李勝發(fā)，白垚（重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院檢驗科 400016）

血常規(guī)檢驗，對人體健康評估、保健預防、疾病診斷治療有其重要的參考依據(jù)。血常規(guī)檢驗由最初手工分析2～3個項目，發(fā)展到血細胞分析儀的自動化檢測，大大提高了血常規(guī)檢測效率，同一份標本，也會報告出數(shù)十個檢測項目，為報告使用者提供更多、更細致的參考依據(jù)。如何監(jiān)管自動化血細胞分析儀的分析過程和分析質(zhì)量，室內(nèi)質(zhì)控具有非常重要的監(jiān)控作用。但是，室內(nèi)質(zhì)控圖還需要人為判斷儀器運行的穩(wěn)定性和準確度。如何解讀室內(nèi)質(zhì)控圖，就必須了解室內(nèi)質(zhì)控構(gòu)成的要素，包括儀器、試劑、質(zhì)控品、操作手冊等。目前所用的血常規(guī)質(zhì)控品基本上都是較短有效期的全血標本，廠家生產(chǎn)質(zhì)控品時，為了保證質(zhì)控品有足夠的質(zhì)量穩(wěn)定時間，就必須對全血標本進行防腐、細胞固定等處理?？紤]到血細胞分析儀的檢測原理，血常規(guī)質(zhì)控品的細胞成分只能半固定，所以血常規(guī)質(zhì)控品的細胞成分隨著儲藏時間的延長，細胞成分的質(zhì)量可能會發(fā)生一些變化，表現(xiàn)在室內(nèi)質(zhì)控圖上，可能會被誤認為是儀器的準確度發(fā)生了趨勢性漂移。本文就對血常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控圖中平均紅細胞體積（MCV）的變化趨勢作一個合理的分析。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 Sysmex XE－5000全自動血細胞分析儀、原裝配套試劑、校準品（SCS－1000）、中低兩水平質(zhì)控品。

1.2 方法

1.2.1 儀器準備儀器功能驗證由工程師進行，包括光源強度、水路、氣路、電源及機械運動部分的可重復性。

1.2.2 儀器性能驗證完全按照《中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準－臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量要求（WS／T 406－2012）》執(zhí)行。

1.2.3 儀器項目校準按照《血細胞分析的校準指南（WS／T 347－2011）》完成。

1.2.4 正確度保證溯源校準及驗證、參加衛(wèi)生和計劃省委委員會臨檢中心開展的血細胞分析正確度驗證［1］。

1.2.5 準確度保證室內(nèi)質(zhì)控、衛(wèi)生和計劃省委委員會臨檢中心室間質(zhì)評、Sysmex公司的在線質(zhì)控［1］。

1.2.6 確定室內(nèi)質(zhì)控圖（L－J）的中心線和標準差本室所用血常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控品由Sysmex提供配套的全血質(zhì)控品，有效期較短，因此應按照穩(wěn)定性較短的質(zhì)控品方法設(shè)定中性線（均值）和標準差。根據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版規(guī)定方法創(chuàng)建本室室內(nèi)質(zhì)控圖（L－J）的中心線和標準差［1］。

1.2.7 室內(nèi)質(zhì)控方法運用質(zhì)控品監(jiān)測室內(nèi)質(zhì)控的方式屬于分析中質(zhì)控［2］，每天標本分析前，執(zhí)行中低兩水平質(zhì)控品（echeck）監(jiān)測儀器運行狀態(tài)，儀器自動將質(zhì)控數(shù)據(jù)傳入實驗室信息系統(tǒng)（LIS）系統(tǒng)的質(zhì)控通道，只有室內(nèi)質(zhì)控在控后方可檢測臨床標本。室內(nèi)質(zhì)控時，應盡量與質(zhì)控品定值時的條件一致，包括開機后儀器預熱程度，監(jiān)測時間段，質(zhì)控品混勻方法等。

