彭銳等

[摘要] 目的 探討ABCB1的基因位點(diǎn)（C3435T）多態(tài)性與癲癇耐藥關(guān)聯(lián)性。 方法 計(jì)算機(jī)檢索Pubmed、Science direct、Wiley online library、Web of Science、中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)庫和維普中文科技期刊數(shù)據(jù)庫，納入抗癲癇藥耐藥與抗癲癇藥敏感的隨機(jī)對照試驗(yàn)，同時(shí)查閱檢索結(jié)果中所附相似文獻(xiàn)及參考文獻(xiàn)，檢索文獻(xiàn)均為建庫至2014年6月15日。由兩名評價(jià)員單獨(dú)進(jìn)行文獻(xiàn)篩選及資料提取，采用RevMan 5.0軟件進(jìn)行Meta分析及其他統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 共納入文獻(xiàn)10篇，癲癇患者中耐藥815例，敏感976例。Meta分析結(jié)果顯示，C3435T位點(diǎn)多態(tài)性在等位基因模型、顯性模型、隱性模型、共顯性模型（CC/TT組）下整體效應(yīng)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）：等位基因模型OR=0.79，95%CI（0.69，0.90），顯性基因模型OR=0.73，95%CI（0.58，0.92），隱性基因模型OR=0.73，95%CI（0.59，0.91），共顯性基因模型（CC/TT組）OR=0.64，95%CI（0.48，0.85）。地區(qū)亞組分析結(jié)果顯示，中國地區(qū)ABCB1 C3435T位點(diǎn)基因多態(tài)性與癲癇耐藥差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）；而印度地區(qū)ABCB1 C3435T位點(diǎn)基因多態(tài)性與癲癇耐藥在等位基因模型和隱性基因模型下整體效應(yīng)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）：等位基因模型OR=0.70，95%CI（0.54，0.93），隱性基因模型OR=0.72，95%CI（0.49，1.07）。 結(jié)論 ABCB1 C3435T位點(diǎn)基因多態(tài)性與中國地區(qū)癲癇耐藥無相關(guān)性，而在印度地區(qū)人口中與癲癇耐藥有相關(guān)性。

[關(guān)鍵詞] ABCB1；C3435T；基因多態(tài)性；Meta分析；耐藥

[中圖分類號] R742.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2015）01（b）-0069-05

[Abstract] Objective To investigate the association between C3435T site polymorphism of ABCB1 gene with antiepileptic drug resistant. Methods Computer was used to retrieve articles from the Pubmed， Science direct， Wiley online library， Web of Science，CNKI， CDDB database and VIP. The articles were searched and sorted out which were drug-resistant/drug-responsive study about the association between ABCB1 gene loci polymorphism with antiepileptic drug resistant， also combined with manually retrieving the references and similar results in the attached documents. The range of searching time was all from inception to June 15， 2014. Literature screening and data extracting were handled by two reviews independently. RevMan 5.0 software was used to conduct the Meta-analysis and other statistic analysis. Results 10 articles were included in the research. It showed that the total number of patients with drug-resistant were 815 cases， and the total number of patients with drug-responsive were 976 cases. While the Meta-analysis results showed that there existed significant correlations between ABCB1 C3435T loci polymorphism and antiepileptic drug resistant in the allele gene model， dominant gene model， recessive gene model and co-dominant gene model（CC/TT） （P < 0.05）： the allele gene model， OR=0.79， 95%CI （0.69， 0.90）； dominant gene model， OR=0.73， 95%CI （0.58， 0.92）； recessive gene model， OR=0.73， 95%CI （0.59， 0.91）； co-dominant gene model （CC/TT）， OR=0.64， 95%CI （0.48， 0.85）. The further regional subgroup analysis showed that there was significant relevance between ABCB1 C3435T loci polymorphism and antiepileptic drug resistant in India （P < 0.05）， but not in Chinese （P > 0.05）. In the allele gene model， OR=0.70， 95%CI （0.54， 0.93）； recessive gene model， OR=0.72， 95%CI （0.49， 1.07）. Conclusion ABCB1 C3435T loci polymorphism dose not relate to the antiepileptic drug resistant among Chinese； but ABCB1 C3435T loci polymorphism relates to the antiepileptic drug resistant among Indian.

