沈麗華 肖 江 (復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院產(chǎn)科，上海 201700)

子宮內(nèi)膜樣腺癌是由子宮內(nèi)膜發(fā)生的上皮性惡性腫瘤，通常伴有腺體分化，具有浸潤(rùn)子宮肌壁及遠(yuǎn)處擴(kuò)散的潛能〔1〕。腫瘤進(jìn)展中常表現(xiàn)為多種蛋白異?！?〕。白細(xì)胞分化抗原(CD)147是腫瘤形成過(guò)程中產(chǎn)生的一種蛋白，在多種腫瘤中表達(dá)，對(duì)促進(jìn)腫瘤發(fā)生和進(jìn)展有一定作用〔3，4〕。真核翻譯起始因子(EIF)3h和5A2是EIF家族中最重要的亞基，能特異性識(shí)別真核細(xì)胞mRNA 5'端的7甲基鳥(niǎo)苷酸的帽結(jié)構(gòu)，同時(shí)有效啟動(dòng)mRNA翻譯過(guò)程，其也可能是mRNA翻譯過(guò)程中最有效的限速因子〔5，6〕。研究認(rèn)為二者可能在腫瘤形成過(guò)程起明顯促進(jìn)作用〔7，8〕。本文關(guān)注子宮內(nèi)膜樣腺癌患者術(shù)后組織中 CD147、EIF3h和5A2表達(dá)及其相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1 一般資料 2010年1月至2013年6月我院婦產(chǎn)科行子宮內(nèi)膜樣腺癌根治手術(shù)患者142例為觀察組，術(shù)后組織均經(jīng)病理醫(yī)師確診，年齡52～76〔平均(62.3±5.4)〕歲。經(jīng)病理學(xué)確診為復(fù)雜性增生的子宮內(nèi)膜組織97例為對(duì)照組，年齡51～74〔平均(63.4±5.5)〕歲。經(jīng)病理學(xué)確診為子宮內(nèi)膜單純性增生的組織97例為正常對(duì)照組，年齡51～76〔平均(61.2±4.4)〕歲。3組常規(guī)資料無(wú)明顯差別。

1.2 CD147、EIF3h和5A2蛋白表達(dá)檢測(cè) CD147、EIF3h和5A2蛋白濃縮液均購(gòu)自Santa Cruz公司，SP試劑盒、DAB顯色劑等購(gòu)自北京博奧森生物工程公司。濃縮液按不同比例稀釋后進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選取最理想的配比濃度用于正式實(shí)驗(yàn)。正式實(shí)驗(yàn)均采用免疫組化二步法，DAB顯色。操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格質(zhì)量控制，減少人為誤差。

1.3 CD147、EIF3h和5A2結(jié)果判定 CD147以細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)，EIF3h和5A2以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)，每張切片中選擇染色較集中的上皮細(xì)胞區(qū)域(熱點(diǎn)區(qū))，選擇5個(gè)高倍(400倍)視野，計(jì)算陽(yáng)性率平均值，以陽(yáng)性率≥5%為陽(yáng)性，以陽(yáng)性率＜5%為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SAS6.12軟件進(jìn)行 χ2檢驗(yàn)和相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 3組CD147、EIF3h和5A2表達(dá)陽(yáng)性率的比較 CD147、EIF3h和5A2表達(dá)在正常對(duì)照組、對(duì)照組和觀察組有增高趨勢(shì)(P ＜0.000 1)。見(jiàn)表1。

表1 3組CD147、EIF3h和5A2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率比較〔n(%)〕

2.2 觀察組CD147、EIF3h和5A2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率在不同臨床特征中的比較 觀察組CD147、EIF3h和5A2陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤最大徑、肌層浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及是否累犯宮頸管密切相關(guān)。見(jiàn)表2。

2.3 觀察組CD147、EIF3h和5A2表達(dá)相關(guān)性 觀察組EIF3h和5A2(r=0.56，P=0.010 9)表達(dá)呈正相關(guān)性，其他指標(biāo)間無(wú)相關(guān)性。

表2 觀察組CD147、EIF3h和EIF5A2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率在不同臨床特征中比較〔n(%)〕

