朱曉強 李福昌 李萬佳 付朝暉 張彩霞

(山東農業(yè)大學動物科技學院，泰安 271018)

維生素A是動物體內必需的一種脂溶性維生素，研究表明，維生素A對于維持上皮細胞的完整性、正常視覺、基因調節(jié)、動物繁殖、免疫功能、抗氧化作用等方面都是必不可少的。近年來的研究發(fā)現，維生素A能增強機體抗感染能力，參與蛋白質的合成，維持骨骼的正常生長代謝［1］。Maden［2］進一步研究表明維生素A在胚胎發(fā)育中也起重要作用。目前，我國還未正式出臺獺兔完整的飼養(yǎng)標準，因此對獺兔維生素A需要量的研究具有重要意義。本試驗以生長獺兔為研究對象，探討飼糧添加不同水平維生素A對其生長性能、毛皮品質、維生素A沉積、血清生化指標和抗氧化性能的影響，尋求獺兔飼糧中維生素A適宜添加水平，為我國制定獺兔飼養(yǎng)標準提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗飼糧

基礎飼糧參照NRC(1977)家兔飼養(yǎng)標準配制而成，其組成及營養(yǎng)水平見表1。在基礎飼糧中分別添加 0(對照組)、5 000、10 000、20 000、40 000 IU/kg維生素A醋酸酯，制成5種試驗飼糧，加工成直徑4～6 mm的顆粒飼料，通風干燥保存。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.2 試驗設計與飼養(yǎng)管理

試驗選用健康、平均體重為(1.50±0.14)kg的3月齡獺兔200只，公母各占1/2，隨機分成5組，每組40個重復，每個重復1只獺兔。分別飼喂以上5種飼糧，預試期7 d，正試期53 d。試兔單籠飼養(yǎng)，試驗期間早晚各喂1次，采用常規(guī)飼養(yǎng)管理和免疫程序，自然采光、通風。

1.3 樣品采集與制備

在試驗開始后第53天早晨空腹稱重，每組隨機抽取8只試兔，立即心臟采血10 mL，37℃水浴40 min后，3 000 r/min離心15 min，分離所得血清分裝于Eppendorf管中，置于-20℃冷凍保存，待測血清維生素A含量、血清生化指標和抗氧化性能指標。

采血完成后將試兔頸動脈放血屠宰，取毛皮進行稱重，將毛皮沿腹中線剪開，量其長、寬，記錄數據，計算毛皮面積;摘取肝臟放于液氮罐中保存，待測肝臟維生素A含量及抗氧化性能指標。

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生長性能指標

試驗結束后，以重復為單位稱量試兔的體重，并統(tǒng)計全期的喂料量，計算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.4.2 毛皮品質

屠宰后，稱取毛皮重量，將毛皮平鋪后量取皮長、皮寬(肩部、腰部、臀部各量1次，取平均值)計算毛皮面積，毛囊密度采用石蠟切片及蘇木精-伊紅(HE)染色法進行圖像分析，每只試兔選取3張HE染色切片(肩部、背部及臀部各1張)，每張切片選2個視野拍照，用Image-Plus軟件對每個視野的毛囊個數、初級毛囊個數、次級毛囊個數進行統(tǒng)計，計算出毛囊密度、初級毛囊密度和次級毛囊密度，并計算次級毛囊密度/初級毛囊密度(S/P)［3］。

1.4.3 血清和肝臟維生素A含量

高效液相色譜法，參照文獻［4］的方法。

1.4.4 血清生化指標

血清尿素氮(UN)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、膽固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量均在日立7020型全自動分析儀上測定，試劑盒購自日本和光純藥工業(yè)株式會社。

1.4.5 血清和肝臟抗氧化性能指標

血清和肝臟總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性、總抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量均在UV-2450型紫外可見分光光度計上測定，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.5 數據處理與分析

