王進(jìn)波 初佳麗 韓 菲 楊 靜 齊莉莉

(浙江大學(xué)寧波理工學(xué)院，寧波 315100)

鐵(Fe)是生命有機(jī)體的必需營養(yǎng)素，在能量代謝、DNA復(fù)制、氧的運(yùn)輸、抗體生成、肝臟解毒及保護(hù)機(jī)體免受氧化應(yīng)激等諸多生理過程中發(fā)揮著重要作用［1］。微生物也不例外，F(xiàn)e參與微生物的電子傳遞、糖酵解、DNA合成及對(duì)抗自由基損傷等諸多生理代謝過程，對(duì)微生物的正常生長、增殖具有重要意義［2］。從宿主體內(nèi)獲取生長、繁殖所必需的Fe，是病原菌侵染宿主的前提。因此，控制病原菌的Fe攝取在機(jī)體抵抗病原菌侵染中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。

1 哺乳動(dòng)物的Fe代謝

哺乳動(dòng)物細(xì)胞攝取Fe的方式主要有3種［2］(圖1):1)細(xì)胞通過膜上的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(transferrin receptor，TFR)與血液中的轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合攝取Fe［3］;2)腸腔中游離的 Fe3+經(jīng)十二脂腸細(xì)胞色素b還原酶(duodenal cytochrome b reductase，DCYTB)還原成Fe2+后，通過小腸黏膜細(xì)胞刷狀緣上的二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(divalent metal transporter 1，DMT1)轉(zhuǎn)入胞內(nèi);3)血紅素鐵(血紅蛋白或結(jié)合珠蛋白形式)可通過巨噬細(xì)胞膜上的血紅蛋白清道夫受體——分化抗原簇163(cluster of differentiation 163，CD163)進(jìn)入胞內(nèi)。Fe進(jìn)入胞內(nèi)后，有的進(jìn)入線粒體，用以合成血紅素、鐵硫簇(Fe-S cluster)等，進(jìn)而參與機(jī)體氧的轉(zhuǎn)運(yùn)及電子傳遞等代謝過程;有的以鐵蛋白的形式存在于胞內(nèi);還有部分Fe經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，參與機(jī)體多種生理機(jī)能。腸上皮細(xì)胞內(nèi)Fe的轉(zhuǎn)出主要由腸絨毛上皮細(xì)胞膜上的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ferroportin，F(xiàn)PN)完成，轉(zhuǎn)出的Fe2+在血漿銅藍(lán)蛋白或小腸細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)輔助蛋白作用下成為Fe3+。此過程受肝臟分泌的鐵調(diào)激素調(diào)控，當(dāng)體內(nèi)Fe濃度增高時(shí)，鐵調(diào)激素表達(dá)量增加，誘導(dǎo)FPN降解，抑制胞內(nèi)Fe轉(zhuǎn)出，同時(shí)抑制Fe吸收;當(dāng)體內(nèi)Fe濃度低時(shí)，鐵調(diào)激素表達(dá)量減少，F(xiàn)PN將胞內(nèi)Fe轉(zhuǎn)出進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，同時(shí)增加腸黏膜Fe的吸收率［4］。

2 病原菌的Fe攝取

Fe在微生物的生長、繁殖、代謝過程中具有很重要的作用。研究指出，病原菌在Fe濃度極低的環(huán)境中亦能正常生長，并感染宿主。這是由于這些病原菌具有高效的Fe攝取機(jī)制，能夠從周圍環(huán)境中攝取 Fe，滿足自身需要［5-6］。目前已知的3種病原菌Fe攝取機(jī)制為:嗜鐵素系統(tǒng)、血紅素獲取系統(tǒng)和轉(zhuǎn)鐵蛋白/乳鐵蛋白受體［1］(圖2)。嗜鐵素與Fe的結(jié)合常數(shù)超過1050，使細(xì)菌能夠高效獲取環(huán)境中的Fe。負(fù)載Fe的嗜鐵素能與細(xì)菌表面的受體共價(jià)結(jié)合，將Fe-嗜鐵素復(fù)合物攝入細(xì)胞內(nèi)，然后再釋放出游離Fe作為細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)。血紅素獲取系統(tǒng)主要通過細(xì)菌表面的血紅素結(jié)合蛋白受體，從血紅蛋白中獲取血紅素，轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)菌胞內(nèi)，然后在血紅素氧化酶或逆鐵螯合酶的作用下，將Fe從血紅素上解離下來。有些細(xì)菌具有轉(zhuǎn)鐵蛋白和乳鐵蛋白受體，可以直接識(shí)別宿主轉(zhuǎn)鐵蛋白和乳鐵蛋白，從宿主細(xì)胞中獲取Fe［6-7］。

