王柯靜，程 渝

（重慶市婦幼保健院藥劑科 400013）

莫西沙星為第4代新型喹諾酮類藥物，既保持了早期喹諾酮類藥物對(duì)革蘭陰性菌、革蘭陽(yáng)性菌的抗菌活性，又增強(qiáng)了對(duì)非典型病原體如支原體、衣原體、軍團(tuán)菌屬和厭氧菌的抗菌活性。莫西沙星對(duì)呼吸道常見病原菌如肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、變形桿菌、流感嗜血桿菌等均有強(qiáng)大的抗菌作用，同時(shí)組織穿透能力強(qiáng)，在肺部、支氣管黏膜和痰液中可達(dá)到很高的濃度，在支氣管黏膜中濃度比血液中高2倍，在肺泡上皮中比血液中高2～3倍，在肺泡巨噬細(xì)胞中高達(dá)9～15倍［1］，適用于肺部的感染，如急性竇炎、慢性支氣管炎急性發(fā)作、社區(qū)獲得性肺炎等。目前尚無(wú)莫西沙星在泌尿生殖系統(tǒng)中的組織分布及藥代動(dòng)力學(xué)研究，本研究參考有關(guān)文獻(xiàn)［2］，建立大鼠泌尿生殖系統(tǒng)組織中莫西沙星高效液相色譜法（HPLC）的測(cè)定方法，考察莫西沙星在泌尿生殖系統(tǒng)組織的穿透性，為莫西沙星在泌尿生殖系統(tǒng)感染治療中的合理應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 試藥 鹽酸莫西沙星片 （拜復(fù)樂，規(guī)格400mg／片，批號(hào)BJ07296），拜耳醫(yī)藥保健股份公司生產(chǎn)，灌胃時(shí)用生理鹽水配制為1%的莫西沙星溶液。莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)品由南京沃倫科技有限公司提供，純度99．3%，批號(hào)20120417；司帕沙星標(biāo)準(zhǔn)品作為內(nèi)標(biāo)，純度99．1%，批號(hào)030612，由重慶蕓峰藥業(yè)有限公司提供。乙腈為色譜純，二氯甲烷、甲醇、三乙胺、磷酸、磷酸二氫鈉均為分析純。

1．2 儀器 Angilent 1100高效液相色譜儀，Agilent 1100泵系統(tǒng)，Agilent 1100UV檢測(cè)器；色譜柱為 Sepax Amethyst C18－H（100．0mm×4．6mm，5μm）；PHS－3C酸度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；VXH－3型快速混合器（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）；B160A型醫(yī)用低速離心機(jī)（白洋離心機(jī)廠）；BP61型電子天平（德國(guó)Sartorius公司）。

1．3 動(dòng)物 雌性SD大鼠60只，體質(zhì)量（180±30）g，由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（渝）2002001。

1．4 方法

1．4．1 給藥方法及樣品制備 將60只雌性SD大鼠分為10組，給藥前禁食12h，不禁水。每只大鼠按50mg／kg灌胃給予配制好的濃度為1%的莫西沙星溶液。于給藥前、給藥后0．25、0．50、1．00、2．00、3．00、4．00、6．00、8．00、12．00、24．00h分別處死動(dòng)物，取肺、腎臟、輸尿管、膀胱、子宮、卵巢輸卵管共6種組織樣品（注：因卵巢與輸卵管分離困難，計(jì)為1種組織），分別制備組織勻漿。取肺、腎臟組織，濾紙拭干表面血液后，稱取質(zhì)量，加入2mL雙蒸水，高速分散器制備勻漿，5 000r／min離心5min后取上層，置－20℃冰箱待測(cè)。制備膀胱、子宮、卵巢、輸尿管組織勻漿時(shí)加入1mL雙蒸水，其他同“肺、腎臟組織勻漿”操作。參照文獻(xiàn)［3］，對(duì)組織樣品進(jìn)行預(yù)處理，肺：1 mL肺組織勻漿液加入30μL內(nèi)標(biāo)（司帕沙星160μg／mL）后，渦旋10s，加入4mL二氯甲烷，渦旋提取1min后5 000r／min離心，取下層有機(jī)相，70℃氮?dú)獯蹈桑?00μL流動(dòng)相復(fù)溶，60 μL進(jìn)樣。腎臟：1mL腎臟組織勻漿液加入50μL內(nèi)標(biāo)，其余操作同前。膀胱、子宮、卵巢輸卵管、輸尿管：500μL膀胱、子宮、卵巢輸卵管、輸尿管組織勻漿液加入20μL內(nèi)標(biāo)，其余操作同前。

