張艷霞，馬東華，孫冬霞，李軍澎，駱向利，石曉鵬

(1. 河北省邯鄲市婦幼保健院,河北 邯鄲 056301；2. 河北省大名縣婦幼保健院,河北 大名 056000；3. 河北省涉縣婦幼保健院，河北 涉縣 056400；4. 河北省曲周縣婦幼保健院，河北 曲周 057250；5. 河北省武安市第一人民醫(yī)院，河北 武安 056300)

乳腺癌分子分型與新輔助化療前后GST-π和Topo-Ⅱ表達(dá)的相關(guān)性研究

張艷霞1，馬東華2，孫冬霞1，李軍澎3，駱向利4，石曉鵬5

(1. 河北省邯鄲市婦幼保健院,河北 邯鄲 056301；2. 河北省大名縣婦幼保健院,河北 大名 056000；3. 河北省涉縣婦幼保健院，河北 涉縣 056400；4. 河北省曲周縣婦幼保健院，河北 曲周 057250；5. 河北省武安市第一人民醫(yī)院，河北 武安 056300)

目的 探討乳腺癌不同分子分型與新輔助化療前后GST-π和Topo-Ⅱ表達(dá)的相關(guān)性。方法 對(duì)155例乳腺癌患者進(jìn)行分子分型，采用免疫組織化學(xué)EnVison二步法檢測(cè)不同分型患者GST-π和Topo-Ⅱ表達(dá)情況,并結(jié)合病理特點(diǎn)進(jìn)行分析。結(jié)果HER2過表達(dá)型及Basal-like型GST-π表達(dá)率高于LuminalA型和LuminalB型(P均<0.05)。HER2過表達(dá)型及Basal-like型Topo-Ⅱ表達(dá)率低于LuminalA型和LuminalB型,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。不同分型患者GST-π表達(dá)情況與患者新輔助化療療效之間無明顯相關(guān)性(P>0.05)，不同分型患者Topo-Ⅱ表達(dá)情況與新輔助化療療效有關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 乳腺癌中GST-π的表達(dá)情況與化療藥物作用無明顯相關(guān)性，而Topo-Ⅱ表達(dá)量的高低與化療藥物作用成正相關(guān)性，Topo-Ⅱ的表達(dá)有助于判斷乳腺癌的預(yù)后及為用藥提供選擇依據(jù)。

乳腺癌；分子分型；新輔助化療；免疫組化

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率居女性惡性腫瘤第一位[1]。目前新輔助化療作為局部晚期乳腺癌的首選治療方法，使手術(shù)的適應(yīng)證越來越寬。有研究報(bào)道，乳腺癌新輔助化療的病理完全緩解率為4%～34%[2-3]。但是，多藥耐藥(Multidrug resistance,MDR) 是臨床腫瘤化療中常常遇到的難題，導(dǎo)致患者生存期縮短，是化療方案無效的主要原因。為尋找反映化療效果的生物學(xué)標(biāo)志物，指導(dǎo)臨床選擇個(gè)體化的治療方案，新輔助化療可以作為療效的預(yù)測(cè)模型來指導(dǎo)。谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶-π(GST-π) 是腫瘤及組織細(xì)胞中最常見的同工酶, 能夠催化機(jī)體內(nèi)谷胱甘肽與親電性化合物結(jié)合，使有毒化合物的水溶性增加，加速毒性排出體外[4], 從而增加GST-π活性的代謝而產(chǎn)生耐藥性。拓?fù)洚悩?gòu)酶-Ⅱ(Topo-Ⅱ)在多種抗腫瘤藥中起靶點(diǎn)作用，由于它位于染色體17q21,在DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄以及染色體分離中起著至關(guān)重要的作用[5]。臨床研究發(fā)現(xiàn), Topo-Ⅱ可能成為預(yù)測(cè)蒽環(huán)類化療藥療效的有效指標(biāo)[6]。目前研究發(fā)現(xiàn)不同分子分型的乳腺癌患者對(duì)化療敏感程度不同，其治療已經(jīng)進(jìn)入個(gè)體化的治療時(shí)代。本研究采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)新輔助化療前后不同分子分型乳腺癌患者病理組織中GST-π和Topo-Ⅱ多種耐藥基因蛋白表達(dá)情況, 探討GST-π和Topo-Ⅱ表達(dá)與新輔助化療療效間的關(guān)系，旨在為臨床治療方案選擇提供參考。