圖1 宿主的Fe代謝Fig.1 Iron metabolism in the host［2］

3 宿主與病原菌間的Fe競(jìng)爭(zhēng)

正常生理?xiàng)l件下，哺乳動(dòng)物體內(nèi)游離Fe的濃度很低，使體內(nèi)細(xì)菌處于Fe饑餓狀態(tài)，從而抑制其生長、繁殖，防止感染的發(fā)生，這是機(jī)體對(duì)抗病原菌侵染的第1道防線［8］。為了從宿主體內(nèi)獲取生長、繁殖、代謝所需要的Fe，細(xì)菌進(jìn)化出了高效的Fe攝取系統(tǒng)。對(duì)此，動(dòng)物機(jī)體也有一些競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制，限制細(xì)菌對(duì)Fe的攝取，從而抑制細(xì)菌(尤其是病原菌)的增殖。因此，宿主與病原菌之間Fe的競(jìng)爭(zhēng)是機(jī)體對(duì)抗病原菌侵染的重要方式，對(duì)機(jī)體健康具有重要意義。

動(dòng)物機(jī)體參與Fe競(jìng)爭(zhēng)的蛋白因子有多種，二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)載體、細(xì)胞色素b、遺傳性血色病蛋白、鐵調(diào)節(jié)蛋白、鐵蛋白、FPN等參與機(jī)體Fe平衡代謝的蛋白因子均參與Fe競(jìng)爭(zhēng)。感染發(fā)生時(shí)，機(jī)體會(huì)上調(diào)Fe攝入相關(guān)蛋白的表達(dá)，下調(diào)FPN等Fe轉(zhuǎn)出相關(guān)蛋白的表達(dá)，將體內(nèi)Fe大量轉(zhuǎn)入胞內(nèi)，與鐵蛋白形成復(fù)合物貯存起來，降低細(xì)胞外液中Fe的濃度，抑制病原菌攝取Fe，從而抑制感染的發(fā)生。

脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(lipocalin-2，Lcn-2)是研究較為廣泛的一種參與Fe競(jìng)爭(zhēng)的蛋白因子，該蛋白因子又稱噬鐵蛋白、NGAL、24p3等。Flo等［9］運(yùn)用基因芯片篩選技術(shù)首次發(fā)現(xiàn)小鼠Lcn-2可與負(fù)載Fe的大腸桿菌嗜鐵素結(jié)合，抑制大腸桿菌對(duì)Fe的攝取，從而發(fā)揮抗菌作用。Saiga等［10］利用 Lcn-2基因缺陷型小鼠研究發(fā)現(xiàn)，病原菌感染后，機(jī)體通過Toll樣受體信號(hào)通路激活Lcn-2表達(dá)，抑制胞內(nèi)Fe的釋放，防止結(jié)核分枝桿菌對(duì)肺泡上皮細(xì)胞的感染。Bellmann-Weiler等［11］研究發(fā)現(xiàn)，Lcn-2能夠顯著抑制硫酸鐵(FeSO4)刺激的小鼠胞內(nèi)肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae)增殖，這也說明了Lcn-2可能通過抑制病原菌攝取Fe的方式來發(fā)揮抑菌作用;該研究還發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞介素-10也可以促進(jìn)胞內(nèi)鐵蛋白的合成，降低Fe的釋放，進(jìn)而發(fā)揮抑菌作用。Lcn-2亦在宿主對(duì)抗寄生蟲感染過程中發(fā)揮重要作用。Garénaux等［12］對(duì)禽致病性大腸桿菌的研究證明，雞Lcn-2同源蛋白Ex-FABP能顯著抑制大腸桿菌Fe的攝取，提示Ex-FABP是雞體內(nèi)重要的Fe競(jìng)爭(zhēng)蛋白，該蛋白通過與致病菌競(jìng)爭(zhēng) Fe，抑制病原菌的生長與增殖。Sazawal等［13］和 Zhao 等［14］研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)e 能刺激瘧原蟲的增殖，加快感染周期。在瘧原蟲感染初期，Lcn-2會(huì)抑制腸、肝、脾等的貯存Fe向血液中釋放，從而抑制瘧原蟲的生長與增殖;同時(shí)，Lcn-2還會(huì)刺激單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分裂，激活機(jī)體天然免疫系統(tǒng)，發(fā)揮抗寄生蟲作用。Devireddy等［15］研究發(fā)現(xiàn)，小鼠Lcn-2自身并無Fe結(jié)合能力，只有與嗜鐵素結(jié)合后才能與Fe結(jié)合;而哺乳動(dòng)物細(xì)胞自身也能產(chǎn)生類似細(xì)菌嗜鐵素的成分，幫助細(xì)胞結(jié)合環(huán)境中的Fe。

