劉亭秀，宋慶，李靜，王彩冰，黃永毅

（1.右江民族醫(yī)學(xué)院2011級臨床醫(yī)學(xué)本科，廣西 百色 533000 E－mail：1529235241＠qq.com；2.右江民族醫(yī)學(xué)院2012級臨床醫(yī)學(xué)本科，廣西 百色 533000；3.右江民族醫(yī)學(xué)院應(yīng)用生理學(xué)研究室，廣西 百色 533000）

核桃（Juglans Regia L.）又稱胡桃，為胡桃科植物，分布在廣西、貴州、新疆、河北、河南、山東、山西等地，其營養(yǎng)豐富，有補腎壯陽、溫肺潤腸，強身健腦、駐顏延年之功用［1］，核桃葉具有殺蟲、抗炎、抗衰老、增強記憶力等作用［2－5］；而目前尚未發(fā)現(xiàn)有核桃葉（Walnut Leaf）對小腸平滑肌活動影響的文獻報道，本研究通過核桃葉提取液作用于家兔離體小腸，觀察核桃葉是否對小腸平滑肌有影響，為核桃葉進一步開發(fā)利用提供實驗依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實驗動物 健康家兔10只，體重1.5～2kg，雌雄不拘，由右江民族醫(yī)學(xué)院動物中心提供，動物許可證號：SCXK 桂2012－0003。

1.2 藥材、試劑、儀器 核桃葉生品于2014年5月在廣西百色市采集，曬干備用。氫氧化鈉（天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號：20120510）；pH 試紙（江蘇泰州市奧克濾紙廠，批號：20120216）。恒溫平滑肌槽（成都泰盟科技有限公司，型號：HW－400E）；生物機能實驗系統(tǒng)（成都泰盟科技有限公司，型號：BL－420E＋）；肌張力換能器（中國北京航天醫(yī)學(xué)工程研究所，型號：JH－2）。

1.3 核桃葉提取液的制備 將100g核桃葉加入4 000ml的水中浸泡1h，文火煮沸2h，16層紗布過濾后再用濾紙過濾，濾液用文火隔水濃縮至100 ml（相當(dāng)于生藥1g／ml），冷卻后放入4℃冰箱保存，用時以0.01mol／ml NaOH 將水提液pH 調(diào)至7.5。

1.4 家兔小腸標(biāo)本的制備 實驗前家兔禁食24h，自由飲水。用木槌擊家兔頭部，昏迷后快速沿腹正中線開腹取出幽門以下的小腸約15cm 分離脂肪和腸系膜，將小腸剪成約1.5cm 的腸段，迅速用臺氏液（參照實驗生理科學(xué)［6］的方法配制）將腸內(nèi)容物洗凈，放入充有氧氣的臺氏液中備用。

1.5 實驗方法 將每只家兔的腸段均隨機一段分入正常對照組及核桃葉低、中、高濃度組，共4組。用蛙心夾在腸段兩端對角固定，安放盛有充氧臺氏液的HW－400E恒溫平滑肌槽內(nèi)，其中一端接于肌張力換能器與BL－420E＋生物機能實驗系統(tǒng)連接，調(diào)節(jié)基線在2g，保持灌流管內(nèi)臺氏液平面在同等高度，待小腸平滑肌活動曲線穩(wěn)定描記1 min后，在灌流管內(nèi)加入相應(yīng)的液體（正常對照組加臺氏液0.1 ml，核桃葉低、中、高濃度組分別加入1g／ml核桃葉提取液0.1、0.2、0.4ml）后描記小腸平滑肌活動曲線。

1.6 實驗數(shù)據(jù)測量 測量1 min內(nèi)曲線全部收縮波的平均張力作為收縮力（g），測量1 min內(nèi)曲線收縮波的個數(shù)作為收縮頻率（次／分）。給藥前和給藥后2 min分別對收縮力和收縮頻率進行測量。

1.7 統(tǒng)計學(xué)方法 實驗數(shù)據(jù)利用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，計量數(shù)據(jù)以（±s）表示，兩組間均數(shù)比較用t檢驗，P ＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

各組給藥前的小腸平滑肌收縮力比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05），正常對照組、核桃葉低濃度和中濃度組給藥后的小腸平滑肌收縮力與給藥前及各組間的兩兩比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）；核桃葉高濃度組給藥后的小腸平滑肌收縮力明顯高于給藥前、正常對照組、核桃葉低濃度組、核桃葉中濃度組（P ＜0.001）。各組給藥前和給藥后的小腸平滑肌收縮頻率兩兩比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）。見表1。