1 臨床資料

1.1一般資料 選取2008年1月—2013年12月在邯鄲市婦幼保健院治療的155例女性乳腺癌患者，均自愿按照新輔助化療方案治療, 患者對(duì)用藥情況知情同意。治療前均做雙乳彩超及X射線檢查，明確腫瘤的最大徑，均行粗針穿刺，并明確病理診斷及做免疫組化；治療后，取手術(shù)切除的病理標(biāo)本再次確定腫瘤的大小及免疫組化?；颊吣挲g33～72歲，中位年齡53歲；病理診斷均為浸潤性導(dǎo)管癌，其中T2期60例，T3期71例，T4期24例; 采用2013年St Gallen最新乳腺癌分子分型方法[7]：LuminalA型42例，Luminal B型43例，HER-2過表達(dá)型38例,Basal-like型32例。

1.2 新輔助化療方案 采用FEC方案:在第1天、第8天靜脈注射400 mg/m2環(huán)磷酰胺、表柔比星50 mg/m2、氟尿嘧啶500 mg/m2，28 d為1個(gè)周期，治療4個(gè)周期后休息2個(gè)周期再行手術(shù)治療，化療期間可給予支持、對(duì)癥治療，治療方案可根據(jù)患者實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。

1.3 觀察指標(biāo) 化療前后采用免疫組織化學(xué)EnVison二步法檢測(cè)不同分型患者GST-π和Topo-Ⅱ表達(dá)情況。免疫組化試劑盒購自北京中衫生物技術(shù)開發(fā)有限公司， GST-π和Topo-Ⅱ多抗均為中衫公司提供的工作液;采用中衫公司提供的乳腺癌免疫組化預(yù)實(shí)驗(yàn)陽性片作為陽性對(duì)照結(jié)果。操作過程按試劑盒說明書進(jìn)行。化療前及化療后結(jié)果均由2位有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師在單盲的情況下評(píng)定。GST-π的表達(dá)多位于細(xì)胞漿,Topo-Ⅱ位于細(xì)胞核。陽性判定標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞核為清晰的黃色或棕黃色彌漫性染色，細(xì)胞漿為黃色或棕黃色。根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)及著色強(qiáng)度分為4個(gè)等級(jí)，分別為(-)(±)(+)()，其中(-)(±)判定為陰性，(+)()判定為陽性。

1.4 化療療效判定標(biāo)準(zhǔn) 完全緩解：化療后腫瘤病灶完全消失；部分緩解：腫瘤大小減少50%或增加<25%；無變化：腫瘤大小減少<50%或增加<25%；進(jìn)展(PD)：腫瘤大小增加>25%或出現(xiàn)新病灶。其中完全緩解和部分緩解為有效，無變化和進(jìn)展為無效。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,組間比較采用2檢驗(yàn), 采用Spearman檢驗(yàn)進(jìn)行相關(guān)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1乳腺癌組織中GST-π、Topo-Ⅱ表達(dá)情況 乳腺癌組織中GST-π和Topo-Ⅱ染色陽性表達(dá)率分別為42.6%(66/155)、40.6%(63/155)。

2.2 不同分子分型患者乳腺癌組織中GST-π和Topo-Ⅱ表達(dá)情況 HER2過表達(dá)型及Basal-like型中GST-π陽性表達(dá)率高于Luminal A型和Luminal B型(P均<0.05)；Topo-Ⅱ陽性率低于Luminal A型和Luminal B型,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 化療前不同分子分型患者乳腺癌組織中GST-π、Topo-Ⅱ表達(dá)情況 例(%)

