童平珍

貴陽中醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院病理科，貴州貴陽 550001

血清SIL-2R、IL-8和TNF水平在輪狀病毒（RV）腸炎發(fā)病中的作用機制研究

童平珍

貴陽中醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院病理科，貴州貴陽 550001

目的了解血清SIL-2R、IL-8和TNF水平在輪狀病毒（RV）腸炎發(fā)病中的作用機制。方法隨機擇取該院2012年3月—2014年3月收治的50例RV腸炎患兒為實驗組，并選擇同期來該院體查的50例健康體檢者為對照組，應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法，對兩組血清中SIL-2R、IL-8及TNF-A水平進行檢測，觀察兩組各個指標變化情況。結(jié)果實驗組RV腸炎患兒在急性期血清中SIL-2R、TNF-A、IL-8水平 （45.23±11.23）pg/mL，（122.23±6.75）pg/mL，（526.43±12.54）pg/mL明顯高于正常對照組（28.64±9.62）pg/mL，（68.12±5.46）pg/mL，（197.32±14.24）pg/mL，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與對照組比較，輕癥組、中癥組、重癥組RV腸炎患兒血清IL-8、SIL-2R及TNF-A水平亦呈增高趨勢，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示三者與病情輕重具有關(guān)聯(lián)性。結(jié)論血清IL-8、SIL-2R、TNF-A在輪狀病毒感染免疫防御與免疫損傷機制中具有重要的引導(dǎo)作用，臨床上應(yīng)引起足夠重視。

血清SIL-2R；IL-8；TNF；輪狀病毒；腸炎；作用機制

據(jù)流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)，輪狀病毒屬于嬰幼兒流行性腹瀉的關(guān)鍵病原，目前RV腸炎發(fā)病免疫機制尚未完全明確，腫瘤壞死因子與白細胞介素屬于體內(nèi)關(guān)鍵的促炎癥介質(zhì)與免疫調(diào)節(jié)因子[1-2]?，F(xiàn)階段，國內(nèi)外對顯現(xiàn)RV感染后血清中IL、TNF水平變化情況的報道相對較少[3]。為了深入探究血清SIL-2R、IL-8和TNF水平在輪狀病毒（RV）腸炎發(fā)病中的作用機制，該文主要對該院2012年3月—2014年3月收治的50例RV腸炎患兒進行平行對照研究，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機擇取該院2012年3月—2014年3月收治的RV腸炎患兒50例為實驗組，符合《實用兒科學》（第7版）中的有關(guān)臨床診斷標準[2]，糞便輪狀病毒ELISA試驗呈陽性，無嚴重肺、心、肝等疾病，其中男性30例，女性20例，年齡6～30個月，平均年齡在(21.36±2.12)個月；在病情嚴重程度上，其中輕癥者20例，中癥者17例，重癥者13例。并選擇同期來該院體查的50例健康體檢者為對照組，其中男性32例，女性18例，年齡8～30個月，平均年齡在(23.06±2.34)個月。兩組患者一般資料對比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 一般方法

抽取所有試驗對象3mL外周靜脈血，按照2000轉(zhuǎn)/min的速度離心10 min后留取上層血清，并置入EP管（2 m L）中，于－20℃環(huán)境下貯存?zhèn)錅y。于試驗前1 d，于－4℃環(huán)境下存儲標本，確保室溫平衡。待標本檢測前期工作完畢后，采用SIEMENS IMMULITE 2000型自動發(fā)光免疫分析儀及其藥盒（美國德普公司）,應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法,參照藥盒說明書，由專業(yè)人員對兩組進行檢測。

1.3 觀察指標

觀察兩組患兒血清中SIL-2R、IL-8及TNF-A水平變化情況。

1.4 統(tǒng)計方法

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件對上述資料進行數(shù)據(jù)分析，計量資料采用均數(shù)±標準差（x±s）表示，進行t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 RV腸炎患兒與正常人群SIL-2R、IL-8、TNF-A水平比較

與對照組比較，實驗組SIL-2R(45.23±11.23)pg/mL、IL-8(526.43± 12.54)pg/mL、TNF-A(122.23±6.75)pg/m L水平明顯上升，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），表明三者在RV腸炎發(fā)病過程中具有參與作用，見表1。

表1 RV腸炎患兒與正常人群血清IL-8、SIL-2R及TNF-A水平比較[（x±s），pg/m L]

2.2 三組不同程度RV腸炎患兒對正常人群血清IL-8、SIL-2R及TNF-A水平比較

與對照組比較，輕癥組、中癥組、重癥組 RV腸炎患兒血清IL-8、SIL-2R及TNF-A水平亦呈增高趨勢，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示三者與病情輕重具有關(guān)聯(lián)性，見表2。

