周蓓

摘要：目的 桂枝、桃仁單用及配伍后對抗凝血作用的比較研究，以闡明兩者配伍關(guān)系。 方法 取昆明種小鼠50 只，隨機(jī)分 5組，分別為空白組、阿司匹林組、桂枝組、桃仁組、配伍組。分別灌胃給藥，連續(xù) 10 d。測定出血時間、凝血時間、凝血酶時間。 結(jié)果 與空白組比較，桂枝組能明顯延長凝血時間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），桃仁組、配伍組均能明顯延長出血時間和凝血酶時間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與桂枝組比較，配伍組明顯延長出血時間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 桂枝、桃仁配伍后較單藥桂枝抗凝血作用更強(qiáng)，符合七情相使的配伍關(guān)系。

關(guān)鍵詞： 桂枝；桃仁；配伍

中圖分類號： R285.6 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 ：A

文章編號 ：1007-2349（2014）01-0064-02

臨床常以桂枝、桃仁兩藥配伍基本構(gòu)成的方劑，利用通脈行瘀的特點(diǎn)，用來治療瘀血內(nèi)結(jié)的各種病證。目前實(shí)驗(yàn)報(bào)道多集中對單味藥或?qū)⒐鹬?桃仁放入中藥復(fù)方的藥效學(xué)研究，而對兩者配伍后的報(bào)道甚少。因此，本研究在中藥七情配伍理論的指導(dǎo)下，觀察桂枝-桃仁配伍后與單味藥相比，對小鼠出、凝血時間和凝血酶時間的影響，探討兩者的配伍關(guān)系。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 昆明種小鼠，體重為（20±2）g，雌雄各半，由廣西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。動物合格證號：SYXK 桂2011-0001。

1.2 藥物 桂枝為樟科喬木植物肉桂（Cinnamomum cassia Presl）的嫩枝[1]。桃仁為薔薇科小喬木桃[Prunus persica（L.）Batsch或山桃P.davidiana（Carr.）Franch.]的成熟種子[1]。桂枝、桃仁均購置廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院中藥房，并經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定教研室教授鑒定為正品。生產(chǎn)批號：20110701。阿司匹林腸溶片，25 mg/片，南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司。無菌生理鹽水，100 mL/瓶。

凝血酶時間測定試劑盒（液體），購自南京建成生物工程研究所。GB-204型電子秤，瑞士梅特勒-托利多儀器上海有限公司。內(nèi)徑1 mm，長15 cm的玻璃毛細(xì)管，華西醫(yī)科大學(xué)儀器廠。移液槍，上?？蠌?qiáng)儀器有限公司。磨砂載玻片、鑷子、剪刀、離心管1.5 mL、灌胃針頭、注射器、濾紙、秒表、解剖刀、小鼠固定器等均由廣西中藥藥效研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。

2 方法

2.1 分組 取昆明種小鼠50只，按小鼠體重隨機(jī)分5組：空白組；阿司匹林組；桂枝組；桃仁組；配伍組。

2.2 藥液制備 按照傳統(tǒng)煎煮法，將藥材桂枝、桃仁、桃仁-桂枝（1：1）分別煎煮。先將藥材置煎煮容器內(nèi)，加5～7倍量的自來水浸泡30 min，過濾。煎煮3遍，頭煎40 min，藥渣加3～5倍量水繼續(xù)煎煮，二煎20 min，混勻，合并2次濾液，濃縮至所需濃度。冷卻裝入滅菌藥瓶，置4℃冰箱備用。

2.3 處理方法 所有小鼠分籠飼養(yǎng)于廣西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。自由飲水、進(jìn)食，定期更換墊料，適應(yīng)環(huán)境3 d后，開始灌胃，灌胃嚴(yán)格遵循操作規(guī)則及濃度要求，減少由操作不當(dāng)引起的動物死亡。每日1次，連續(xù)10 d。灌胃均按0.2 mL/20 g?？瞻捉M給予等體積的生理鹽水。

2.4 觀察指標(biāo)及檢測方法

2.4.1 小鼠出血時間的測定 采用斷尾法[2]。末次給藥1 h后將小鼠固定，用毫米尺測量尾長度后，用手術(shù)剪于距尾尖1.5 mm處剪斷尾，待血液自行溢出開始計(jì)時，每間隔30 s用濾紙吸去血滴1次，直至血流自然停止（用濾紙吸時無血為止），即為出血時間。