注：①與Luminal A型和Luminal B型比較，P<0.05。

2.3 化療前不同GSP-π和Topo-Ⅱ表達(dá)情況患者的化療效果 Topo-Ⅱ表達(dá)陽性有效率高于表達(dá)陰性的(P<0.05)；GST-π表達(dá)陽性的有效率與表達(dá)陰性的有效率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 化療前不同GSP-π和Topo-Ⅱ表達(dá)患者的化療效果 例(%)

注：①與Topo-Ⅱ表達(dá)陰性比較，P<0.05。

2.4 不同分子分型患者GST-π和Topo-Ⅱ表達(dá)情況化療效果 不同分子分型間Topo-Ⅱ表達(dá)陽性的有效率高于表達(dá)陰性的(P<0.05)，而不同分子分型間GST-π表達(dá)陽性有效率與陰性有效率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

2.5 化療后不同GST-π和Topo-Ⅱ表達(dá)改變情況療效比較 患者化療前后GST-π表達(dá)情況比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且化療前后GST-π表達(dá)的改變與化療療效也無相關(guān)性(P>0.05)；Topo-Ⅱ表達(dá)由陽性轉(zhuǎn)陰性的有效率最高，Topo-Ⅱ表達(dá)由陰性轉(zhuǎn)陽的有效率最低(P<0.05)。見表4。

表3 不同分子分型患者GST-π和TOPⅡ表達(dá)情況化療效果 例(%)

注：①與同型表達(dá)陰性比較，P<0.05。

表4 化療后GST-π和Topo-Ⅱ表達(dá)改變情況化療效果 例(%)

注：①與陽轉(zhuǎn)陰比較，P<0.05。

3 討 論

近年來，隨著病理學(xué)研究的發(fā)展，人類在乳腺癌的治療方面取得了巨大的成功，在其手段和策略方面也發(fā)生了重大的轉(zhuǎn)變，但在標(biāo)志腫瘤生物學(xué)行為方面和對(duì)臨床治療提供指導(dǎo)性作用的組織學(xué)分類方法方面，沿用先前的組織學(xué)分類和解剖學(xué)分期已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床診治需求[8]，而正確評(píng)價(jià)和預(yù)測(cè)療效和疾病轉(zhuǎn)歸將成為重要的研究內(nèi)容。2000年P(guān)erou等[9]利用cDNA 芯片檢測(cè)技術(shù)對(duì)乳腺癌進(jìn)行了分子分型，經(jīng)不斷研究證明，這種分型是正確的，并且這種分子檢測(cè)要比傳統(tǒng)的組織病理能更好指導(dǎo)乳腺癌的臨床治療[10-11]。