圖2 病原菌的Fe攝取機(jī)制Fig.2 Iron uptake mechanism of bacterial pathogens［1］

近年來的研究發(fā)現(xiàn)，鐵調(diào)激素也在機(jī)體與病原菌的Fe競(jìng)爭(zhēng)中發(fā)揮重要作用。綠膿桿菌、鏈球菌和伯氏疏螺旋體等病原菌均能刺激動(dòng)物肝臟、脾臟產(chǎn)生分泌鐵調(diào)激素，該激素進(jìn)一步誘導(dǎo)腸黏膜細(xì)胞、肝細(xì)胞、脾細(xì)胞FPN降解，顯著降低釋放入血的Fe總量;鐵調(diào)激素還會(huì)抑制腸黏膜Fe的吸收，從而抑制侵染進(jìn)入血液、內(nèi)臟器官的病原菌攝取 Fe［16-17］。Wang 等［18］和 Portugal等［19］研究發(fā)現(xiàn)，在瘧原蟲感染過程中，肝臟鐵調(diào)激素的表達(dá)量顯著上升，血清Fe水平顯著下降，從而抑制血液中瘧原蟲的生長繁殖，這對(duì)機(jī)體對(duì)抗瘧疾發(fā)揮重要作用。機(jī)體Fe代謝因子在免疫應(yīng)答反應(yīng)中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。研究發(fā)現(xiàn)，Hfe基因缺陷型小鼠的鐵調(diào)激素水平顯著下降，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞FPN的表達(dá)量顯著上升，這會(huì)引起腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6等因子的水平顯著下降，從而導(dǎo)致胞內(nèi)傷寒沙門氏菌的數(shù)量顯著增加［20-21］。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)e代謝主要影響Toll樣受體4(Tolllike receptor 4，TLR4)介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)［22］。

大多數(shù)微生物通過高效的Fe攝取系統(tǒng)，從Fe濃度極低的宿主體內(nèi)獲取足夠的Fe，滿足自身生長、繁殖、代謝等的需要。嗜鐵素在細(xì)菌Fe競(jìng)爭(zhēng)中的作用極其重要［7-8］。大腸桿菌嗜鐵素與Fe的解離常數(shù)(Kd)為10-49，而轉(zhuǎn)鐵蛋白與Fe的 Kd則為10-20，嗜鐵素螯合Fe的能力遠(yuǎn)強(qiáng)于哺乳動(dòng)物的轉(zhuǎn)鐵蛋白。宿主肝臟細(xì)胞產(chǎn)生的Lcn-2能夠與嗜鐵素競(jìng)爭(zhēng)Fe，阻礙細(xì)菌攝取Fe［23］。為了逃避宿主Lcn-2的競(jìng)爭(zhēng)，有些細(xì)菌的嗜鐵素發(fā)生糖基化修飾或分子線性化，改變分子構(gòu)象，避免被Lcn-2識(shí)別、結(jié)合，但其Fe螯合能力并未減弱［8］。此外，細(xì)菌還通過Fe2+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白AB(ferrous iron transport AB，F(xiàn)eoAB)、ATP 結(jié)合盒(ATP-binding cassette，ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、乳鐵蛋白/轉(zhuǎn)鐵蛋白/血紅素鐵轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)等競(jìng)爭(zhēng)性攝取內(nèi)環(huán)境中的Fe，維持自身需要［7，24］。細(xì)菌具有極為精細(xì)的 Fe感知系統(tǒng)，通過鐵吸收調(diào)節(jié)因子(ferric uptake regulator，F(xiàn)ur)參與細(xì)菌Fe代謝相關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控。當(dāng)Fe含量豐富時(shí)，F(xiàn)ur會(huì)結(jié)合到鐵調(diào)節(jié)相關(guān)基因的上游，抑制這些基因的表達(dá);而當(dāng)Fe缺乏時(shí)，F(xiàn)ur對(duì)鐵調(diào)節(jié)相關(guān)基因的阻遏作用解除，鐵調(diào)節(jié)相關(guān)基因開始表達(dá)，幫助細(xì)菌攝取Fe，這一機(jī)制在細(xì)菌Fe競(jìng)爭(zhēng)中具有重要作用［1］。Fur還可通過ryhB RNA的反義作用，調(diào)節(jié)細(xì)菌利用Fe相關(guān)基因的表達(dá)［25］。