2.4.2 小鼠凝血時間的測定 采用毛細(xì)玻管法[2]。末次給藥1 h后，將內(nèi)徑為1 mm，長度為15 cm的玻璃毛細(xì)管插入小鼠內(nèi)眥球后靜脈叢，至毛細(xì)玻管內(nèi)血柱超過10 cm時取出，平放于桌面，每隔30 s折斷毛細(xì)管約0.5 cm，并緩慢向左右拉開，觀察折斷處是否有血絲，自血液流入毛細(xì)管內(nèi)開始計(jì)時，至血凝絲出現(xiàn)為止，即為凝血時間。

采用玻片法[2]。末次給藥1 h后，將5號針頭插入小鼠眼眶內(nèi)，使血液自動流出，去掉第一滴血后，在載玻片上滴1滴血，直徑大約5 mm，立即用秒表計(jì)時，每隔30 s用大頭針自血滴邊緣向中間輕挑一次，當(dāng)有血絲挑起時停止計(jì)時，即為凝血時間。左右各測一次，取平均值。

2.4.3 小鼠凝血酶時間測定 小鼠來源、分組、給藥同前，末次給藥后1h摘眼球取全血，全血與0.109M的檸檬酸三鈉按9：1混合均勻，3000 rp離心15min，收集上層血漿，轉(zhuǎn)移到離心管中，預(yù)熱至37℃水浴，孵育3 min，加配制好的凝血酶試劑0.l mL，秒表記錄。實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒要求操作。

2.5 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS11.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差 （x[TX-*4]±s）表示，方差齊性，組間比較采用t檢驗(yàn)處理數(shù)據(jù)，若方差不齊，采用秩和檢驗(yàn)處理數(shù)據(jù)。均以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 對小鼠出血時間的影響 見表1。

3.2 對小鼠凝血時間的影響 見表2。

3.3 對小鼠凝血酶時間的影響 見表3。

4 討論

配伍理論是中藥復(fù)方的核心問題，藥對是中藥復(fù)方配伍中最基本、最常見和最簡單的形式，專指臨床上相對固定的兩味藥所組成的方劑。藥對桂枝、桃仁源于經(jīng)方，屬張仲景最具特色的配伍之一。中醫(yī)藥理論認(rèn)為，桂枝與桃仁兩藥配伍，共奏活血化瘀，消癥散結(jié)之效。其中桃仁味苦甘平，苦能泄降導(dǎo)下以祛瘀，甘能和暢氣血以生新，為活血通經(jīng)常用之藥；桂枝甘溫助陽，可行里達(dá)表，以“動”為用，有溫通一身之陽氣、流暢血脈而和血散瘀之功[3]。仲景化瘀消癥一類方劑如《金匱要略》桂枝茯苓丸、《傷寒論》桃核承氣湯、《金匱要略》鱉甲煎丸、“調(diào)經(jīng)祖方”的溫經(jīng)湯等均以此為基本藥對。

現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，絕大部分具有活血祛瘀作用的中藥均有不同程度的抗凝作用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為：正常的止血、凝血過程與血管壁的結(jié)構(gòu)與功能、凝血因子的含量及其活性等因素密切相關(guān)。桂枝具有抗菌、抗病毒、解熱鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)驚、抗驚厥、抗炎，對心血管作用等多種藥理活性[4]。其中，桂皮油能使血管擴(kuò)張，增強(qiáng)血液循環(huán)，改善外周循環(huán)的作用，桃仁提取物有顯著抑制血凝的作用，并且能擴(kuò)張外周血管，增加器官血流量[5]。本研究結(jié)果表明，與桂枝組比較，配伍組抗凝血的作用更強(qiáng)，符合七情理論“相使”的配伍關(guān)系，以桃仁為主，桂枝為輔的藥對配伍的功效優(yōu)于其中的單一藥物。本研究以期為桂枝、桃仁藥對的臨床合理遣藥組方提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為促進(jìn)桂枝-桃仁藥對的理論研究和臨床應(yīng)用提供參考。

參考文獻(xiàn)：

[1]國家藥典委員會.中國藥典[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：195-196.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].第2版，北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：8.

[3]郭延?xùn)|.張仲景運(yùn)用桂枝對藥探析[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2011，17（4）：430-431.

[4]《中華本草》委員會.中華本草[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：1626.