[Key words] ABCB1； C3435T； Polymorphism； Meta-analysis； Resistant

癲癇是慢性反復(fù)發(fā)作性短暫腦功能失調(diào)綜合征，以腦神經(jīng)異常放電引起反復(fù)癇性發(fā)作為特征，是神經(jīng)系統(tǒng)常見疾病之一。研究人員對流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，國外癲癇發(fā)作率為3.3‰～7.8‰，年發(fā)病率為0.43‰～0.47‰。研究人員對國內(nèi)部分省份的流行病學(xué)調(diào)查表明，癲癇的年發(fā)病率為0.288‰，患病率為2.1‰～7.8‰，活動性癲癇的患病率為4.6‰[1-3]。目前，癲癇在神經(jīng)疾病中已成為第二大常見疾病，最常見的是腦血管病。

近幾十年，關(guān)于癲癇耐藥機(jī)制的研究，目前主要有兩種闡明機(jī)制，即“藥物靶點(diǎn)學(xué)說”和“多藥轉(zhuǎn)運(yùn)體學(xué)說”[4]。前者機(jī)制闡述了抗癲癇藥物（AEDs）主要通過影響Na+、Ca2+和K+等離子通道，GABA受體，谷氨酸受體等神經(jīng)遞質(zhì)受體或者與神經(jīng)遞質(zhì)釋放有關(guān)等方面發(fā)揮作用。一旦相應(yīng)靶點(diǎn)發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能改變，會引起該藥療效發(fā)生變化[5]。但是，臨床醫(yī)生經(jīng)常觀察發(fā)現(xiàn)一些患者對服用某種AED后，并沒有發(fā)揮良好的療效，而且對絕大多數(shù)AEDs均會表現(xiàn)出耐藥現(xiàn)象，并且這些AEDs的分子結(jié)構(gòu)和體內(nèi)作用機(jī)制不同，“藥物靶點(diǎn)學(xué)說”無法解釋這種情況。經(jīng)過更多的研究表明，“多藥轉(zhuǎn)運(yùn)體學(xué)說”或許是另外一種作用機(jī)制誘導(dǎo)癲癇患者對各種AEDs耐藥，學(xué)說闡述某些基因及其編碼蛋白產(chǎn)物可能與癲癇的耐藥性相關(guān)。

ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族（ATP binding cassette transporter super family）是一大類跨膜蛋白，其主要功能是利用ATP水解產(chǎn)生的能量將與其結(jié)合的底物包括化學(xué)物質(zhì)和藥物等主動泵出細(xì)胞外。ABC家族主要包括P-pg、乳腺癌耐藥蛋白等，均具有藥物排出泵的功能。藥物轉(zhuǎn)運(yùn)是給藥后個(gè)體差異及藥物相互作用的重要環(huán)節(jié)之一，也是導(dǎo)致多藥耐藥的因素。P-pg是人體內(nèi)重要的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，分布廣泛，參與多種內(nèi)（外）源性物質(zhì)的吸收、分布以及分泌排泄。P-pg是由人類ABCB1基因（也稱多耐藥基因MDRI）編碼的，已經(jīng)報(bào)道了ABCB1存在基因多態(tài)性，其中C1236T、G2677T/A和G3435T最大影響ABCB1基因表達(dá)和蛋白結(jié)合能力。近年來研究發(fā)現(xiàn)，ABCB1基因及其編碼的P-糖蛋白與癲癇多藥耐藥有關(guān)[6-8]。