3 討論

子宮內(nèi)膜樣腺癌通常起源于子宮體，少數(shù)也可起源于子宮下段，大體形態(tài)上常表現(xiàn)為增大的子宮腔內(nèi)可見(jiàn)明顯腫塊，部分病例表現(xiàn)為子宮內(nèi)膜彌漫性增厚〔9〕。目前其病變發(fā)生機(jī)制尚不清楚，但是相關(guān)基因和蛋白表達(dá)失調(diào)是促進(jìn)腫瘤性病變的重要因素。研究顯示翻譯起始階段40 S核糖體與mRNA結(jié)合需要一些因子幫助，而由EIF4E、4A和4G組成的起始因子EIF4F復(fù)合物能夠與mRNA5＇-端帽子結(jié)構(gòu)結(jié)合。EIF4F和4B起始因子在mRNA5＇非翻譯區(qū)解開(kāi)mRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)。與40 S核糖體亞單位相互作用的一些真核翻譯起始因子包括EIF3h和5A2，二者能夠結(jié)合mRNA的5p-末端帽子結(jié)構(gòu)，隨后沿著mRNA尋找起始密碼子〔10，11〕。EIF3是一個(gè)含有10～13不同亞基的大翻譯起始復(fù)合物。EIF3h和5A2對(duì)復(fù)合物的功能起關(guān)鍵性作用，因此這些亞基稱(chēng)為核心亞基〔12，13〕。研究表明 EIF3h和5A2可以使Met復(fù)合物穩(wěn)定地結(jié)合到40 S核糖體亞基上，并有助于保存這個(gè)復(fù)合物在60 S核糖體亞單位之上〔14，15〕。當(dāng)外源性刺激或有絲分裂信號(hào)刺激細(xì)胞時(shí)，mTOR結(jié)合EIF3h和5A2復(fù)合物，并且使S6K1磷酸化。此種作用可以引起細(xì)胞異型增生，同時(shí)能誘導(dǎo)腫瘤進(jìn)展〔16，17〕。CD147最初是作為腫瘤細(xì)胞激活鄰近的成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的一種膠原酶而發(fā)現(xiàn)的，其基因定位于人染色體19p13.3，編碼269個(gè)氨基酸。學(xué)者〔18〕發(fā)現(xiàn)CD147的跨膜區(qū)域具有亮氨酸拉鏈的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。正常情況下，CD147不表達(dá)或低表達(dá)，在腫瘤性病變中高表達(dá)，不僅具有癌基因的特征，還對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移有明顯促進(jìn)作用〔19〕。

本實(shí)驗(yàn)提示CD147、EIF3h和5A2是促進(jìn)細(xì)胞癌變和惡性轉(zhuǎn)化的重要蛋白。吳繼華等〔16〕通過(guò)對(duì)76例結(jié)直腸癌患者EIF3h的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，認(rèn)為EIF3h可能通過(guò)促進(jìn)Ki67增殖起到促進(jìn)腫瘤發(fā)生和進(jìn)展的作用。而EIF5A2不僅可以促進(jìn)腫瘤增殖過(guò)程，還可以引起腫瘤與間質(zhì)的轉(zhuǎn)化，減少腫瘤細(xì)胞凋亡，加速腫瘤惡變。因此EIF3h和5A2異常表達(dá)使腫瘤發(fā)展加速。CD147具有調(diào)節(jié)單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的活性，對(duì)腫瘤性的免疫應(yīng)答、細(xì)胞繁殖等生物學(xué)過(guò)程均有影響，并引起上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化。本文提示CD147、EIF3 h和5A2蛋白參與腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，也證實(shí)三者對(duì)子宮內(nèi)膜樣腺癌病變進(jìn)展的促進(jìn)作用。EIF3h和5A2具有正向協(xié)同作用，機(jī)制可能與二者同源有一定關(guān)系，但是EIF3h和5A2對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖和血管生成均有影響，因此二者的協(xié)同作用也可能與腫瘤細(xì)胞的失控性增殖和血管生成有關(guān)〔20，21〕，即通過(guò)增殖活性和促進(jìn)血管生成將EIF3h和5A2聯(lián)系起來(lái)，共同促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。但是其具體調(diào)節(jié)通路需要更多實(shí)驗(yàn)證實(shí)。

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