[5]何賽萍，徐曉東.桃核承氣湯析[J].浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1999：23（5）：9-11.endprint

摘要：目的 桂枝、桃仁單用及配伍后對抗凝血作用的比較研究，以闡明兩者配伍關(guān)系。 方法 取昆明種小鼠50 只，隨機(jī)分 5組，分別為空白組、阿司匹林組、桂枝組、桃仁組、配伍組。分別灌胃給藥，連續(xù) 10 d。測定出血時間、凝血時間、凝血酶時間。 結(jié)果 與空白組比較，桂枝組能明顯延長凝血時間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），桃仁組、配伍組均能明顯延長出血時間和凝血酶時間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與桂枝組比較，配伍組明顯延長出血時間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 桂枝、桃仁配伍后較單藥桂枝抗凝血作用更強(qiáng)，符合七情相使的配伍關(guān)系。

關(guān)鍵詞： 桂枝；桃仁；配伍

中圖分類號： R285.6 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 ：A

文章編號 ：1007-2349（2014）01-0064-02

臨床常以桂枝、桃仁兩藥配伍基本構(gòu)成的方劑，利用通脈行瘀的特點(diǎn)，用來治療瘀血內(nèi)結(jié)的各種病證。目前實(shí)驗(yàn)報(bào)道多集中對單味藥或?qū)⒐鹬?桃仁放入中藥復(fù)方的藥效學(xué)研究，而對兩者配伍后的報(bào)道甚少。因此，本研究在中藥七情配伍理論的指導(dǎo)下，觀察桂枝-桃仁配伍后與單味藥相比，對小鼠出、凝血時間和凝血酶時間的影響，探討兩者的配伍關(guān)系。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 昆明種小鼠，體重為（20±2）g，雌雄各半，由廣西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。動物合格證號：SYXK 桂2011-0001。

1.2 藥物 桂枝為樟科喬木植物肉桂（Cinnamomum cassia Presl）的嫩枝[1]。桃仁為薔薇科小喬木桃[Prunus persica（L.）Batsch或山桃P.davidiana（Carr.）Franch.]的成熟種子[1]。桂枝、桃仁均購置廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院中藥房，并經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定教研室教授鑒定為正品。生產(chǎn)批號：20110701。阿司匹林腸溶片，25 mg/片，南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司。無菌生理鹽水，100 mL/瓶。

凝血酶時間測定試劑盒（液體），購自南京建成生物工程研究所。GB-204型電子秤，瑞士梅特勒-托利多儀器上海有限公司。內(nèi)徑1 mm，長15 cm的玻璃毛細(xì)管，華西醫(yī)科大學(xué)儀器廠。移液槍，上海肯強(qiáng)儀器有限公司。磨砂載玻片、鑷子、剪刀、離心管1.5 mL、灌胃針頭、注射器、濾紙、秒表、解剖刀、小鼠固定器等均由廣西中藥藥效研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。

2 方法

2.1 分組 取昆明種小鼠50只，按小鼠體重隨機(jī)分5組：空白組；阿司匹林組；桂枝組；桃仁組；配伍組。

2.2 藥液制備 按照傳統(tǒng)煎煮法，將藥材桂枝、桃仁、桃仁-桂枝（1：1）分別煎煮。先將藥材置煎煮容器內(nèi)，加5～7倍量的自來水浸泡30 min，過濾。煎煮3遍，頭煎40 min，藥渣加3～5倍量水繼續(xù)煎煮，二煎20 min，混勻，合并2次濾液，濃縮至所需濃度。冷卻裝入滅菌藥瓶，置4℃冰箱備用。

2.3 處理方法 所有小鼠分籠飼養(yǎng)于廣西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。自由飲水、進(jìn)食，定期更換墊料，適應(yīng)環(huán)境3 d后，開始灌胃，灌胃嚴(yán)格遵循操作規(guī)則及濃度要求，減少由操作不當(dāng)引起的動物死亡。每日1次，連續(xù)10 d。灌胃均按0.2 mL/20 g?？瞻捉M給予等體積的生理鹽水。

2.4 觀察指標(biāo)及檢測方法

2.4.1 小鼠出血時間的測定 采用斷尾法[2]。末次給藥1 h后將小鼠固定，用毫米尺測量尾長度后，用手術(shù)剪于距尾尖1.5 mm處剪斷尾，待血液自行溢出開始計(jì)時，每間隔30 s用濾紙吸去血滴1次，直至血流自然停止（用濾紙吸時無血為止），即為出血時間。