數據采用SAS 9.1統(tǒng)計軟件中的GLM進行數據的方差分析，若有顯著差異，則采用Duncan氏法進行數據的多重比較。

2 結果與分析

2.1 飼糧維生素A添加水平對生長獺兔生長性能的影響

由表2可以看出，在初始體重無顯著差異(P＞0.05)的情況下，飼糧維生素A添加水平對獺兔ADG、ADFI影響不顯著(P＞0.05)，對 F/G影響顯著(P＜0.05)，其中10 000 IU/kg維生素A添加組F/G最低，顯著低于對照組和5 000 IU/kg維生素A添加組(P＜0.05)，而10 000、20 000和40 000 IU/kg維生素A添加組之間差異不顯著(P＞0.05)，ADG在飼糧維生素A添加水平為10 000 IU/kg時最高。

2.2 飼糧維生素A添加水平對生長獺兔毛皮品質的影響

由表3可以看出，飼糧維生素A添加水平對生長獺兔毛皮重量和毛皮面積的影響極顯著(P＜0.01)，毛皮重量及毛皮面積都隨飼糧維生素A添加水平增加呈先升高后降低的變化，10 000 IU/kg維生素A添加組均顯著高于其他4組(P＜0.05)，飼糧維生素A添加水平對毛囊密度、初級毛囊密度、S/P均無顯著影響(P＞0.05)。

表3 飼糧維生素A添加水平對生長獺兔毛皮品質的影響Table 3 Effects of dietary vitamin A level on fur quality of growing Rex rabbits

2.3 飼糧維生素A添加水平對生長獺兔血清及肝臟維生素A沉積的影響

由表4可以看出，飼糧維生素A添加水平對血清中維生素A含量影響顯著(P＜0.05)，當飼糧維生素A添加水平在0～20 000 IU/kg范圍內時，隨飼糧維生素A添加水平增加，血清維生素A含量呈升高趨勢，當飼糧維生素A添加水平超過20 000 IU/kg后，血清維生素A含量趨于平穩(wěn);飼糧維生素A添加水平對肝臟中維生素A含量影響顯著(P＜0.05)，隨飼糧維生素A添加水平增加，肝臟維生素A含量呈升高趨勢，且呈線性關系。

表4 飼糧維生素A添加水平對生長獺兔血清及肝臟維生素A沉積的影響Table 4 Effects of dietary vitamin A level on vitamin A deposition in serum and liver of growing Rex rabbits

2.4 飼糧維生素A添加水平對生長獺兔血清生化指標的影響

由表5可以看出，飼糧維生素A添加水平對血清 UN含量影響顯著(P＜0.05)，10 000、20 000 IU/kg維生素A添加組顯著低于其他組(P＜0.05)，飼糧維生素A添加水平對血清TP含量影響不顯著(P＞0.05)，對血清ALB含量影響顯著(P＜0.05)，對照組顯著低于其他組(P＜0.05)，其他各組間無顯著差異(P＞0.05)，其中飼糧維生素A添加水平為10 000 IU/kg時血清ALB含量最高;飼糧維生素A添加水平對血清TG、CHO、HDL和 LDL含量影響均不顯著(P＞0.05)。

表5 飼糧維生素A添加水平對生長獺兔血清生化指標的影響Table 5 Effects of dietary vitamin A level on serum biochemical indices of growing Rex rabbits

2.5 飼糧維生素A添加水平對生長獺兔血清和肝臟抗氧化性能指標的影響

由表6可以看出，飼糧維生素A添加水平對血清GSH-Px和T-SOD活性影響極顯著(P＜0.01)，當飼糧維生素 A添加水平在0～10 000 IU/kg范圍內時，隨飼糧維生素A添加水平增加，血清GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趨勢，當飼糧維生素A添加水平超過10 000 IU/kg時，都趨于平穩(wěn);飼糧維生素A添加水平對血清MDA含量影響顯著(P＜0.05)，隨飼糧維生素A添加水平增加，血清MDA含量呈降低趨勢，40 000 IU/kg維生素A添加組血清MDA含量最低。