表2 三組不同程度RV腸炎與對照組血清IL-8、SIL-2R及TNF-A水平比較[（x±s），pg/m L]

3 討論

據(jù)有關(guān)研究資料顯示，積極控制與預(yù)防RV感染取決于其發(fā)病機制的系統(tǒng)研究,但現(xiàn)階段其發(fā)病免疫機制尚未完全清晰。RV侵犯的細胞多為腸絨毛上皮細胞，但腸上皮集合淋巴結(jié)中多為T淋巴細胞，而B淋巴細胞約占10%左右，其形成的抗體取決于T淋巴細胞系統(tǒng)調(diào)控，故在腸道抗病毒中細胞免疫的作用研究顯得尤為重要[4-5]。

據(jù)有關(guān)研究提示，RV侵犯部位多屬于T淋巴細胞,，而Th細胞是形成TNF-A等細胞因子的關(guān)鍵細胞[6-7]。當繼發(fā)RV感染后，易激活Th細胞，進而分泌大量的TNF-A。在體內(nèi)，此類細胞因子具有一定的免疫保護作用，可誘導(dǎo)機體抗感染能力上升。此外，此二者屬于致炎因子,可誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞、單核巨噬細胞、T細胞分泌大量的IL-8、IL-2等炎性介質(zhì)，引起中性粒細胞趨化,進而形成粘膜水腫與血管損傷,提升通透性[8]。SIL-2R作為m IL-2R（細胞膜上白介素2受體）脫落流入體液內(nèi)的一種產(chǎn)物，目前已成為了細胞免疫敏感性、定量性指標。

該研究結(jié)果提示，于RV腸炎患兒急性期，其血清中SIL-2R含量逐漸升高,從（43.02±12.12）pg/mL上升至（45.13±10.34）pg/mL再上升至（48.32±11.42）pg/mL，觀察上升范圍與病情分組，可發(fā)現(xiàn)上升范圍與病情輕重具有明顯關(guān)聯(lián)，多因RV感染后導(dǎo)致免疫細胞被激活，進而釋放大量SIL-2R，提示RV腸炎急性期易激活細胞免疫,推測SIL-2R可作為RV疫苗接種后細胞免疫檢測的輔助性指標[9-10]。

IL-8屬于白細胞趨化因子,經(jīng)多種細胞活化后可分泌，對T淋巴細胞、中性粒細胞、嗜堿性粒細胞具有激活作用，并可誘導(dǎo)其浸潤至炎癥局部，進而釋放大量的炎癥介質(zhì),誘發(fā)炎癥反應(yīng)，引起小腸上皮細胞壞死與脫落[11]。待出現(xiàn)廣泛性損害后，極其容易減少腸吸收面積與絨毛上皮分泌雙糖酶，進而引起糖吸收障礙,導(dǎo)致腸腔內(nèi)滲透壓急劇升高,最終形成水樣瀉大便。見文中數(shù)據(jù)，健康的對照組IL-8水平在200 pg/mL之下，而患有腸炎的輕中重三組則均在500 pg/mL之上，且癥狀越嚴重，IL-8水平越高，因此，可推斷出IL-8水平與病情輕重具有明顯關(guān)聯(lián)。

而TNF-A多由單核巨噬細胞形成,較IL-8炎癥介質(zhì)而言，其組織損傷功能相似。見文中數(shù)據(jù)，健康的對照組TNF-A水平在100 pg/mL之下，而患有腸炎的輕中重3組則均在100 pg/m L之上，且癥狀越嚴重，TNF-A水平越高。除了驗證了TNF-A水平與病情輕重的必然聯(lián)系，也證明了TNF-A具有抗病毒作用，TNF-A升高時為了遏制病毒對身體的侵害，病情越重，則有越多TNF-A進行疾病抵抗。

結(jié)合該研究結(jié)果與楊志紅[12]所著《炎癥性腸病的病因?qū)W和藥物治療研究進展》可以發(fā)現(xiàn)，于RV腸炎患兒急性期，其血清中TNF-A、IL-8呈升高態(tài)勢,提示二者在RV腸炎發(fā)病過程中具有參與作用，且與病情輕重具有關(guān)聯(lián)性。目前，臨床諸多研究資料提示，在RV發(fā)病中，IL-8的作用主要體現(xiàn)在兩個方面：①于RV感染后，可誘導(dǎo)中性粒細胞、腸粘膜淋巴細胞浸潤；②趨化RV感染后，可誘導(dǎo)形成的RV特異性細胞毒T細胞最大限度地發(fā)揮自身效應(yīng)器功能[13-14]。從整體角度而言，TNF-A、IL-8在RV感染中具有一定的促炎作用，而非抗病毒作用。這同時，SIL-2R亦在RV腸炎免疫病理過程中具有引導(dǎo)作用，三者的變化提示著嬰幼兒RV腸炎伴有免疫失衡現(xiàn)象,為今后調(diào)節(jié)失衡提供了可參考依據(jù)[15]。

綜上所述，在輪狀病毒感染免疫防御與免疫損傷機制中，血清IL-8、SIL-2R、TNF-A具有重要的引導(dǎo)作用，值得臨床借鑒。

[1]張勝,周濤,付四毛,等.輪狀病毒腸炎伴良性驚厥患兒血清及腦脊液白介素檢測意義分析[J].中國全科醫(yī)學,2010,13（32）:3612-3614.