4 Fe對(duì)腸道微生物的影響

動(dòng)物腸道中生存的大量微生物多數(shù)是益生菌，在營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收、免疫機(jī)能調(diào)節(jié)以及防止病原微生物感染等過程中發(fā)揮著重要作用［26-27］;同時(shí)，動(dòng)物腸道中也存在少量的致病菌或條件性致病菌，在正常生理狀況下，它們不會(huì)引起感染性疾病，但在腸道應(yīng)激、機(jī)體免疫機(jī)能降低、飼糧改變等條件下會(huì)引起感染。許多研究表明，飼糧Fe水平對(duì)腸道微生物組成和腸道健康有顯著影響，對(duì)幼齡動(dòng)物的影響尤為明顯［13］。Sazawal等［13］臨床調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，口服Fe會(huì)導(dǎo)致腸道感染幾率顯著增加，這是由于高濃度未被吸收的Fe會(huì)引起結(jié)腸菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，導(dǎo)致致病菌數(shù)量顯著增加，從而誘發(fā)感染。Werner等［28］分別以不同F(xiàn)e水平的飼糧飼喂小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)低Fe飼糧(或無Fe飼糧)使鼠腸道益生菌數(shù)量增加，而致病菌的數(shù)量顯著下降。腹瀉是全球范圍內(nèi)兒童最為重要的腸道疾病，世界衛(wèi)生組織(World Health Organization，WHO)和美國國立衛(wèi)生研究院(National Institutes of Health，NIH)均已就Fe對(duì)腸道感染的影響開展相關(guān)研究，為兒童合理補(bǔ) Fe提供科學(xué)依據(jù)［29］。Zimmermann等［30］研究指出，預(yù)防性補(bǔ) Fe會(huì)導(dǎo)致兒童腸道病原菌(如沙門氏菌)數(shù)量增加，誘發(fā)腸道疾病。Buhnik-Rosenblau等［31］利用 Irp2和 Hfe基因缺陷型小鼠進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)Fe吸收代謝相關(guān)基因缺陷會(huì)導(dǎo)致小鼠腸道微生物區(qū)系發(fā)生顯著變化，進(jìn)一步證明了宿主Fe吸收代謝與腸道菌群之間的關(guān)系。

飼糧Fe影響腸道微生物的機(jī)制尚不清楚。某些益生菌［如植物乳桿菌(L.plantarum)］的生長繁殖并不嚴(yán)格依賴Fe，在缺Fe或低Fe環(huán)境中仍能較好生長繁殖，而致病菌幾乎都要依賴Fe才能大量繁殖［32］。多數(shù)益生菌與致病菌一樣，需通過攝取環(huán)境中的Fe以滿足自身需要。Valdebenito等［33］研究發(fā)現(xiàn)，與致病性大腸桿菌類似，益生菌Nissle 1917株也產(chǎn)生系列嗜鐵素，獲取宿主腸道中的Fe，但其不具有致病菌的毒力因子，不會(huì)致病。Fe攝取代謝系統(tǒng)與致病菌的毒力密切相關(guān)。沙門氏菌Fur與Fe結(jié)合后，能夠激活HilD(hyperinvasive locus D)蛋白的表達(dá)，HilD進(jìn)而激活其毒力相關(guān)蛋白沙門菌毒力島1(Salmonella pathogenicity island 1，SPI1)的表達(dá)，通過Ⅲ型分泌系統(tǒng)增加細(xì)菌毒力，侵染宿主細(xì)胞［34-35］。

5 小結(jié)