2.4.2 小鼠凝血時間的測定 采用毛細(xì)玻管法[2]。末次給藥1 h后，將內(nèi)徑為1 mm，長度為15 cm的玻璃毛細(xì)管插入小鼠內(nèi)眥球后靜脈叢，至毛細(xì)玻管內(nèi)血柱超過10 cm時取出，平放于桌面，每隔30 s折斷毛細(xì)管約0.5 cm，并緩慢向左右拉開，觀察折斷處是否有血絲，自血液流入毛細(xì)管內(nèi)開始計(jì)時，至血凝絲出現(xiàn)為止，即為凝血時間。

采用玻片法[2]。末次給藥1 h后，將5號針頭插入小鼠眼眶內(nèi)，使血液自動流出，去掉第一滴血后，在載玻片上滴1滴血，直徑大約5 mm，立即用秒表計(jì)時，每隔30 s用大頭針自血滴邊緣向中間輕挑一次，當(dāng)有血絲挑起時停止計(jì)時，即為凝血時間。左右各測一次，取平均值。

2.4.3 小鼠凝血酶時間測定 小鼠來源、分組、給藥同前，末次給藥后1h摘眼球取全血，全血與0.109M的檸檬酸三鈉按9：1混合均勻，3000 rp離心15min，收集上層血漿，轉(zhuǎn)移到離心管中，預(yù)熱至37℃水浴，孵育3 min，加配制好的凝血酶試劑0.l mL，秒表記錄。實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒要求操作。

2.5 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS11.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差 （x[TX-*4]±s）表示，方差齊性，組間比較采用t檢驗(yàn)處理數(shù)據(jù)，若方差不齊，采用秩和檢驗(yàn)處理數(shù)據(jù)。均以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 對小鼠出血時間的影響 見表1。

3.2 對小鼠凝血時間的影響 見表2。

3.3 對小鼠凝血酶時間的影響 見表3。

4 討論

配伍理論是中藥復(fù)方的核心問題，藥對是中藥復(fù)方配伍中最基本、最常見和最簡單的形式，專指臨床上相對固定的兩味藥所組成的方劑。藥對桂枝、桃仁源于經(jīng)方，屬張仲景最具特色的配伍之一。中醫(yī)藥理論認(rèn)為，桂枝與桃仁兩藥配伍，共奏活血化瘀，消癥散結(jié)之效。其中桃仁味苦甘平，苦能泄降導(dǎo)下以祛瘀，甘能和暢氣血以生新，為活血通經(jīng)常用之藥；桂枝甘溫助陽，可行里達(dá)表，以“動”為用，有溫通一身之陽氣、流暢血脈而和血散瘀之功[3]。仲景化瘀消癥一類方劑如《金匱要略》桂枝茯苓丸、《傷寒論》桃核承氣湯、《金匱要略》鱉甲煎丸、“調(diào)經(jīng)祖方”的溫經(jīng)湯等均以此為基本藥對。

現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，絕大部分具有活血祛瘀作用的中藥均有不同程度的抗凝作用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為：正常的止血、凝血過程與血管壁的結(jié)構(gòu)與功能、凝血因子的含量及其活性等因素密切相關(guān)。桂枝具有抗菌、抗病毒、解熱鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)驚、抗驚厥、抗炎，對心血管作用等多種藥理活性[4]。其中，桂皮油能使血管擴(kuò)張，增強(qiáng)血液循環(huán)，改善外周循環(huán)的作用，桃仁提取物有顯著抑制血凝的作用，并且能擴(kuò)張外周血管，增加器官血流量[5]。本研究結(jié)果表明，與桂枝組比較，配伍組抗凝血的作用更強(qiáng)，符合七情理論“相使”的配伍關(guān)系，以桃仁為主，桂枝為輔的藥對配伍的功效優(yōu)于其中的單一藥物。本研究以期為桂枝、桃仁藥對的臨床合理遣藥組方提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為促進(jìn)桂枝-桃仁藥對的理論研究和臨床應(yīng)用提供參考。

參考文獻(xiàn)：

[1]國家藥典委員會.中國藥典[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：195-196.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].第2版，北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：8.

[3]郭延?xùn)|.張仲景運(yùn)用桂枝對藥探析[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2011，17（4）：430-431.

[4]《中華本草》委員會.中華本草[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：1626.