表1 不同劑量的核桃葉提取液對兔離體小腸平滑肌收縮活動影響的比較 （±s，n ＝10）

表1 不同劑量的核桃葉提取液對兔離體小腸平滑肌收縮活動影響的比較 （±s，n ＝10）

注：與給藥前比較，a：P ＜0.01；與正常對照組比較，b：P ＜0.01；與核桃葉低濃度組比較，c：P ＜0.01；與核桃葉中濃度組比較，d：P ＜0.01

組別 劑量（ml）收縮力（g）收縮頻率（次／分）t P t P給藥前 給藥后給藥前 給藥后正常對照組 0.1 1.80±0.22 1.75±0.22 0.508 0.618 13.90±0.81 14.10±0.62 0.620 0.543核桃葉低濃度組 0.1 1.78±0.21 1.78±0.22 0.000 1.000 13.90±0.57 14.30±0.56 1.583 0.131核桃葉中濃度組 0.2 1.82±0.22 1.89±0.21 0.728 0.476 14.00±0.52 14.00±0.49 0.000 1.000核桃葉高濃度組 0.4 1.78±0.22 2.42±0.23abcd 6.359 ＜0.001 14.20±0.53 14.30±0.73 0.351 0.730

3 討論

核桃樹在世界各地均有分布，其果實為核桃有許多養(yǎng)身保健之功用，但其葉子卻作為農(nóng)作廢棄物被拋棄，我國是核桃樹種植面積和核桃產(chǎn)量均居于世界第一的國家，本課題組利用核桃葉提取液對離體小腸作用的實驗研究，為能充分利用農(nóng)作廢棄物價值提供參考資料。小腸的運動形式包括有緊張性收縮、蠕動、分節(jié)運動等，這些運動的發(fā)生都是小腸平滑肌收縮的具體外部表現(xiàn)；可以通過觀察小腸平滑肌收縮張力高低和收縮頻率快慢來判斷小腸興奮性高低［7］。本實驗結(jié)果顯示：核桃葉低濃度和中濃度組對家兔離體小腸平滑肌收縮力和收縮頻率與正常對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但核桃葉高濃度組離體小腸平滑肌收縮力明顯高于給藥前、正常對照組、核桃葉低濃度組、核桃葉中濃度組，其對離體小腸平滑肌收縮頻率與其余組差異無統(tǒng)計學(xué)意義；提示高濃度的核桃葉提取液能增強家兔離體小腸平滑肌收縮力，而對收縮頻率不影響。消化道對營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收的主要部位是小腸，小腸平滑肌收縮活動有利于營養(yǎng)物質(zhì)在小腸內(nèi)的消化和吸收。核桃葉主要含有沒食子酸、反油酸、核桃葉醌、氫化核桃醌、葡萄糖苷和具有高抗炎作用的多酚復(fù)合物等成分［8］。核桃葉提取液增強小腸平滑肌收縮力作用是否與反油酸相關(guān)，其能否促進小腸對營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收還有待于進一步研究。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：262.

［2］ 翟梅枝，楊秀萍，劉路.核桃葉提取物對蚜蟲的觸殺作用［J］.西北林學(xué)院學(xué)報，2001，16（4）：55－56.

［3］ 許青松，陳新用，宋衛(wèi)鋒，等.核桃葉水提取物對小鼠炎癥及免疫功能的影響［J］.延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報，2008，31（2）：93－95.

［4］ 黃萬元，陳洪玉，李文靜，等.核桃、黑芝麻對D－半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老作用研究［J］.右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2009，31（5）：778－779.

［5］ 李香蘭，蘭艷，許青松.核桃葉水提取液對小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響［J］.山東醫(yī)藥，2008，48（29）：38－39.

［6］ 陳世民，莫燕娜，趙善民，等.實驗生理科學(xué)［M］.2版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2011：60.

［7］ 朱大年，王庭槐.生理學(xué)［M］.8 版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：187－209.

［8］ 高海生，朱鳳妹，李潤豐.我國核桃加工產(chǎn)業(yè)的生產(chǎn)現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢［J］.經(jīng)濟林研究，2008，26（3）：119－126.