貧血與腹瀉是影響仔豬健康的兩大重要疾病，而且這2種疾病經(jīng)常同時(shí)發(fā)生，對(duì)養(yǎng)豬生產(chǎn)的危害極大。為預(yù)防仔豬貧血，生產(chǎn)中常通過注射Fe或飼糧添加Fe的方式給仔豬補(bǔ)Fe，然而，不合理地補(bǔ)Fe可能導(dǎo)致仔豬腸道菌群改變，弱化仔豬Fe競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制，從而導(dǎo)致病原菌感染發(fā)生。因此，本文針對(duì)Fe對(duì)仔豬腸道菌群組成的影響、宿主細(xì)胞與細(xì)菌的Fe競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制、益生菌與致病菌在Fe攝取過程中的異同點(diǎn)等問題進(jìn)行研究，為仔豬生產(chǎn)中合理補(bǔ)Fe提供科學(xué)依據(jù)。

［1］ SKAAR E P.The battle for iron between bacterial pathogens and their vertebrate hosts［J］.PLoS Pathogens，2010，6(8):e1000949.

［2］ SCHAIBLE U E，KAUFMANN S H.Iron and microbial infection［J］.Nature Reviews Microbiology，2004，2(12):946-953.

［3］ HENTZE M W，MUCKENTHALER M U，AN-DREWS N C.Balancing acts:molecular control of mammalian iron metabolism［J］.Cell，2004，117(3):285-297.

［4］ HENTZE M W，MUCKENTHALER M U，GALY B，et al.Two to tango:regulation of mammalian iron metabolism［J］.Cell，2010，142(1):24-38.

［5］ WEINBERG E D.Iron availability and infection［J］.Biochimica et Biophysica Acta，2009，1790(7):600-605.

［6］ JOHNSON E E，WESSLING-RESNICK M.Iron metabolism and the innate immune response to infection［J］.Microbes and Infection，2012，14(3):207-216.

［7］ GARENAUX A，CAZA M，DOZOIS C M.The ins and outs of siderophore mediated iron uptake by extraintestinal pathogenic Escherichia coli［J］.Veterinary Microbiology，2011，153(1/2):89-98.

［8］ FISCHBACH M A，LIN H，ZHOU L，et al.The pathogen-associated iroA gene cluster mediates bacterial evasion of lipocalin2［J］.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of A-merica，2006，103(44):16502-16507.

［9］ FLO T H，SMITH K D，SATO S，et al.Lipocalin2 mediates an innate immune response to bacterial infection by sequestrating iron［J］.Nature，2004，432(7019):917-921.

［10］ SAIGA H，NISHIMURA J，KUWATA H，et al.Lipocalin 2-dependent inhibition of mycobacterial growth in alveolar epithelium［J］.The Journal of Immunology，2008，181(12):8521-8527.

［11］ BELLMANN-WEILER R，SCHROLL A，ENGL S，et al.Neutrophil gelatinase-associated lipocalin and interleukin-10 regulate intramacrophage chlamydia pneumoniae replication by modulating intracellular iron homeostasis［J］.Immunobiology，2012，218(7):969-978.

［12］ GARéNAUX A，HOULE S，F(xiàn)OLCH B，et al.Avian lipocalin expression in chickens following Escherichia coli infection and inhibition of avian pathogenic Escherichia coli growth by Ex-FABP［J］.Veterinary Immunology and Immunopathology，2013，152(1/2):156-167.

［13］ SAZAWAL S，BLACK R E，RAMSAN M，et al.Effects of routine prophylactic supplementation with iron and folic acid on admission to hospital and mortality in preschool children in a high malaria transmission setting:community-based，randomised，placebo-controlled trial［J］.The Lancet，2006，367(9507):133-143.

［14］ ZHAO H，KONISHI A，F(xiàn)UJITA Y，et al.Lipocalin 2 bolsters innate and adaptive immune responses to blood-stage malaria infection by reinforcing host iron metabolism［J］.Cell Host Microbe，2012，12(5):705-716.

［15］ DEVIREDDY L R，HART D O，GOETZ D H，et al.A mammalian siderophore synthesized by an enzyme with a bacterial homolog involved in enterobactin production［J］.Cell，2010，141(6):1006-1017.

［16］ PEYSSONNAUX C，ZINKERNAGEL A S，DATTA V，et al.TLR4-dependent hepcidin expression by myeloid cells in response to bacterial pathogens［J］.Blood，2006，107(9):3727-3732.