1．4．2 組織樣品檢測(cè)

1．4．2．1 色譜條件 色譜柱為 Sepax Amethyst C18－H（100．0 mm×4．6mm，5μm），參照文獻(xiàn)［4－5］流動(dòng)相為甲醇（0．008 mol／L），磷 酸 鹽 緩 沖 液 （0．5mol／L），四 丁 基 溴 化 銨 按25∶75∶4的體積比。柱溫25℃，流速1．5mL／min，檢測(cè)波長(zhǎng)296nm，固定進(jìn)樣60μL。

1．4．2．2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密量取肺、腎臟、輸尿管、膀胱、子宮、卵巢輸卵管6種空白組織勻漿各7份，分別加入莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)液適量，按組織樣品的預(yù)處理與測(cè)定方法進(jìn)行處理和測(cè)定，以莫西沙星各濃度點(diǎn)的峰面積與內(nèi)標(biāo)司帕沙星峰面積的比值對(duì)濃度（X）進(jìn)行線性回歸，血藥濃度在0．001 6～50．000 0μg／mL線性關(guān)系良好，最低定量濃度1．6ng／mL，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程及線性范圍見表1。

1．4．2．3 回收率及日內(nèi)與日間精密度 在大鼠肺、腎臟、輸尿管、膀胱、子宮、卵巢輸卵管6種空白組織液中加入莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量，分別配制高、中、低3個(gè)濃度的含藥組織液樣品，每個(gè)濃度5份?？疾烊諆?nèi)與日間差異，日內(nèi)差異每個(gè)濃度1d內(nèi)每隔4h測(cè)定1次，日間誤差每個(gè)濃度連續(xù)測(cè)定5d，每天1次，每次測(cè)定時(shí)間相同，計(jì)算得日內(nèi)變異率（RSD，%，n＝5）和日間變異率（RSD，%，n＝5）。同法進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)，提取回收率均大于90%，見表2。

1．5 數(shù)據(jù)處理 根據(jù)所測(cè)莫西沙星濃度－時(shí)間數(shù)據(jù)，用3p97軟件計(jì)算主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

2 結(jié) 果

2．1 色譜行為 分別取空白腎組織液、空白腎組織液＋莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)品＋司帕沙星及大鼠灌服莫西沙星后3h的腎組織液樣品＋司帕沙星在上述色譜條件下進(jìn)樣分析。肺、輸尿管、膀胱、子宮、卵巢輸卵管的色譜圖與腎臟組織的類同。在本實(shí)驗(yàn)條件下，莫西沙星和司帕沙星分別與腎組織中雜峰分離良好，保留時(shí)間分別約為8．5min及5．0min，色譜見圖1。

2．2 莫西沙星在泌尿生殖系統(tǒng)各組織的濃度 大鼠按50 mg／kg灌胃給予莫西沙星后，測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)莫西沙星在肺、腎臟、輸尿管、膀胱、子宮、卵巢輸卵管6種組織中的濃度，結(jié)果見圖2。結(jié)果顯示，在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)莫西沙星在卵巢輸卵管、輸尿管的藥物濃度高于肺組織的濃度，莫西沙星在輸尿管的藥物濃度遠(yuǎn)高于其他組織的藥物濃度。莫西沙星各時(shí)間點(diǎn)在膀胱組織的藥物濃度低于肺組織，可能與膀胱組織以平滑肌為主，且肌層較厚，藥物穿透較困難有關(guān)。