2 結(jié)果

2.1 Sysmex XE－5000全血細胞分析儀2013年3月1日至4月25日中低兩水平質(zhì)控品監(jiān)測43d的MCV 室內(nèi)質(zhì)控（L－J），見圖1。圖1顯示Sysmex XE－5000全血細胞分析儀的MCV有升高趨勢，儀器性能可能發(fā)生漂移。

圖1 Sysmex XE－5000 MCV 室內(nèi)質(zhì)控圖（L－J）

2.2 查看Sysmex公司的在線質(zhì)控系統(tǒng)（SNCS），該分析儀在SNCS系統(tǒng)的精密度指數(shù)（SDI）圖中沒有漂移趨勢，說明參加Sysmex公司在線質(zhì)控系統(tǒng)的約500臺血細胞分析儀的室內(nèi)質(zhì)控MCV 項目，隨著質(zhì)控品有效期臨近，均有升高趨勢。

2.3 該血細胞分析儀2013年4月28日執(zhí)行衛(wèi)生和計劃生育委員會臨檢中心全血細胞分析2013年第1次室間質(zhì)評物檢測，回報結(jié)果成績優(yōu)良，MCV 沒有系統(tǒng)偏倚。

3 討論

正確開展室內(nèi)質(zhì)控分析是對每批臨床標本準確度的重要保證［3－5］，失控規(guī)則的正確判斷能有效減少假失控率，降低檢測成本。現(xiàn)在市售血常規(guī)質(zhì)控品基本都是較短有效期的全血樣品，它是在全血樣品中加入適量的防腐劑和細胞固定劑。考慮到目前血細胞分析儀的檢測原理，某些項目需要將細胞破壞，檢測其內(nèi)容物，如血紅蛋白測定，表面活性劑月桂酸鈉破壞紅細胞后，將紅細胞內(nèi)容物轉(zhuǎn)化成十六烷基磺酸鈉血紅蛋白，使其與氰化高鐵血紅蛋白相似最大吸收峰的衍生物時，采用比色法測定，這就要求紅細胞不能完全固定，否則，血紅蛋白溶血劑就不能破壞紅細胞。有些項目如白細胞計數(shù)和分類，不但需要保持細胞完整，以及細胞體積大小基本不變，而且還要保證白細胞膜具有合適的通透性，使某些化學物質(zhì)如核酸熒光染料，進入細胞內(nèi)部，結(jié)合于細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的細胞核染色質(zhì)，血細胞分析儀檢測時，高能量激光才能使白細胞核染色質(zhì)結(jié)合的熒光染料變成可以檢測的熒光含量，從而進行白細胞計數(shù)和分類。因此，全血質(zhì)控樣品只能加入適量的固定劑，既要考慮全血樣品的保存周期，又要保證全血樣品中的細胞成分具有合適的活性。因此血常規(guī)質(zhì)控品，只能是半固定全血樣品，所以血細胞質(zhì)控品的保存時間不長，有效期較短。本文看到的室內(nèi)質(zhì)控MCV 項目，隨著質(zhì)控品有效期臨近，呈現(xiàn)升高趨勢，其原因可能是紅細胞經(jīng)過細胞固定劑的作用后，固定時間越長（離有效期越近），紅細胞膜越硬，剛性指數(shù)增高，不易變形，其體積就有逐漸增大的趨勢［6－7］。

但開瓶后的質(zhì)控樣品，不斷與空氣接觸，細胞膜呼吸增加，剛性指數(shù)下降，細胞柔變性增大，受稀釋液整理能力增強。同時，隨著開瓶次數(shù)增多，紅細胞內(nèi)水分逐漸丟失，其體積就會逐漸變小，因此質(zhì)控圖上可以看到，MCV 從某一天突然增高，后又逐漸降下來，這就是，一瓶質(zhì)控品從開瓶第1次使用到該瓶用完最后1次的整個表現(xiàn)過程。根據(jù)上述原因，結(jié)合有關(guān)正確度和準確度評判方法，判定全血細胞分析儀Sysmex XE－5000室內(nèi)質(zhì)控項目MCV 出現(xiàn)升高趨勢，并非儀器的正確度發(fā)生漂移，而是質(zhì)控品本身質(zhì)量的正常漂移所致。

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