東南大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科 (江蘇 南京，210003)

HBsAg 與反映病毒復(fù)制的HBV DNA 合成途徑不同，兩者在血清中的表達(dá)水平也不平行［1］，在抗病毒治療過(guò)程中HBsAg定量檢測(cè)結(jié)果對(duì)療效有預(yù)測(cè)作用，HBeAg 的轉(zhuǎn)歸則是治療有效最明顯的標(biāo)志，而HBV DNA 則反映的是有無(wú)復(fù)制和傳染性的強(qiáng)弱。為了進(jìn)一步探討CHB 患者外周血中HBsAg 濃度與HBV DNA 含量及HBeAg 的滴度以及反應(yīng)肝臟受損的主要指標(biāo)ALT的關(guān)系，本研究收集了437例CHB 患者的血清，分別對(duì)其進(jìn)行HBsAg 濃度、HBV DNA、HBeAg 滴度及ALT 檢測(cè)，并對(duì)其結(jié)果進(jìn)

行分析。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 437例血清標(biāo)本來(lái)自南京市第二醫(yī)院2012年12月-2013年5月期間住院的CHB 患者，其中男307例，女130例;年齡6～82歲，平均34.9歲。診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)制定的《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》的診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］。所有標(biāo)本無(wú)溶血和脂血等現(xiàn)象，并排除甲、丙、丁、戊、庚型病毒性肝炎合并感染。

1.2 主要儀器與試劑 主要儀器為美國(guó)ABBOTT 公司ARCHITECT 2000 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀;羅氏LightCycler480 實(shí)時(shí)定量PCR 儀，日本HITACHI 公司7600-120 全自動(dòng)生化分析儀。試劑:美國(guó)ABBOTT 公司HBsAg 和HBeAg 試劑;HBV DNA 熒光定量試劑盒由上?？迫A生物技術(shù)有限公司提供;ALT 測(cè)定試劑盒由北京萊幫生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 方法 HBsAg 濃度和HBeAg 的滴度均采用微粒子發(fā)光法檢測(cè);HBV DNA 檢測(cè)采用熒光實(shí)時(shí)定量方法檢測(cè)，HBV DNA≤5.0×102IU/ml 為檢測(cè)下限，HBV DNA 定量取常用對(duì)數(shù)表示;ALT 測(cè)定采用速率法。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 16.0 軟件。不符合正態(tài)分布的變量采用中位數(shù)描述。HBV DNA 進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。定量資料多組間比較先采用Levene 方差齊性檢驗(yàn)，若方差不齊，采用Welch 法;當(dāng)組間均數(shù)有顯著差異時(shí)，需做多重比較，方差齊性的多重比較采用LSD 法，基于方差不齊的多重比較采用Tambane’s T2 的方法。所有檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)均為0.05。

2 結(jié)果

2.1 不同HBsAg 濃度與HBV DNA，HBeAg、ALT 水平比較 將HBsAg 指標(biāo)按濃度由低到高依次分為5 組，并分別與HBV DNA、HBeAg 和ALT 比較分析，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同HBsAg 濃度與HBV DNA、HBeAg、ALT 比較

表1 結(jié)果顯示，不同HBsAg 濃度組之間HBV DNA 定量水平差異有顯著性意義(F=119.753，P＜0.01)，組間兩兩分別比較，各組之間差異有顯著性意義(P＜0.01);不同HBsAg 濃度組間HBeAg 滴度的比較，差異有顯著性意義(F=175.457，P＜0.01)，各組間兩兩比較，差異有顯著性意義(P＜0.01)。不同HBsAg 濃度組間之間ALT 水平的比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.545，P=0.056)

2.2 不同濃度HBsAg 患者HBV DNA 定量，HBeAg 滴度、AlT多重比較的P 值 統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2～表4。