2．3 莫西沙星在泌尿生殖系統(tǒng)各組織的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù) 大鼠單劑量灌服莫西沙星后，將所測(cè)肺、腎臟、輸尿管、膀胱、子宮和卵巢輸卵管6種組織濃度－時(shí)間數(shù)據(jù)經(jīng)3p97藥代動(dòng)力學(xué)程序自動(dòng)擬合，結(jié)果表明藥時(shí)曲線符合二室模型，主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表3。

表1 大鼠各組織樣品線性方程、相關(guān)系數(shù) （n＝7）

表2 大鼠各組織樣品日內(nèi)、日間精密度和提取回收率（n＝5）

圖1 HPLC法檢測(cè)圖

表3 大鼠單劑量灌服莫西沙星后各組織藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)（x±s，n＝6）

圖2 大鼠莫西沙星灌胃后不同時(shí)間點(diǎn)在泌尿生殖系統(tǒng)的平均藥物濃度

3 討 論

泌尿生殖感染是女性最常見的感染性疾病之一，在急性期若未能得到及時(shí)、合理的治療，易反復(fù)發(fā)作，遷延不愈，導(dǎo)致不孕、異位妊娠等嚴(yán)重并發(fā)癥，嚴(yán)重影響婦女的身心健康。由于病原體選擇性突變及抗菌藥物的不合理應(yīng)用等因素，目前傳統(tǒng)用于治療女性泌尿生殖道感染的β－內(nèi)酰胺類及大環(huán)內(nèi)酯類普遍耐藥，大腸埃希菌對(duì)傳統(tǒng)喹諾酮類藥物的耐藥率［6］也逐年上升。

莫西沙星是第4代喹諾酮類藥物，它是一種新型的8－甲氧基氟喹諾酮類藥物，在第8位碳上引入甲氧基團(tuán)，擴(kuò)大了抗菌譜，顯著增強(qiáng)其抗菌活性，第1位氮上的環(huán)酮丙基及第6位上的氟也使其抗菌活性增強(qiáng)［7］，它既保留了前3代喹諾酮類藥物抗革蘭陰性菌的特點(diǎn)，又顯著增強(qiáng)了抗革蘭陽(yáng)性菌和非典型細(xì)胞內(nèi)病原體的作用，對(duì)近年來(lái)常檢出的軍團(tuán)菌、衣原體、支原體等均敏感，對(duì)厭氧菌也顯示出較強(qiáng)的抗菌活性，對(duì)結(jié)核桿菌也有一定效果［8］，臨床用于治療盆腔炎、宮頸炎取得了較好的療效［9］。

抗感染治療時(shí)，除了抗菌藥物的抗菌活性外，抗菌藥物的濃度與其抗菌療效密切相關(guān)［10］。相較于血藥濃度，抗菌藥物在感染部位的局部濃度與臨床療效的關(guān)系更為密切。目前對(duì)莫西沙星在肺組織的藥物濃度已作較多研究，王小均等［11］報(bào)道在支氣管黏膜中藥物濃度比血液中高2倍，錢嫣蓉等［12］研究顯示在肺泡上皮中濃度是血藥濃度的數(shù)十倍，在肺泡巨噬細(xì)胞中濃度可高達(dá)血藥濃度的數(shù)百倍，結(jié)果均證實(shí)莫西沙星在肺組織可達(dá)到很高的濃度，抗菌藥物在肺部的滲透強(qiáng)，臨床治療效果好。本研究采用HPLC分別檢測(cè)肺、腎臟、輸尿管、膀胱、子宮和卵巢輸卵管中莫西沙星的濃度，比較莫西沙星在泌尿生殖系統(tǒng)與肺組織的藥物濃度和藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)，為臨床用藥提供依據(jù)。

