王韻陽 張迪 董靜 蔣正堯 魯曉晴 王顏剛

[摘要] 目的 探討初診2型糖尿病患者血清betatrophin水平及其與胰島素抵抗水平的關(guān)系。 方法 選擇31例健康體檢者作為對照組，初診未經(jīng)治療的2型糖尿病患者35例作為初診T2DM組，采用ELISA法測定betatrophin含量，應(yīng)用穩(wěn)態(tài)模型評估法計算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）。 結(jié)果 B組betatrophin、游離脂肪酸、HOMA-IR、空腹血糖、空腹胰島素、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇高于A組（P<0.05）。 結(jié)論 胰島素抵抗導(dǎo)致初診2型糖尿病患者血清betatrophin水平升高。

[關(guān)鍵詞] 2型糖尿??；betatrophin蛋白；胰島素抵抗；甘油三酯；游離脂肪酸

[中圖分類號] R587.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701（2015）03-0004-03

代謝綜合征是一組臨床癥候群，以高血糖、血脂代謝異常、肥胖、高血壓聚集發(fā)病為特點，這些因素增加了動脈粥樣硬化性心臟病和2型糖尿?。═2DM）的發(fā)生風(fēng)險[1]。我國代謝綜合征患病率達(dá)9%～12%[2]。近期研究證實，一種由肝臟分泌的蛋白betatrophin（又名Lipasin、RIFL、ANGPTL8）具有調(diào)節(jié)血脂和血糖的雙重功能[3-8]。

Betatrophin基因主要在肝臟中表達(dá)[8]。在小鼠實驗中證實，攝食可刺激其表達(dá)增加[3]。小鼠敲除Betatrophin基因后，體內(nèi)脂蛋白脂肪酶（LPL）活性升高[7]，白色脂肪細(xì)胞出現(xiàn)脂肪酸攝取障礙[7]，血清甘油三酯（TG）水平降低[7，9]；而在betatrophin基因過表達(dá)小鼠中，血清甘油三酯水平大幅升高[3，6]。其可能機(jī)制為betatrophin間接抑制LPL[6]。

除參與脂代謝調(diào)節(jié)外，研究還證實betatrophin具有促進(jìn)胰島β細(xì)胞增殖的功能[8]。研究者向小鼠體內(nèi)注射胰島素受體拮抗劑，進(jìn)而誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞代償性增殖，在這一過程中觀察到肝臟表達(dá)betatrophin增加達(dá)17倍，8 d后胰島面積增加3倍，且動物糖耐量相應(yīng)增加。據(jù)此，研究者認(rèn)為betatrophin具有促胰島β細(xì)胞增殖作用[8]。本研究旨在探討T2DM患者血液中betatrophin含量，及其與血脂、胰島素抵抗水平、胰島功能及其他生化指標(biāo)間的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2013年8～10月，選擇青島大學(xué)附屬醫(yī)院門診初診的T2DM患者（根據(jù)1999年WHO診斷與分型標(biāo)準(zhǔn)確診）35例作為T2DM組，男18例，女17例，年齡42～65歲，平均（52.96±7.02）歲；尚未接受降糖或調(diào)脂治療，且近期無糖尿病急性并發(fā)癥。另選擇31例健康體檢者作為對照組，男16例，女15例，年齡37～78歲，平均（52.86±8.12）歲。以上兩組受試者均無嚴(yán)重感染及肝腎疾病，且近期未服用影響糖脂代謝的藥物。

1.2 檢測指標(biāo)及方法

1.2.1 生化指標(biāo)檢測 兩組受試者禁食8 h，次日清晨肘靜脈采空腹血，測定空腹血糖（FPG）、空腹胰島素（FINS）、血脂、糖化血紅蛋白（HbA1c）、TG、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）及游離脂肪酸（FFA），離心后取血清2 mL，置于-20℃冰箱保存。

1.2.2 血清betatrophin含量檢測 將置于-20℃冰箱保存血清復(fù)融后，采用ELISA法測定betatrophin含量，試劑盒購自武漢伊艾博公司，嚴(yán)格按照說明書操作。

1.2.3 胰島素抵抗評估 應(yīng)用穩(wěn)態(tài)模型評估法計算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR），HOMA-IR=FINS×FPG/22.5。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 16.0及PPMS 1.5統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理[10]，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，服從正態(tài)分布的變量組間比較采用t檢驗；非正態(tài)分布變量進(jìn)行對數(shù)變換，使之服從正態(tài)分布后進(jìn)行檢驗；應(yīng)用多元逐步回歸方法分析各變量與betatrophin水平的關(guān)系；P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組間各指標(biāo)比較結(jié)果見表1，兩組資料分別進(jìn)行多元逐步回歸分析，各變量均與betatrophin無顯著相關(guān)。

3 討論

動物實驗證實，胰島素抵抗會導(dǎo)致肝臟分泌betatrophin增加[8]，而高血糖本身并不會誘導(dǎo)betatrophin水平升高[11]。本研究中，兩組受試者BMI無差異，T2DM組的HOMA-IR及betatophin水平均顯著高于對照組，支持胰島素抵抗為導(dǎo)致betatrophin升高原因的觀點。但經(jīng)多元逐步回歸分析校正其他影響因素后，各組內(nèi)HOMA-IR與betatrophin并無顯著相關(guān)性，betatrophin與胰島素抵抗的關(guān)系仍有待進(jìn)一步證實。