[5]何賽萍，徐曉東.桃核承氣湯析[J].浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1999：23（5）：9-11.endprint

摘要：目的 桂枝、桃仁單用及配伍后對抗凝血作用的比較研究，以闡明兩者配伍關(guān)系。 方法 取昆明種小鼠50 只，隨機(jī)分 5組，分別為空白組、阿司匹林組、桂枝組、桃仁組、配伍組。分別灌胃給藥，連續(xù) 10 d。測定出血時間、凝血時間、凝血酶時間。 結(jié)果 與空白組比較，桂枝組能明顯延長凝血時間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），桃仁組、配伍組均能明顯延長出血時間和凝血酶時間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與桂枝組比較，配伍組明顯延長出血時間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 桂枝、桃仁配伍后較單藥桂枝抗凝血作用更強(qiáng)，符合七情相使的配伍關(guān)系。

關(guān)鍵詞： 桂枝；桃仁；配伍

中圖分類號： R285.6 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 ：A

文章編號 ：1007-2349（2014）01-0064-02

臨床常以桂枝、桃仁兩藥配伍基本構(gòu)成的方劑，利用通脈行瘀的特點(diǎn)，用來治療瘀血內(nèi)結(jié)的各種病證。目前實(shí)驗(yàn)報(bào)道多集中對單味藥或?qū)⒐鹬?桃仁放入中藥復(fù)方的藥效學(xué)研究，而對兩者配伍后的報(bào)道甚少。因此，本研究在中藥七情配伍理論的指導(dǎo)下，觀察桂枝-桃仁配伍后與單味藥相比，對小鼠出、凝血時間和凝血酶時間的影響，探討兩者的配伍關(guān)系。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 昆明種小鼠，體重為（20±2）g，雌雄各半，由廣西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。動物合格證號：SYXK 桂2011-0001。

1.2 藥物 桂枝為樟科喬木植物肉桂（Cinnamomum cassia Presl）的嫩枝[1]。桃仁為薔薇科小喬木桃[Prunus persica（L.）Batsch或山桃P.davidiana（Carr.）Franch.]的成熟種子[1]。桂枝、桃仁均購置廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院中藥房，并經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定教研室教授鑒定為正品。生產(chǎn)批號：20110701。阿司匹林腸溶片，25 mg/片，南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司。無菌生理鹽水，100 mL/瓶。

凝血酶時間測定試劑盒（液體），購自南京建成生物工程研究所。GB-204型電子秤，瑞士梅特勒-托利多儀器上海有限公司。內(nèi)徑1 mm，長15 cm的玻璃毛細(xì)管，華西醫(yī)科大學(xué)儀器廠。移液槍，上?？蠌?qiáng)儀器有限公司。磨砂載玻片、鑷子、剪刀、離心管1.5 mL、灌胃針頭、注射器、濾紙、秒表、解剖刀、小鼠固定器等均由廣西中藥藥效研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。

2 方法

2.1 分組 取昆明種小鼠50只，按小鼠體重隨機(jī)分5組：空白組；阿司匹林組；桂枝組；桃仁組；配伍組。

2.2 藥液制備 按照傳統(tǒng)煎煮法，將藥材桂枝、桃仁、桃仁-桂枝（1：1）分別煎煮。先將藥材置煎煮容器內(nèi)，加5～7倍量的自來水浸泡30 min，過濾。煎煮3遍，頭煎40 min，藥渣加3～5倍量水繼續(xù)煎煮，二煎20 min，混勻，合并2次濾液，濃縮至所需濃度。冷卻裝入滅菌藥瓶，置4℃冰箱備用。

2.3 處理方法 所有小鼠分籠飼養(yǎng)于廣西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。自由飲水、進(jìn)食，定期更換墊料，適應(yīng)環(huán)境3 d后，開始灌胃，灌胃嚴(yán)格遵循操作規(guī)則及濃度要求，減少由操作不當(dāng)引起的動物死亡。每日1次，連續(xù)10 d。灌胃均按0.2 mL/20 g。空白組給予等體積的生理鹽水。

2.4 觀察指標(biāo)及檢測方法

2.4.1 小鼠出血時間的測定 采用斷尾法[2]。末次給藥1 h后將小鼠固定，用毫米尺測量尾長度后，用手術(shù)剪于距尾尖1.5 mm處剪斷尾，待血液自行溢出開始計(jì)時，每間隔30 s用濾紙吸去血滴1次，直至血流自然停止（用濾紙吸時無血為止），即為出血時間。