飼糧維生素A添加水平對肝臟GSH-Px活性影響極顯著(P＜0.01)，對T-SOD活性影響顯著(P＜0.05)，當飼糧維生素 A添加水平在0～10 000 IU/kg范圍內時，隨飼糧維生素A添加水平增加，肝臟GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趨勢，當飼糧維生素A添加水平超過10 000 IU/kg時，都趨于平穩(wěn);飼糧維生素A添加水平對肝臟MDA含量影響顯著(P＜0.05)，隨飼糧維生素A添加水平增加，肝臟MDA含量呈降低趨勢，40 000 IU/kg維生素A添加組肝臟MDA含量最低;飼糧維生素A添加水平對肝臟T-AOC影響不顯著(P＞0.05)，但隨飼糧維生素A添加水平增加，肝臟T-AOC先升高后降低，10 000 IU/kg維生素A添加組肝臟T-AOC最高。

表6 飼糧維生素A添加水平對生長獺兔血清和肝臟抗氧化性能指標的影響Table 6 Effects of dietary vitamin A level on serum and liver antioxidant indices of growing Rex rabbits

3 討論

3.1 飼糧維生素A添加水平與生長獺兔生長性能

謝登玉等［5］以肉兔為研究對象，發(fā)現6 000 IU/kg維生素A可顯著提高獺兔的ADG，降低 F/G。林 映 才 等［6］研 究 表 明 添 加 300～10 000 IU/kg維生素A顯著提高仔豬ADG，極顯著降低F/G。郭曉宇等［7］以肉雞為研究對象，發(fā)現飼糧維生素A水平為3 000 IU/kg時，肉雞生長性能較高;飼糧維生素 A水平為1 500、45 000 IU/kg時，生長性能顯著下降;飼糧維生素A水平為15 000 IU/kg時，生長性能呈降低趨勢。本試驗研究發(fā)現，隨飼糧維生素A添加水平的提高，獺兔ADG、ADFI有上升趨勢，F/G呈降低趨勢。當飼糧維生素A添加水平達到10 000 IU/kg時，獺兔的F/G顯著低于其他4組，說明當飼糧維生素A添加水平為10 000 IU/kg時，可以顯著提高獺兔的飼料轉化率。因此，從生長性能指標分析可知，在本試驗條件下，生長獺兔飼糧的適宜維生素A添加水平為10 000 IU/kg。

3.2 飼糧維生素A添加水平與生長獺兔毛皮品質

獺兔是典型的皮用型兔，其經濟價值主要在于其毛皮，毛皮品質除了與品種有一定關系外，飼糧營養(yǎng)供應也不可忽視。毛皮品質可以從毛皮重量、毛皮面積、毛囊密度等諸多指標進行綜合評定。張福勛［8］通過研究發(fā)現，斷奶至3月齡的獺兔應保證足夠的營養(yǎng)水平與采食量，這樣可以提高商品獺兔的毛皮品質。任殿付等［9］通過研究發(fā)現飼糧中性洗滌纖維水平對斷奶至3月齡獺兔的皮毛重量影響極顯著。本試驗中，飼糧維生素A添加水平對生長獺兔毛皮重量和毛皮面積的影響極顯著，毛皮重量及毛皮面積都隨飼糧維生素A添加水平增加呈先升高后降低的變化，而且均在維生素A添加水平10 000 IU/kg時達到最大值。

毛囊根據發(fā)生時間的早晚和結構特點分為初級毛囊和次級毛囊，毛和絨都是由毛囊產生的，獺兔的初級毛囊長出的毛又被稱為針毛，次級毛囊長出的毛稱為絨毛。由于毛囊發(fā)育的優(yōu)劣是影響毛皮重量的關鍵因素，所以對獺兔毛囊進行研究為提高獺兔毛皮品質具有重要的理論和實踐意義。張焱如［10］研究絨山羊羊皮表明，絨山羊在剛出生時其所有的初級毛囊基本完全發(fā)育成熟，而只有少數的次級毛囊發(fā)育成熟，出生后山羊針毛的數量是不變的，只是隨著皮張大小的變化，針毛的密度發(fā)生變化，受營養(yǎng)等其他因素的影響，絨毛數量會有差異。Rasmussen等［11］研究表明，極低的飼糧蛋白質水平可能阻礙毛囊的再生，而毛囊的再生直接影響著冬季毛皮的絨毛密度。本試驗中飼糧維生素A添加水平對毛囊密度、初級毛囊密度、次級毛囊密度及S/P均無顯著影響，可能與5組飼糧蛋白質水平一致有關。

