李金貴，蔡烈偉*，黃繼軫，陳俊賢，楊雙旭，羅學(xué)平

（漳州科技職業(yè)學(xué)院，福建漳州 363200）

1 引言

飲茶有益身體健康。但為防治和減少茶樹病蟲害的危害，各類化學(xué)殺蟲劑和除草劑農(nóng)藥在茶區(qū)被廣泛使用。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)登記的農(nóng)藥產(chǎn)品有27000多個(gè)，年產(chǎn)量190萬(wàn)t，居世界第一，其中化學(xué)農(nóng)藥的比重高，且農(nóng)藥利用率低，只有30%，要比發(fā)達(dá)國(guó)家低 10%～20%[1，2]。我國(guó)每年農(nóng)藥的使用量達(dá)到 130萬(wàn) t。這些農(nóng)藥的使用在提高茶葉產(chǎn)量的同時(shí)，殘留農(nóng)藥也極大地危害了消費(fèi)者的身體健康，并給自然環(huán)境和生態(tài)系統(tǒng)造成嚴(yán)重的污染[3，4]。

有機(jī)氯農(nóng)藥，是上世紀(jì)被廣泛使用的一類廣譜殺蟲劑，它可對(duì)撲殺對(duì)象的內(nèi)臟系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生毒害，在人體內(nèi)可誘導(dǎo)機(jī)體正常細(xì)胞發(fā)生癌變。有機(jī)氯農(nóng)藥在食物鏈和土壤中殘留可達(dá)幾十年，含氯苯環(huán)結(jié)構(gòu)極其穩(wěn)定，在食物鏈和土壤中不易被動(dòng)物或細(xì)菌體內(nèi)的酶分解，故有機(jī)氯類農(nóng)藥在植物和動(dòng)物體內(nèi)淤積，在食物鏈最高級(jí)達(dá)到最高值，造成農(nóng)藥公害現(xiàn)象[5]。六六六、滴滴涕是有機(jī)氯農(nóng)藥的典型代表，我國(guó)于上世紀(jì) 60年代已開(kāi)始禁止將六六六、滴滴涕用于蔬菜、茶葉、煙草等作物上；1983年，六六六、滴滴涕在我國(guó)禁產(chǎn)禁用。但 30多年后，有機(jī)氯農(nóng)藥仍普遍存在于自然界中，通過(guò)食物鏈途徑對(duì)人類造成危害。茶葉一般是茶樹鮮葉采摘后直接加工，經(jīng)開(kāi)水沖泡后飲用，因此，國(guó)家對(duì)有機(jī)氯農(nóng)藥在茶葉中的殘留標(biāo)準(zhǔn)有嚴(yán)格的限制。由于不同茶類中內(nèi)含成分不同，其對(duì)有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的檢測(cè)也會(huì)有不同的影響。研究分析不同茶類有機(jī)氯農(nóng)藥的檢測(cè)方法，對(duì)科學(xué)檢測(cè)茶葉中有機(jī)氯農(nóng)藥含量，有效控制茶葉農(nóng)殘超標(biāo)，指導(dǎo)茶葉商品生產(chǎn)具有重要意義。

2 試驗(yàn)儀器、材料及方法

2.1 儀器設(shè)備

Agilent 7890A氣相色譜儀（配ECD）、TDL-40C低速臺(tái)式離心機(jī)、ZD-85A數(shù)顯氣浴恒溫振蕩器、KQ-100KDE高效率數(shù)控超聲波清洗器、AXLC1810超純水機(jī)、DFT-200手持式高速中藥粉碎機(jī)、電熱鼓風(fēng)干燥箱等。

2.2 試驗(yàn)材料

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：六六六（α-666、β-666、γ-666、δ-666）、滴滴涕（p,p'-DDE、p,p'-DDD、o,p'-DDT、p,p'-DDT）、三氯殺螨醇：濃度均為100ug/mL，生產(chǎn)單位：農(nóng)業(yè)部環(huán)境科研監(jiān)測(cè)所研制。

試驗(yàn)藥品：正己烷（色譜純）、丙酮（色譜純）、石油醚、濃硫酸等。

茶葉樣品：分別來(lái)自福建、浙江、安徽、云南、四川等省，按常規(guī)加工方法生產(chǎn)的紅茶、綠茶、烏龍茶、白茶、巖茶、普洱茶。

2.3 試驗(yàn)方法

氣相色譜參數(shù)：主機(jī)Agilent 7890A GC-μECD配G4513A自動(dòng)進(jìn)樣器；色譜柱：DB-1701 30m×0.25mm×0.25μm；載氣：高純 N2（99.999%）；進(jìn)樣體積：0.5μL；進(jìn)樣口溫度：250℃；壓力：35psi；隔墊吹掃量：3mL/min；模式：不分流；分流出口吹掃流量：60mL/min（0.75min后）；柱溫：150℃保留 1min，10℃/min到 185℃保留 3min，2℃/min到190℃保留5min，再15℃/min到250℃；恒定壓力模式：35psi；μECD檢測(cè)器溫度：300℃；尾吹流量：40mL/min。