Betatrophin可促進(jìn)胰島β細(xì)胞增殖，增加胰島素分泌，提高機(jī)體糖耐量[8]。Betatrophin缺乏可能導(dǎo)致胰島β細(xì)胞數(shù)量減少，進(jìn)而引起胰島素缺乏和高血糖。在本研究中，T2DM組血清betatrophin高于對照組，證明初診T2DM患者并不存在betatrophin缺乏。在1型糖尿病患者中，其betatrophin水平與健康人群相比無統(tǒng)計學(xué)差異[11]。雖然betatrophin與糖代謝關(guān)系密切，但尚未有betatrophin缺乏導(dǎo)致糖尿病的報道。另有研究現(xiàn)實，敲除betatrophin基因不影響小鼠血糖水平[7]，該蛋白在糖代謝中發(fā)揮的具體作用有待進(jìn)一步探究。

血脂代謝異常是2型糖尿病患者心血管疾病的危險因素之一，胰島素抵抗可導(dǎo)致血清甘油三酯水平升高[12，13]，故T2DM患者常合并高甘油三酯血癥[14]。除此以外，T2DM患者的血清FFA水平也高于健康人群，高FFA水平參與了胰島素抵抗的形成[15]及氧化應(yīng)激對血管內(nèi)皮的損傷[16]。除參與糖代謝外，betatrophin還參與TG及FFA的代謝。動物實驗中觀察到betatrophin抑制LPL，減少TG分解為FFA[3，6]，降低血清中FFA的水平[3]，減少FFA導(dǎo)致的氧化應(yīng)激，對機(jī)體起保護(hù)作用。本研究發(fā)現(xiàn)，初診T2DM患者血清betatrophin與FFA水平均升高。經(jīng)多元逐步回歸分析，未發(fā)現(xiàn)betatrophin與FFA相關(guān)，其在人體脂質(zhì)代謝中發(fā)揮的作用有待證實。從動物實驗得出的結(jié)論分析，對于2型糖尿病患者，增加betatrophin可從以下兩個方面保護(hù)機(jī)體：促進(jìn)胰島β細(xì)胞增殖，降低血糖；降低血清FFA，減輕FFA導(dǎo)致的氧化應(yīng)激，故應(yīng)用betatrophin治療糖尿病也成為研究熱點。但關(guān)于betatrophin治療作用的猜測均基于動物實驗，其在人體內(nèi)發(fā)揮的作用尚不明確。在本研究中，并未發(fā)現(xiàn)初診T2DM患者體內(nèi)betatrophin發(fā)揮增加胰島素水平或減少FFA的作用。Betatrophin是否真正使T2DM患者獲益，其在糖尿病及其并發(fā)癥發(fā)展中發(fā)揮怎樣的作用，這些問題仍需隊列研究深入探索。

總之，本研究初步探究了初診T2DM患者的血清betatrophin水平，及其與胰島素抵抗和甘油三酯代謝的關(guān)系。Betatrophin在糖脂代謝中的作用及機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Eckel RH，Grundy SM，Zimmet PZ. The metabolic syndrome[J]. The Lancet，2005，365（9468）： 1415-1428.

[2] WANG C，HOU X，BAO Y，et al. The metabolic syndrome increased risk of cardiovascular events in Chinese-A community based study[J]. International Journal of Cardiology，2010，139（2）：159-165.

[3] Zhang R. Lipasin，a novel nutritionally-regulated liver-enriched factor that regulates serum triglyceride levels[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications，2012，424（4）： 786-792.

[4] Fu Z，Yao F，Abou-samra AB，et al. Lipasin，thermoregulated in brown fat，is a novel but atypical member of the angiopoietin-like protein family[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications，2013，430（3）：1126-1131.

[5] Ren G，Kim JY，Smas CM. Identification of RIFL，a novel adipocyte-enriched insulin target gene with a role in lipid metabolism[J]. American Journal of Physiology-Endocrinology and Metabolism，2012，303（3）：E334-E351.

[6] Quagliarini F，Wang Y，Kozlitina J，et al. Atypical angiopoietin-like protein that regulates ANGPTL3[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences，2012，109（48）： 19751-19756.

[7] Wang Y，Quagliarini F，Gusarova V，et al. Mice lacking ANGPTL8（Betatrophin） manifest disrupted triglyceride metabolism without impaired glucose homeostasis[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences，2013，110（40）：16109-16114.

[8] Yi P，Park J-S，MeltonDA. Betatrophin：a hormone that controls pancreatic β cell proliferation[J]. Cell，2013，153（4）：747-758.

[9] Tang T，Li L，Tang J，et al. A mouse knockout library for secreted and transmembrane proteins[J]. Nature Biotechnology，2010，28（7）：749-755.

[10] 周曉彬，紀(jì)新強(qiáng)，徐莉. PPMS 1.5統(tǒng)計軟件的功能及其應(yīng)用[J]. 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2009，45（1）：91-93.

[11] ESPES D，LAU J，CARLSSON P-O. Increased circulating levels of betatrophin in individuals with long-standing type 1 diabetes[J]. Diabetologia，2014，57（1）：50-53.

[12] Biddinger SB，Hernandez-ono A，Rask-madsen C，et al. Hepatic insulin resistance is sufficient to produce dyslipidemia and susceptibility to atherosclerosis[J]. Cell Metabolism，2008，7（2）：125-134.

[13] Brown MS，Goldstein JL. Selective versus total insulin resistance：A pathogenic paradox[J]. Cell Metabolism，2008， 7（2）：95-96.

[14] Xu Y，Wang L，He J，et al. Prevalence and control of diabetes in Chinese adults[J]. Jama，2013，310（9）：948-959.

[15] Boden G，Shulman G. Free fatty acids in obesity and type 2 diabetes： defining their role in the development of insulin resistance and β-cell dysfunction[J]. European Journal of Clinical Investigation，2002，32（s3）：14-23.

[16] 劉翔宇，尹衛(wèi)東，唐朝克. 脂蛋白脂酶與糖尿病心肌病[J].生理科學(xué)進(jìn)展，2014，45（1）：16-20.

（收稿日期：2014-10-13）