3.3 飼糧維生素A添加水平與生長獺兔血清和肝臟維生素A沉積

飼糧維生素A添加水平與體內維生素A的狀況密切相關，維生素A的體內代謝受飼糧中維生素A含量的影響很大［12-13］。血清維生素A和肝臟維生素A含量是監(jiān)測動物機體維生素A的營養(yǎng)狀況的常用指標［14］。Shaik 等［15］對鱸魚的研究發(fā)現，血清維生素A含量在飼糧維生素A添加水平在210～3 764 IU/kg范圍內，與飼糧維生素A添加水平呈正相關，在高水平維生素A飼糧下達到平臺期而不再升高。本研究發(fā)現，飼糧維生素A添加水平對血清中維生素A含量影響顯著，當飼糧維生素A添加水平在0～20 000 IU/kg范圍內時，隨飼糧維生素A添加水平增加，血清維生素A含量呈升高趨勢，當飼糧維生素A添加水平超過20 000 IU/kg后，血清維生素A含量趨于平穩(wěn);飼糧維生素A添加水平對肝臟中維生素A含量影響顯著，隨飼糧維生素A添加水平增加，肝臟維生素A含量呈升高趨勢，且呈現線性關系。

3.4 飼糧維生素A添加水平與生長獺兔血清生化指標

梁鴻雁等［12］以獺兔為研究對象研究發(fā)現，血清維生素A含量隨飼糧維生素A添加水平的提高而有升高的趨勢，但不顯著，血清UN含量隨飼糧維生素A添加水平的提高而下降。謝登玉等［5］研究發(fā)現，飼糧維生素A添加水平對肉兔血液TG和CHO含量無顯著影響，對血液UN含量影響顯著。在本試驗中，飼糧維生素A添加水平對血清UN含量影響顯著，10 000、20 000 IU/kg維生素A添加組顯著低于其他組，對血清ALB含量影響顯著，對血清 TP、TG、CHO、HDL和 LDL含量影響均不顯著。

3.5 飼糧維生素A添加水平與生長獺兔血清和肝臟抗氧化性能

GSH-Px是動物體內廣泛存在的一種催化過氧化氫分解的酶，能催化已形成的過氧化氫生成水和氧氣，并防止過氧化物進一步水解產生有害物質 MDA。Palacios等［16］報道維生素 A缺乏大鼠的肝組織中GSH-Px活性顯著低于正常對照組動物。Dogra等［17］試驗表明維生素A缺乏使小鼠肺中超氧化物歧化酶(SOD)活性顯著下降。Surai等［18］研究發(fā)現，大劑量維生素 A攝入可降低雞SOD活性，促進體內脂質過氧化反應，使機體抗氧化能力減弱。李英哲等［19］研究發(fā)現，維生素A完全缺乏組和輕度缺乏組的大鼠血清、肝臟及腦組織的SOD活性顯著下降，全血、肝臟及腦組織GSH-Px活性顯著下降，而血清、肝臟及腦組織MDA含量顯著升高。本研究結果與此相似，飼糧維生素A添加水平對血清和肝臟GSH-Px活性影響極顯著，對血清T-SOD活性影響極顯著，對肝臟T-SOD活性影響顯著，當飼糧維生素A添加水平在0～10 000 IU/kg范圍內時，隨飼糧維生素A添加水平增加，血清和肝臟GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趨勢，當飼糧維生素A添加水平超過10 000 IU/kg時，都趨于平穩(wěn);飼糧維生素A添加水平對血清和肝臟MDA含量影響顯著，隨飼糧維生素A添加水平增加，MDA含量呈降低趨勢。飼糧維生素A添加水平對肝臟T-AOC影響不顯著，但隨飼糧維生素A添加水平增加，T-AOC呈先升高后降低趨勢。飼糧中添加維生素A可以極大地改善血清和肝臟的抗氧化性能。

4 結論

綜合本試驗測定的指標可以得出，生長獺兔的飼糧適宜維生素A添加水平為10 000 IU/kg。

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