[2]胡亞美.實用兒科學[M].7版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2012：56.

[3]王建軍.大腸癌血清腫瘤壞死因子α、白細胞介素8和可溶性白細胞介素2受體水平的檢測及其臨床意義[J].中國腫瘤臨床與康復(fù),2012,12（3）:241-243.

[4]曹秀紅,張學彥,張曉娜.白介素在潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機制中的研究進展[J].世界華人消化雜志,2011,25（30）:3143-3148.

[5]周彥平.輪狀病毒腸炎患兒血清心肌酶檢測及臨床意義[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2013,26（23）:173-174.

[6]戎玲勤，徐甦.康復(fù)新液灌腸聯(lián)合健脾清腸湯加減治療潰瘍性結(jié)腸炎32例[J].中醫(yī)雜志，2013，54（13）：1150-1151.

[7]毛穎，王秀珍，張喆，等.潰瘍性結(jié)腸炎動物模型研究進展[J].中醫(yī)藥信息，2013，30（4）：126-130.

[8] Endemann DH，Schiffrin EL.Endothelial dysfunction [J].J Am Soc Nephrol，2010，15(8)：1983-1992.

[9]柴玉娜，杜群.潰結(jié)靈對Caco-2炎癥細胞模型IκBα基因和蛋白表達的作用[J].中藥新藥與臨床藥理，2013，24（1）：14-17.

[10]王新月，閆昕.潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病特點與“毒損腸絡(luò)”病機學說[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013，33（3）：410-414.

[11]Izzard AS，Rizzoni D，Agabiti-Rosei E，et al.Small artery structure and hypertension：adaptive changes and targetorgan damage[J].JHypertens，2011，23(2)：247-250.

[12]楊志紅,鄧彤斌,王夢明，等.炎癥性腸病的病因?qū)W和藥物治療研究進展[J].中國藥師,2013,16(6):905-907.

[13]張婷,陳燁,王中秋，等.炎癥性腸病患者腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化及其與炎性指標的關(guān)系[J].南方醫(yī)科大學學報,2013,33(10):1474-1477,1498.

[14]張明明,于成功.普拉梭菌與炎癥性腸病關(guān)系的研究進展[J].中華消化雜志,2012,32(11):789-792.

[15]洪娜,于成功.腸道菌群在炎癥性腸病發(fā)生中的作用[J].胃腸病學, 2011,16(11):692-695.

Serum SIL-2R,IL-8 and TNF Levels in Rotavirus Enteritis(RV)to Study the Effects and M echanism of the Pathogenesis

TONG Ping-zhen
Department of Pathology,the Second Affiliated Hospital of Guiyang College of Traditional Chinese Medicine,guiyang,Guizhou Province,550001 China

ObjectiveTo investigate the serum levels of SIL-2R,IL-8 and TNF levels in rotavirus enteritis(RV)mechanism in the pathogenesis.Metheds50 cases of RV enteritis children in our hospital in 2012March to take in 2014 March were as the experimental group,and 50 healthy subjects over the same period in our hospital physical examination as control group,the double antibody sandwich ELISA method was used to detect SIL-2R,IL-8 and TNF-A levels in serum of two groups,to observe the changes of two groups each index.ResultsThe experimental group RV enteritis in the acute phase serum SIL-2R,TNF-A and IL-8 levels(45.23±11.23,122.23±6.75,526.43±12.54)pg/m L was significantly higher than that in normal control group (28.64± 9.62,68.12±5.46,197.32±14.24)pg/mL,there was a statistically significant difference(P＜0.05).Compared with the control group, m ild group and severe group in symptom group,serum IL-8,SIL-2R of RV enteritis and the level of TNF-A was also increased (P＜0.05),suggesting that the three related to the severity of the association.ConclusionSerum IL-8,SIL-2R,TNF-A in rotavirus infection play an important role in immune defense and immunemechanism of injury,clinical attention should be paid.

Serum SIL-2R;IL-8;TNF;Rotavirus;Enteritis;Mechanism of action

R 725

A

1674-0742（2015）07（b）－0010-03

2015-04-13）

童平珍（1978.8-），女，湖南漢壽人，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向：胸腺病理、消化病理、血液病理。