擴(kuò)展到四個成員，a–d。Serpinb4沒有列出；然而，Serpinb4可能與 SERPINB3，SERPINB4相同，與 Serpinb3a，Serpinb3b，Serpinb3c和Serpinb3d有關(guān)，最初認(rèn)為小鼠 Serpinb3d是人類 SERPINB3的同源物，小鼠Serpinb3c是SERPINB4的同源物。Serpinb9已擴(kuò)大到七個基因和一個假基因。有趣的是，Serpinb11是活躍的蛋白酶抑制劑，然而作為人的直系同源卻不活躍。

2 與serpins相關(guān)的疾病

serpin的多態(tài)性和許多疾病狀態(tài)相關(guān)，包括血液凝固系統(tǒng)紊亂，肺氣腫，肝硬化，癡呆以及腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移相關(guān)[17]。

SERPINA1的突變在循環(huán)系統(tǒng)中導(dǎo)致α-1抗胰蛋白酶降低，也與肺氣腫和肝細(xì)胞腫瘤相關(guān)[13]。Serpins與調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)相關(guān)。例如，SERPINA4與腎臟和心血管的損傷相關(guān)[14]；對于維持腎素-血管緊張素系統(tǒng)的正常功能，SERPINA8是不可或缺的，且發(fā)現(xiàn)SERPINA8的變化也可調(diào)節(jié)血壓[15]；SERPINA10的多態(tài)性對靜脈血栓栓塞有風(fēng)險[16,18]；SERPINA3的缺乏與肺氣腫有關(guān)[19]。

許多SERPINBs與免疫功能和功能障礙相關(guān)。許多情況下，細(xì)胞內(nèi)的serpins可引起炎癥，白細(xì)胞減少，腫瘤轉(zhuǎn)移和自身免疫抗體的產(chǎn)生[20]。SERPINC1的缺陷與自身免疫性疾病相關(guān)，特別是在患者體內(nèi)生產(chǎn)抗核抗體，例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡。SERPINA6的多態(tài)性與慢性疲勞綜合征相關(guān)[21]，已被認(rèn)為是一種免疫病癥。SERPINA7的缺乏與甲狀腺功能亢進(jìn)有關(guān)，而高水平的SERPINA12與胰島素抵抗有關(guān)。

SERPINH1和SERPINF1的突變與成骨不全相關(guān)[22]。

Serpins可能影響蛋白質(zhì)的聚集。在這方面，SERPINI1的表達(dá)與癡呆的發(fā)病相關(guān)[5]。此外，已確定在多發(fā)性硬化癥的斑塊中有SERPINA5的積累[23]，SERPINA3的聚合可以加速阿爾茨海默氏病的發(fā)作及嚴(yán)重程度。

許多serpins與腫瘤發(fā)展相關(guān)，包括與口腔鱗狀細(xì)胞腫瘤相關(guān)的 SERPINBs（在 18q21位點(diǎn)）。乳腺和前列腺腫瘤的轉(zhuǎn)移與 SERPINB5密切相關(guān)[24,25]；SERPINE1可能對腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移有作用；SERPINI2在乳腺和胰腺的腫瘤轉(zhuǎn)移中可能發(fā)揮一定作用[26]。成人腦膠質(zhì)瘤與SERPINI1顯著相關(guān)，但它的作用是未知的。此外，曾提議在肝細(xì)胞腫瘤中把SERPINI1作為五個生物標(biāo)志物之一。另一個潛在的生物標(biāo)志物為 SERPINA9，在 B細(xì)胞淋巴瘤中發(fā)現(xiàn) SERPINA9的強(qiáng)烈表達(dá)[27]。

人類的許多疾病是由于serpin的基因變異，通常對于每個基因來說許多有害的突變已為人所知。比如，SERPINA1的突變與早發(fā)性肺氣腫，新生兒肝炎，肝硬化相關(guān)，有時與脂膜炎和血管炎相關(guān)[28,29]。SERPINA5的突變與增加乳頭狀甲狀腺腫瘤的風(fēng)險相關(guān)，SERPINA10的突變與妊娠并發(fā)癥相關(guān)。傾向性家族靜脈血栓栓塞性疾病與 SERPINC1的突變相關(guān)[30]。此外，SERPING1的基因SNP變體與遺傳性血管水腫相關(guān)[31]。

3 結(jié)論

serpins是一大類多樣的蛋白，對于生理和病理方面都有很大貢獻(xiàn)。無論是免疫功能中serpins的鑒定，還是病理學(xué)分析，或是腫瘤轉(zhuǎn)移，都揭示著 serpins的功能多樣化及其對生理和病理的重要性，基因突變會導(dǎo)致機(jī)體功能受損及個體病理化狀態(tài)。然而，serpins的進(jìn)化和功能還需要進(jìn)一步的深入研究。根據(jù)serpins的眾多生物學(xué)功能及與其相關(guān)的病理狀態(tài)，將有關(guān)蛋白質(zhì)的功能信息進(jìn)一步進(jìn)行鑒定將會提供潛在的生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。

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The Human and Mouse SERPIN Gene Superfamily

YAO Xiao-kun, PAN Zhi-peng, LUN Yong-zhi*
(College of Medicine, Dalian University, Dalian 116622, China)

The serpin family was composed of a structurally similar and functionally diverse proteins. Named originally for their function as serine proteinase inhibitors, many of its members are not inhibitors, but rather chaperones, involved in storage, transport, and other roles. Serpins are found in genomes of all kingdoms, with 36 human protein-coding genes and 5 pseudogenes. The mouse has 60 Serpin functional genes, many of which are orthologous to human SERPIN genes and some of which have expanded into multiple paralogous genes. Serpins are found in tissues throughout the body; whereas most are extracellular, there is a class of intracellular serpins. Serpins appear to play roles in inflammation, immune function, tumorigenesis, blood clotting, dementia, and cancer metastasis. Further characterization of these proteins will likely reveal potential biomarkers and therapeutic targets for disease.

serpine protease inhibitors; blood clotting; complement; cell death

R393

A

1008-2395(2015)06-0070-05

2015-10-21

姚曉坤（1990-），女，碩士研究生，研究方向：病原生物基因結(jié)構(gòu)與功能。

倫永志（1973-），男，博士，副教授，研究方向：感染性疾病的分子生物學(xué)。