1 資料與方法

1.1 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

符合如下標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)被納入：①主題為研究ABCB1基因C3435T位點(diǎn)多態(tài)性與癲癇耐藥性的關(guān)聯(lián)性；②研究類型為抗癲癇藥耐藥-抗癲癇藥敏感的隨機(jī)對照試驗(yàn)；③能提取完整ABCB1 C3435T位點(diǎn)多態(tài)性基因頻率；④如發(fā)現(xiàn)疑似重復(fù)發(fā)表或抄襲的文獻(xiàn)，核實(shí)后納入資料最為完整的一篇。以下情況文獻(xiàn)將被排除：①經(jīng)過多種途徑仍無法獲取全文或主要數(shù)據(jù)資料；②重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)。

1.2 檢索策略

計(jì)算機(jī)檢索Pubmed、Science direct、Wiley online library、Web of Science、中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)庫和維普中文科技期刊數(shù)據(jù)庫建庫至2014年6月15日公開發(fā)表的文獻(xiàn)，同時(shí)查閱檢索結(jié)果中所附相似文獻(xiàn)及參考文獻(xiàn)。英文檢索策略為：（“antiepileptic drug resistant”O(jiān)R “epilepsy”）AND （“ABCB1” OR “SNP3435” OR “C3435T”）；中文檢索為：（抗癲藥物耐藥 OR 癲癇）AND （ABCB1 OR SNP3435 OR C3435T基因多態(tài)性）。

1.3 文獻(xiàn)篩選

由兩名研究者按照上述納入與排除標(biāo)準(zhǔn)采用Note Express軟件獨(dú)立進(jìn)行篩選，并交叉核對，如有分歧則交與第三名研究者提供指導(dǎo)意見并商定。

1.4 資料提取

資料提取工作由兩名評議員獨(dú)立進(jìn)行，提取內(nèi)容包括：第一作者姓名、發(fā)表年份、研究國家、研究地區(qū)、研究人種、耐藥組-敏感組各基因型頻率、基因檢測方法及哈迪溫伯格平衡檢測P值。由第三名研究者核對數(shù)據(jù)并糾正可能存在的差錯(cuò)。

1.5 哈迪-溫伯格平衡檢測

如原文中未提供或未進(jìn)行哈迪-溫伯格遺傳平衡檢測，研究組利用常見的Excel軟件對哈迪-溫伯格平衡進(jìn)行分析，提取并分析其對應(yīng)檢測結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究利用常用的5種基因模型對ABCB1的基因位點(diǎn)（C3435T）多態(tài)性與癲癇耐藥進(jìn)行Meta分析；Meta分析采用RevMan 5.0軟件，計(jì)算其OR及95%可信區(qū)間（CI），繪制漏斗圖來判斷是否存在發(fā)表偏倚。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索及篩選結(jié)果

根據(jù)檢索策略，最初檢索出中英文文獻(xiàn)76篇，通過閱讀標(biāo)題、摘要及全文，最終篩選出10篇[9-18]研究納入Meta分析，其中，中文文獻(xiàn)4篇[9-12]，英文文獻(xiàn)6篇[13-18]，檢索及篩選流程見圖1。

2.2 資料提取結(jié)果

2.3 Meta分析

本文以C表示野生型基因，T表示突變型基因，選取5種主要的基因模型進(jìn)行Meta分析，分別為等位基因模型（C/T）、顯性模型（CC/CT+TT）、隱形模型（CC+CT/TT）、共顯性模型（CC/CT和CC/TT）以及超顯性模型（CC+TT/CT）。