［17］ KOENING C L，MILLER J C，NELSON J M，et al.Toll-like receptors mediate induction of hepcidin in mice infected with Borrelia burgdorferi［J］.Blood，2009，114(9):1913-1918.

［18］ WANG H Z，HE Y X，YANG C J，et al.Hepcidin is regulated during blood-stage malaria and plays a protective role in malaria infection［J］.The Journal of Immunology，2011，187(12):6410-6416.

［19］ PORTUGAL S，CARRET C，RECKER M，et al.Hostmediated regulation of superinfection in malaria［J］.Nature Medicine，2011，17(6):732-737.

［20］ CHERAYIL B J.The role of iron in the immune response to bacterial infection［J］.Immunological Research，2011，50(1):1-9.

［21］ JOHNSON E E，SANDGREN A，CHERAYIL B J，et al.Role of ferroportin in macrophage-mediated immunity［J］.Infection and Immunity，2010，78(12):5099-5106.

［22］ WANG L J，HARRINGTON L，TREBICKA E，et al.Selective modulation of TLR4-activated inflammatory responses by altered iron homeostasis in mice［J］.Journal of Clinical Investigation，2009，119(11):3322-3328.

［23］ WILES T J，KULESUS R R，MULVEY M A.Origins and virulence mechanisms of uropathogenic Escherichia coli［J］.Experimental and Molecular Pathology，2008，85(1):11-19.

［24］ ARYA G，NIVEN D F.Acquisition of haemoglobinbound iron by strains of the Actinobacillus minor/‘porcitonsillarum’complex［J］.Veterinary Microbiology，2011，148(2/3/4):283-291.

［25］ MASSE E，SALVAIL H，DESNOYERS G，et al.Small RNAs controlling iron metabolism［J］.Current Opinion in Microbiology，2007，10(2):140-145.

［26］ GAO Q X，QI L L，WU T X，et al.Ability of Clostridium butyricum to inhibit Escherichia coli-induced apoptosis in chicken enembryo intestinal cells［J］.Veterinary Microbiology，2012，160(3/4):395-402.

［27］ GAO Q X，QI L L，WU T X，et al.An important role of interleukin-10 in counteracting excessive immune response in HT-29 cells exposed to Clostridium butyricum［J］.BMC Microbiology，2012，12:100.

［28］ WERNER T，WAGNER SJ，MARTINEZ I，et al.Depletion of luminal iron alters the gut microbiota and prevents Crohn’s disease-like ileitis［J］.Gut，2011，60(3):325-333.

［29］ KORTMAN G A，BOLEIJ A，SWINKELS D W，et al.Iron availability increases the pathogenic potential of Salmonella typhimurium and other enteric pathogens at the intestinal epithelial interface［J］.PLoS One，2012，7(1):e29968.

［30］ ZIMMERMANN M B，CHASSARD C，ROHNER F，et al.The effects of iron fortification on the gut microbiota in African children:a randomized controlled trial in Coted＇Ivoire［J］.American Journal of Clinical Nutrition，2010，92(6):1406-1415.

［31］ BUHNIK-ROSENBLAU K，MOSHE-BELIZOWSKI S，DANIN-POLEG Y，et al.Genetic modification of iron metabolism in mice affects the gut microbiota［J］.Biometals，2012，25(5):883-892.

［32］ DUHUTREL P，BORDAT C，WU T D，et al.Iron sources used by the nonpathogenic lactic acid bacterium Lactobacillus sakei as revealed by electron energy loss spectroscopy and secondary-ion mass spectrometry［J］.Applied and Environmental Microbiology，2010，76(2):560-565.

［33］ VALDEBENITO M，CRUMBLISS A L，WINKELMANN G，et al.Environmental factors influence the production of enterobactin，salmochelin，aerobactin，and yersiniabactin in Escherichia coli strain Nissle 1917［J］.International Journal of Medical Microbiology，2006，296(8):513-520.

［34］ ELLERMEIER J R，SLAUCH J M.Fur regulates expression of the Salmonella pathogenicity island 1 typeⅢ secretion system through HilD［J］.Journal of Bacteriology，2008，190(2):476-486.

［35］ TEIXIDO L，CARRASCO B，ALONSO JC，et al.Fur activates the expression of Salmonella enterica pathogenicity island 1 by directly interacting with the hilD operator in vivo and in vitro［J］.PLoS One，2011，6(5):e19711.