何雄生 羅瑜 張遠華 肖俊強 黃獻民 楊君 鄧有生

紫桃傷科軟膏的薄層色譜鑒別研究

何雄生 羅瑜 張遠華 肖俊強 黃獻民 楊君 鄧有生

采用薄層色譜法對軟膏中的紫草﹑大黃﹑紅花進行定性鑒別, 發(fā)現(xiàn)處方中的紫草﹑大黃﹑紅花3味藥的薄層色譜具有鑒別特征。研究顯示薄層色譜鑒別方法穩(wěn)定可控, 可用于紫桃傷科軟膏的質(zhì)量控制, 為制定其質(zhì)量控制提供試驗依據(jù)。

紫桃傷科軟膏；薄層色譜；紫草；大黃；紅花

紫桃傷科軟膏為本院的名中醫(yī)黃獻民研制的處方, 是骨傷科常用的外用制劑, 由紫草﹑桃仁﹑大黃﹑紅花﹑冰片5味中藥組成, 具有化腐生肌﹑活血解毒﹑消腫止痛的功效。用于治療皮膚擦挫傷, 閉合性骨折﹑脫位, 軟組織挫傷。為了有效地控制軟膏質(zhì)量, 通過參照藥典及相關(guān)文獻報道, 本研究對處方中的紫草﹑大黃和紅花進行薄層色譜鑒別。現(xiàn)報告如下。

1 實驗材料

1.1 試藥 紫桃傷科軟膏(韶關(guān)市中醫(yī)院制劑室, 批號：141012)；陰性軟膏樣品(韶關(guān)市中醫(yī)院制劑室自制, 按處方比例, 除去被檢藥材配制而成)；左旋紫草素對照品﹑大黃對照藥材﹑紅花對照藥材(均購自中國藥品生物制品檢定所)；硅膠G板(青島海洋化工廠)；所用試劑均為AR級。

1.2 儀器 紫外光燈(型號：ZF-2型)；數(shù)顯電熱恒溫水浴鍋(型號：DK-S22型)；數(shù)控超聲波清洗器(型號：KQ5200DE型)；電子分析天平(型號：TG328AS型)。

2 定性鑒別

2.1 紫草的鑒別［1-4］取紫桃傷科軟膏10 g, 加石油醚(60～90℃)80 ml使溶解, 用2%氫氧化鈉溶液振搖提取2次, 40 ml/次, 合并提取液, 滴加鹽酸使液面浮有紅色油狀物, 加入80 ml乙醚振搖﹑提取, 靜置﹑分離出乙醚液, 自然揮干,加入1 ml無水乙醇使其殘渣溶解, 作為供試品溶液。取缺紫草的陰性紫桃傷科軟膏10 g, 按供試品的制備方法同法制成陰性對照溶液。取左旋紫草素對照品, 加無水乙醇制成每1毫升中含0.1 mg的溶液, 作為對照品溶液。按照2010年版《中華人民共和國藥典》(一部)收載的薄層色譜法進行試驗, 吸取上述溶液各5 μl, 分別點于同一硅膠G薄層板上, 以環(huán)己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:5:1:0.5)為展開劑, 展開后取出晾干。供試品色譜中在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上, 顯相同的紅色斑點；陰性對照色譜中無干擾。見圖1。

圖1 紫草的薄層色譜圖

2.2 大黃的薄層色譜鑒別［5-9］取紫桃傷科軟膏10 g, 加甲醇50 ml, 攪勻, 加熱回流1 h, 密塞, 冷藏4 h后, 過濾, 濾液加入鹽酸10 ml, 置水浴中加熱30 min, 放置冷卻, 再加乙酸乙酯提取2次, 20 ml/次, 合并乙酸乙酯液, 水浴蒸發(fā)﹑揮發(fā)至約1 ml, 作為供試品溶液；取大黃對照藥材粗粉1 g, 同法制備對照藥材溶液；取缺大黃的陰性軟膏10 g, 同法制成陰性對照溶液。按照2010年版《中華人民共和國藥典》(一部)附錄的薄層色譜方法試驗, 吸取上述溶液各10 μl, 分別點于同一硅膠G薄層板上, 以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30:10:0.5)上層溶液為展開劑, 展開后取出晾干。置氨蒸汽中熏后, 供試品色譜中, 在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上, 顯相同顏色的斑點；陰性對照色譜中無相應(yīng)特征斑點。見圖2。

2.3 紅花的薄層色譜鑒別［10］取紫桃傷科軟膏10 g, 加入30 ml甲醇回流提取1 h, 過濾, 濾液置水浴上蒸干, 加適量水溶解殘渣, 用水飽和的正丁醇振搖提取2次, 30 ml/次, 合并2次正丁醇提取液, 水浴上再蒸干, 加入1 ml甲醇使殘渣溶解, 離心, 分取上清液作為供試品。取紅花對照藥材1.0 g, 加水100 ml煎煮1 h, 趁熱濾過, 濾液濃縮至20 ml, 加入乙醇20 ml并搖勻, 使沉淀后, 濾過, 濾液蒸干, 殘渣加入1 ml甲醇使其溶解, 離心, 分取上清液作為對照藥材溶液；取缺紅花的陰性軟膏10 g同法制成陰性對照藥材溶液。按照薄層色譜法試驗［2010年版《中華人民共和國藥典》(一部)附錄ⅥB］,吸取上述溶液各5 μl, 點于同一硅膠G薄層板上, 以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇(7:2:3:0.4)上層溶液為展開劑, 展開后取出晾干。供試品色譜中, 在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點。陰性樣品無干擾。見圖3。

圖2 大黃的薄層鑒別色譜

圖3 紅花的薄層色譜

3 小結(jié)

3.1 薄層色譜法TLC是較早應(yīng)用于中藥快速分離和定性分析。由于其操作簡便﹑色譜結(jié)果直觀, 而相關(guān)的檢驗設(shè)備價格低廉, 特別適用于醫(yī)院制劑的質(zhì)量控制。

3.2 為全面提高紫桃傷科軟膏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn), 本研究使用了陰性對照試驗, 制定紫草﹑大黃﹑紅花的薄層色譜鑒別方法。通過試驗表明, 需檢測的成分不受處方中其他藥材的干擾,色譜斑點清晰, 專屬性較強, 均獲得了良好的鑒別效果。研究過程中通過探索多種樣品前處理方法, 并對多種色譜系統(tǒng)進行選擇比較, 最終確定了文中所述的試驗方法, 可作為紫桃傷科軟膏制劑的有效定性鑒別方法。

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Research of thin-layer chromatography for Zitaoshangke ointment

HE Xiong-sheng, LUO Yu, ZHANG Yuan-hua, et al. Shaoguan City Hospital of Traditional Chinese Medicine, Shaoguan 512000, China

Qualitative identification of lithospermum, rheum officinale and flowers carthami in Zitaoshangke ointment was taken by thin-layer chromatography, which showed identifying characteristics in thinlayer chromatography of lithospermum, rheum officinale and flowers carthami in Zitaoshangke. Research showed that thin-layer chromatography was stable and feasible, and application of this method was suitable for providing experimental reference for quality control group Zitaoshangke ointment.

Zitaoshangke ointment; Thin-layer chromatography; Lithospermum; Rheum officinale; Flowers carthami

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.23.219

2015-08-06］

512000 韶關(guān)市中醫(yī)院