研究表明在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)莫西沙星在輸尿管的藥物濃度高于其他組織的藥物濃度。其中輸尿管組織中莫西沙星峰濃度為（26．68±7．42）μg／mL，藥時(shí)曲線下面積為（170．59±21．48）μg·h－1·mL－1，與肺組織中莫西沙星峰濃度（15．61±3．58）μg·mL－1和藥時(shí)曲線下面積（87．2±5．41）μg·h－1·mL－1相比，輸尿管中莫西沙星的峰濃度和藥時(shí)曲線下面積顯著升高（P＜0．05）。莫西沙星在輸尿管3．47h達(dá)到峰濃度，3．15h在肺組織達(dá)到峰濃度，可見輸尿管組織與肺組織的達(dá)峰時(shí)間相近。在24．00h內(nèi)藥物濃度隨時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸下降，但在輸尿管組織中維持較高的藥物濃度，在第1．00、3．00、8．00小時(shí)其平均藥物濃度分別是肺組織的1．34、1．72及1．6倍，莫西沙星各時(shí)間點(diǎn)在輸尿管中的平均藥物濃度明顯高于肺組織的平均藥物濃度，可能是其對(duì)泌尿系統(tǒng)感染具有良好治療效果的基礎(chǔ)。

卵巢輸卵管組織莫西沙星峰濃度和藥時(shí)曲線下面積分別為（16．18±4．21）μg／mL、（92．41±7．65）μg·h－1·mL－1，與肺組織中莫西沙星峰濃度和藥時(shí)曲線下面積相當(dāng)，卵巢輸卵管組織在第1．00、3．00、8．00小時(shí)其平均藥物濃度分別是肺組織的0．82、1．50及1．06倍，本研究的結(jié)果可以看出，莫西沙星口服吸收好，能夠快速、有效的滲透至卵巢輸卵管組織。輸卵管炎、輸卵管卵巢膿腫均歸屬為盆腔炎性疾病，根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)《盆腔炎癥性疾病診治規(guī)范（修訂版）》的推薦，靜脈給藥者應(yīng)在臨床癥狀性狀改善后繼續(xù)靜脈治療24．00h，然后轉(zhuǎn)為口服藥物治療，療程共14d。這種采用同一抗菌藥物的口服制劑替代注射劑繼續(xù)進(jìn)行治療的給藥方法即為抗菌藥物的序貫療法，使用序貫療法可縮短住院時(shí)間，降低治療費(fèi)用，減少靜脈注射所致的疼痛及其他危險(xiǎn)，增加患者的依從性。莫西沙星注射液說(shuō)明書推薦對(duì)復(fù)雜盆腔感染患者（如伴有輸卵管－卵巢或盆腔膿腫）治療時(shí)，需經(jīng)靜脈給藥，因此作者認(rèn)為在初始治療時(shí)宜選用莫西沙星注射液，在患者的癥狀體征緩解后應(yīng)及時(shí)轉(zhuǎn)為莫西沙星片口服給藥方案，且根據(jù)莫西沙星注射液說(shuō)明書，莫西沙星用于治療社區(qū)獲性肺炎和復(fù)雜腹腔感染均推薦序貫治療。采用序貫治療對(duì)選用的抗菌藥物有較高的藥代動(dòng)力學(xué)要求，包括口服吸收良好、體內(nèi)代謝少、半衰期長(zhǎng)且生物利用度接近注射劑等，本研究表明莫西沙星口服吸收良好，在盆腔組織的藥物濃度高，半衰期長(zhǎng)，生物利用度高，能夠滿足序貫療法對(duì)所選的抗菌藥物的藥代動(dòng)力學(xué)要求，是序貫療法治療泌尿道感染、盆腔炎的合理選擇。

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