2.3.1 ABCB1 C3435T基因位點(diǎn)的5種基因模型異質(zhì)性分析

固定效應(yīng)模型下，ABCB1 C3435T基因位點(diǎn)的5種基因模型結(jié)果的整體異質(zhì)性的定量定性值分別為：等位基因模型下I2=34%，P=0.14；顯性基因模型下I2=25%，P=0.22；隱形基因模型下I2=32%，P=0.16；共顯性基因模型下CC/CT I2=32%，P=0.16、CC/TT I2=26%，P=0.20；超顯性基因模型下I2=43%，P=0.13?？梢娝心Ｐ彤愘|(zhì)性較小，因此均可選用固定效應(yīng)模型?？紤]到種族和環(huán)境對基因多態(tài)性有一定的影響，本文以文獻(xiàn)所在地區(qū)對其進(jìn)行亞組分析。而土耳其、馬來西亞和日本分別僅有1篇文獻(xiàn)，無法判斷其異質(zhì)性。

2.3.2 ABCB1 C3435T基因位點(diǎn)的5種基因模型顯著性分析

3 討論

ABCB1基因存在多個(gè)單核苷酸多態(tài)性，其中最常見的是C1236T、G2677T/A和G3435T三個(gè)突變位點(diǎn)，本文分析了亞洲地區(qū)G3435T位點(diǎn)多態(tài)性和癲癇耐藥的關(guān)系，并沒涉及到其他地區(qū)一方面是文章不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，另一方面相關(guān)研究較少。ABCB1基因多態(tài)性是導(dǎo)致個(gè)體間藥物療效差異的主要原因，也是產(chǎn)生耐藥的主要原因，因?yàn)槠渚幋a蛋白P-pg在細(xì)胞中的過表達(dá)，致使細(xì)胞內(nèi)藥物轉(zhuǎn)運(yùn)出速率加快，藥物濃度降低，達(dá)不到治療效果，從而產(chǎn)生耐藥。

本次Meta分析的異質(zhì)性均較低，提示結(jié)果可信度很高。漏斗圖提示ABCB1 C3435T基因位點(diǎn)無發(fā)表偏倚。在等位基因模型、顯性模型、隱性模型、共顯性模型（CC/TT組）下，ABCB1 C3435T基因位點(diǎn)與癲癇耐藥有明顯相關(guān)性。印度北部和南部地區(qū)該基因位點(diǎn)在本研究中表現(xiàn)出明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性。雖然中國北方和南方地區(qū)在該基因位點(diǎn)研究的文獻(xiàn)分別有3篇[7，8，15]、2篇[6，9]，但是未表現(xiàn)出明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性，因此該基因位點(diǎn)突變與癲癇耐藥無關(guān)聯(lián)性。對于日本、土耳其和馬來西亞，因?yàn)榧{入的文獻(xiàn)只有1篇，不能提供有效的證據(jù)，代表性不強(qiáng)，因此不能認(rèn)為在這些國家人口中，ABCB1 C3435T位點(diǎn)多態(tài)性與癲癇耐藥的形成有關(guān)聯(lián)性。

本次研究雖然有嚴(yán)格的文獻(xiàn)檢索及納入標(biāo)準(zhǔn)，但仍存在一些不足：其一，由于目前還沒有一個(gè)專門針對基因多態(tài)性Meta分析的質(zhì)量評價(jià)清單，無法有效的評估納入研究的質(zhì)量；其二，部分地區(qū)的文獻(xiàn)數(shù)目過少，比如日本、土耳其和馬來西亞三個(gè)國家僅僅納入1篇相關(guān)文獻(xiàn)，且缺乏灰色文獻(xiàn)（如專題討論會記錄、未發(fā)表的資料、政府研究報(bào)告和其他非傳統(tǒng)文獻(xiàn)來源的證據(jù)），導(dǎo)致證據(jù)不足，這些對整體證據(jù)級別可能會產(chǎn)生一定負(fù)面影響。因此，尚需多中心、大樣本、高質(zhì)量的隨機(jī)對照研究來獲得更為可靠的結(jié)論，進(jìn)一步證實(shí)ABCB1 C3435T位點(diǎn)基因多態(tài)性與癲癇耐藥的關(guān)聯(lián)。

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（收稿日期：2014-09-02 本文編輯：程 銘）