表2 不同HBsAg 濃度患者HBV DNA 定量多重比較的P 值

表3 不同HBsAg 濃度患者HBeAg 滴度多重比較的P 值

表4 不同HBsAg 濃度患者ALT 多重比較的P 值

3 討論

HBsAg 的血清清除是CHB 治愈的最佳指征。研究發(fā)現(xiàn)HBsAg 定量檢測(cè)結(jié)果與HBV 感染的肝細(xì)胞核內(nèi)HBV DNA 的量相關(guān)［3］，血清HBsAg 水平能反應(yīng)肝臟內(nèi)激活的cccDNA(共價(jià)閉合環(huán)狀DNA)的水平，所以HBsAg 被認(rèn)為是細(xì)胞感染的標(biāo)志［4～7］。同時(shí)，HBsAg 水平能夠直接反映出機(jī)體的免疫狀態(tài)，并且與機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)病毒的控制有著密切的聯(lián)系［8］。這使得越來(lái)越多的學(xué)者致力于研究HBsAg 定量檢測(cè)與CHB 病程的確切關(guān)系，并探討利用HBsAg 定量檢測(cè)結(jié)果預(yù)測(cè)CHB 的轉(zhuǎn)歸及預(yù)后。HBV DNA 與HBeAg 水平高低同樣也是反應(yīng)病毒復(fù)制水平高低及傳染性強(qiáng)弱的標(biāo)志，如果把HBsAg 定量和HBeAg 血清學(xué)轉(zhuǎn)換作為聯(lián)合預(yù)測(cè)指標(biāo)，治療結(jié)束時(shí)，如果HBsAg 定量水平下降且發(fā)生HBeAg 血清學(xué)轉(zhuǎn)換，最終將得到治療的持續(xù)應(yīng)答或獲得持久免疫控制狀態(tài)。因此探討這3 項(xiàng)檢查的關(guān)聯(lián)性就顯得非常有意義。

本研究結(jié)果顯示，血清HBsAg 濃度＞10000IU/ml 時(shí)與HBV DNA 定量各組間存在非常顯著的關(guān)聯(lián)性，但是當(dāng)HBsAg濃度達(dá)到1000IU/ml 以上時(shí)，與HBeAg 的滴度就呈現(xiàn)出非常顯著的關(guān)聯(lián)性，而HBsAg 濃度與血清ALT 活性無(wú)關(guān)聯(lián)性。因此，HBsAg 濃度在高水平時(shí)亦可以間接反映患者體內(nèi)HBV 復(fù)制水平的高低，而HBsAg 濃度持續(xù)下降至1000IU/ml 以下時(shí)，HBeAg的血清學(xué)轉(zhuǎn)歸的可能性將大大增加。同時(shí)，本研究結(jié)果還顯示HBsAg 濃度與肝臟的受損程度沒(méi)有明顯的關(guān)系。因此，對(duì)于臨床抗病毒治療的患者，若無(wú)條件定量檢測(cè)HBV DNA 水平，可以動(dòng)態(tài)觀察HBsAg 濃度來(lái)間接推斷體內(nèi)HBV 復(fù)制水平，并預(yù)測(cè)HBeAg 的血清學(xué)轉(zhuǎn)歸。

目前較多的研究結(jié)論都反映出血清中HBsAg 與HBV DNA之間存在正相關(guān)性，HBsAg 水平可以反映病毒復(fù)制情況，因此，筆者認(rèn)為，將HBsAg、HBeAg 及HBV DNA 三項(xiàng)指標(biāo)同時(shí)測(cè)定，將會(huì)更加全面地反映出病毒在患者體內(nèi)的復(fù)制情況，以更好地指導(dǎo)臨床制定治療方案。隨著HBsAg 定量技術(shù)的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用，讓我們更加深入地了解到其變化規(guī)律和臨床價(jià)值，并且對(duì)HBsAg 定量的認(rèn)識(shí)和應(yīng)用上升到一個(gè)新的臺(tái)階。

［1］武建國(guó).HBsAg 與HBV DNA 定量的臨床信息互補(bǔ)［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2013，31(11):801-804.

［2］中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)［J］.中華肝臟病雜志，2001，19(1):13 -24.

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