新輔助化療是一種術(shù)前先進(jìn)行化療再手術(shù)的新方法，這樣可以提高乳腺癌患者的緩解率，提高保乳概率，可使手術(shù)切除范圍縮小，改善患者術(shù)后的生活質(zhì)量，同時(shí)可以尋找預(yù)測(cè)化療療效的生物標(biāo)記物[12-13]。而Rocque等[14]研究表明個(gè)體化治療要依據(jù)乳腺癌的分子分型。在乳腺癌患者的分子分型中，Luminal A型的內(nèi)分泌治療療效明顯好于Luminal B型。由于Luminal B型的HER-2表達(dá)陽性, 對(duì)他莫昔芬的反應(yīng)性低于Luminal A型,而用其他的內(nèi)分泌治療仍有效果。HER-2過表達(dá)型由于激素受體表達(dá)陰性,一般內(nèi)分泌治療沒有明顯療效,但患者的化療療效好,并且適用于赫塞汀靶向治療。Basal-like型乳腺癌易發(fā)生局部及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,且組織學(xué)類型多為Ⅲ級(jí)[15]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GST-π和Topo-Ⅱ在化療前陽性表達(dá)率分別為42.6% 和40.6%,與文獻(xiàn)[16]相一致；按分型分類進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)HER2過表達(dá)型及Basal-like型中GST-π陽性率高于Luminal A型和Luminal B型(P<0.05)，Topo-Ⅱ陽性率低于Luminal A型和Luminal B型,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與岳玉函等[17]研究結(jié)果相一致；另外Topo-Ⅱ表達(dá)陽性的有效率高于表達(dá)陰性的， GST-π表達(dá)陽性的有效率與表達(dá)陰性的有效率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；不同分子分型間Topo-Ⅱ表達(dá)陽性的有效率高于表達(dá)陰性的，而不同分子分型間GST-π表達(dá)陽性有效率與陰性有效率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；患者化療前后GST-π表達(dá)情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且化療前后GST-π表達(dá)的改變與化療療效也無相關(guān)性； Topo-Ⅱ表達(dá)由陽性轉(zhuǎn)陰性的有效率最高，Topo-Ⅱ表達(dá)由陰性轉(zhuǎn)陽的有效率最低(P<0.05)。提示GST-π、Topo-Ⅱ可能與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展有一定的關(guān)系,GST-π、Topo-Ⅱ的表達(dá)可能對(duì)判斷不同類型乳腺癌預(yù)后以及在用藥選擇方面提供有利的依據(jù)。

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Research on the correlation of breast cancer molecular classification with the expression of GST-π and Topo-Ⅱ before and after neoadjuvant chemotherapy

ZHANG Yanxia1, MA Donghua2, SUN Dongxia1, LI Junpeng3, LUO Xiangli4, SHI Xiaopeng5

(1.Maternal and Child Health-Care Hospital of Handan, Handan 056301, Hebei, China; 2.Maternal and Child Health-Care Hospital of Daming, Daming 056000, Hebei, China; 3.Maternal and Child Health-Care Hospital of Shexian, Shexian 056400, Hebei, China; 4.Maternal and Child Health-Care Hospital of Quzhou, Quzhou 057250, Hebei, China; 5.The First People’s Hospital of Wuan, Wuan 056300, Hebei, China)

Objective It is to investigate the correlation of breast cancer molecular classification with the expression of GST-π and Topo-Ⅱbefore and after neoadjuvant chemotherapy. Methods 155 patients with breast cancer were selected to carry on the molecular classification, the expression of GST-π and Topo-Ⅱwere detected by using immunohistochemical detection EnVison ldpe-g-nvp in patients with different parting, and the data were analyzed combining the pathological features. Results The expression of GST-π in HER2 expression type and Basal-like type was higher than LuminalA and LuminalB type (allP<0.05). The expression of Topo-Ⅱ in HER2 expression type and Basal-like type was lower than LuminalA and LuminalB type, but there was no significant difference (allP>0.05). There was no significant correlation between the expression of GST-π in patients with different parting and neoadjuvant chemotherapy curative effect (P>0.05), but the Topo-II expression in different classification was related to the curative effect of neoadjuvant chemotherapy in patients with difference parting (P<0.05). Conclusion The expression of GST-π in breast cancer has no significant correlation with neoadjuvant chemotherapy curative effect, but the Topo-Ⅱ expression in different classification is related to the curative effect of neoadjuvant chemotherapy in patients with difference parting. The expression of Topo-Ⅱ can help to judge the prognosis of breast cancer and provide basis for the selection of drug.

breast cancer; molecular classification; neoadjuvant chemotherapy; immunohistochemical

張艷霞，女，主治醫(yī)師，主要從事乳腺外科工作。

石曉鵬，E-mail：shixiaopengxing@163.com

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.24.007

R737.9

A

1008-8849(2015)24-2643-04

2015-02-10