樣品處理方法：茶葉樣品前處理按 GB/T 5009.176-2003執(zhí)行，按GB 2763-2012進(jìn)行測(cè)試。

3 結(jié)果與分析

3.1 磺化處理分析

有機(jī)氯類農(nóng)藥難揮發(fā)、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、不易分解、易溶于脂類和有機(jī)溶劑，這些性質(zhì)對(duì)有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留分析方法具有重要影響[6，7]。硫酸磺化法主要是利用濃硫酸的強(qiáng)氧化性將雜質(zhì)分子破壞，如脂類和色素等大分子，分解成小分子物質(zhì)，這些物質(zhì)一般極性較大，因此會(huì)從有機(jī)相中析出，進(jìn)入濃硫酸層，將雜質(zhì)與目標(biāo)化合物所在的有機(jī)相層分離。

在有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留分析中，添加濃硫酸時(shí)，大多采取提取液:濃硫酸=10:1（體積比）的做法。本文采取在等量不同類茶葉提取液中，添加不同量濃硫酸，漩渦混勻3min，2500r/min離心10min，得到理想效果（出現(xiàn)分層，且上層基本透明）。研究結(jié)果顯示，由于茶葉的種類及加工方法不同，不同茶類提取液，加入不同量的濃硫酸進(jìn)行測(cè)試，得到理想的結(jié)果，不同茶葉提取液添加濃硫酸的量差異較大，紅茶和普洱僅需加1/50濃硫酸，白茶和巖茶需加2/50，綠茶需加3/50，而烏龍茶和鐵觀音需加5/50才能達(dá)到理想效果（表1）。

3.2 有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留GC檢測(cè)分析

以農(nóng)藥殘留標(biāo)樣濃度為橫坐標(biāo)，以農(nóng)藥殘留色譜峰面積（Hz）為縱坐標(biāo)，各農(nóng)藥保留時(shí)間等見(jiàn)表2。由于三氯殺螨醇與δ-666保留時(shí)間間距較小，在有茶葉基質(zhì)干擾的提取液中，分離效果不理想。故標(biāo)準(zhǔn)樣采用三類農(nóng)藥同時(shí)進(jìn)樣，而茶樣加標(biāo)采取分開(kāi)平行加入（六六六、滴滴涕一組，三氯殺螨醇另外組）。

其中六六六和滴滴涕標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度梯度為：1ug/mL、2ug/mL、6ug/mL、12ug/mL、20ug/mL。茶樣加標(biāo)濃度梯度“低加標(biāo)-2ug/mL、中加標(biāo)-6ug/mL、高加標(biāo)-18ug/mL”。

三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度梯度為：10ug/mL、20ug/mL、40ug/mL、80ug/mL、100ug/mL。茶樣加標(biāo)濃度梯度“低加標(biāo)-20ug/mL、中加標(biāo)-40ug/mL、高加標(biāo)-80ug/mL”。

六六六、滴滴涕、三氯殺螨醇標(biāo)樣色譜圖和茶樣加標(biāo)色譜圖，見(jiàn)圖1、2、3。

表2 有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留——六六六、滴滴涕、三氯殺螨醇線性方程、回收率和標(biāo)準(zhǔn)偏差等

圖1 六六六、滴滴涕、三氯殺螨醇標(biāo)樣色譜圖

圖2 茶葉加標(biāo)樣色譜圖

3.3 不同茶類有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留情況分析

對(duì)來(lái)自福建、浙江、安徽、云南、四川等五省的不同茶類共350個(gè)茶樣按GB 2763-2012進(jìn)行測(cè)試的結(jié)果見(jiàn)表3。檢測(cè)結(jié)果表明，有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留超標(biāo)現(xiàn)象依然值得關(guān)注，350個(gè)茶樣中有71個(gè)超標(biāo)，占總數(shù)的20.29%。其中，紅茶和鐵觀音超標(biāo)最為嚴(yán)重，三氯殺螨醇檢出率較高，紅茶樣品中三氯殺螨醇?xì)埩舫瑯?biāo)高達(dá)28.57%。

圖3 茶樣加標(biāo)樣色譜圖

表3 有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留超標(biāo)統(tǒng)計(jì)表

4 討論

目前在沒(méi)有氣相色譜質(zhì)譜儀的條件下，硫酸磺化法結(jié)合氣相色譜儀，仍然是部分有機(jī)氯類農(nóng)藥檢測(cè)的首選。我國(guó)茶葉種類繁多，不同茶葉提取液中有機(jī)酸、色素和酚類等雜質(zhì)含量差別較大，采用硫酸磺化法，能將目標(biāo)化合物與雜質(zhì)有效分離，結(jié)合GC-uECD建立的有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法，對(duì)六六六（α-666、β-666、γ-666、δ-666）、滴滴涕（p,p'-DDE、p,p'-DDD、o,p'-DDT、p,p'-DDT）、三氯殺螨醇9種農(nóng)藥殘留進(jìn)行方法研究，得到線性方程相關(guān)系數(shù) R2位于0.987至0.998之間，不同茶類加標(biāo)回收率位于87.35%至111.20%，完全可以滿足9種農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求。

在對(duì)350個(gè)來(lái)自不同地方的各類茶樣進(jìn)行測(cè)試發(fā)現(xiàn)，三氯殺螨醇被檢出不合格最多，檢出值多在方法檢出限 10倍以下，這些微量農(nóng)藥殘留是在生產(chǎn)中由水流、土壤、空氣、肥料等其他媒介引入。要控制有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留，應(yīng)從保持生態(tài)出發(fā)，科學(xué)規(guī)劃。

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