2.4.2 小鼠凝血時間的測定 采用毛細(xì)玻管法[2]。末次給藥1 h后，將內(nèi)徑為1 mm，長度為15 cm的玻璃毛細(xì)管插入小鼠內(nèi)眥球后靜脈叢，至毛細(xì)玻管內(nèi)血柱超過10 cm時取出，平放于桌面，每隔30 s折斷毛細(xì)管約0.5 cm，并緩慢向左右拉開，觀察折斷處是否有血絲，自血液流入毛細(xì)管內(nèi)開始計(jì)時，至血凝絲出現(xiàn)為止，即為凝血時間。

采用玻片法[2]。末次給藥1 h后，將5號針頭插入小鼠眼眶內(nèi)，使血液自動流出，去掉第一滴血后，在載玻片上滴1滴血，直徑大約5 mm，立即用秒表計(jì)時，每隔30 s用大頭針自血滴邊緣向中間輕挑一次，當(dāng)有血絲挑起時停止計(jì)時，即為凝血時間。左右各測一次，取平均值。

2.4.3 小鼠凝血酶時間測定 小鼠來源、分組、給藥同前，末次給藥后1h摘眼球取全血，全血與0.109M的檸檬酸三鈉按9：1混合均勻，3000 rp離心15min，收集上層血漿，轉(zhuǎn)移到離心管中，預(yù)熱至37℃水浴，孵育3 min，加配制好的凝血酶試劑0.l mL，秒表記錄。實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒要求操作。

2.5 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS11.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差 （x[TX-*4]±s）表示，方差齊性，組間比較采用t檢驗(yàn)處理數(shù)據(jù)，若方差不齊，采用秩和檢驗(yàn)處理數(shù)據(jù)。均以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 對小鼠出血時間的影響 見表1。

3.2 對小鼠凝血時間的影響 見表2。

3.3 對小鼠凝血酶時間的影響 見表3。

4 討論

配伍理論是中藥復(fù)方的核心問題，藥對是中藥復(fù)方配伍中最基本、最常見和最簡單的形式，專指臨床上相對固定的兩味藥所組成的方劑。藥對桂枝、桃仁源于經(jīng)方，屬張仲景最具特色的配伍之一。中醫(yī)藥理論認(rèn)為，桂枝與桃仁兩藥配伍，共奏活血化瘀，消癥散結(jié)之效。其中桃仁味苦甘平，苦能泄降導(dǎo)下以祛瘀，甘能和暢氣血以生新，為活血通經(jīng)常用之藥；桂枝甘溫助陽，可行里達(dá)表，以“動”為用，有溫通一身之陽氣、流暢血脈而和血散瘀之功[3]。仲景化瘀消癥一類方劑如《金匱要略》桂枝茯苓丸、《傷寒論》桃核承氣湯、《金匱要略》鱉甲煎丸、“調(diào)經(jīng)祖方”的溫經(jīng)湯等均以此為基本藥對。

現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，絕大部分具有活血祛瘀作用的中藥均有不同程度的抗凝作用。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為：正常的止血、凝血過程與血管壁的結(jié)構(gòu)與功能、凝血因子的含量及其活性等因素密切相關(guān)。桂枝具有抗菌、抗病毒、解熱鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)驚、抗驚厥、抗炎，對心血管作用等多種藥理活性[4]。其中，桂皮油能使血管擴(kuò)張，增強(qiáng)血液循環(huán)，改善外周循環(huán)的作用，桃仁提取物有顯著抑制血凝的作用，并且能擴(kuò)張外周血管，增加器官血流量[5]。本研究結(jié)果表明，與桂枝組比較，配伍組抗凝血的作用更強(qiáng)，符合七情理論“相使”的配伍關(guān)系，以桃仁為主，桂枝為輔的藥對配伍的功效優(yōu)于其中的單一藥物。本研究以期為桂枝、桃仁藥對的臨床合理遣藥組方提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為促進(jìn)桂枝-桃仁藥對的理論研究和臨床應(yīng)用提供參考。

參考文獻(xiàn)：

[1]國家藥典委員會.中國藥典[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：195-196.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].第2版，北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：8.

[3]郭延?xùn)|.張仲景運(yùn)用桂枝對藥探析[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2011，17（4）：430-431.

[4]《中華本草》委員會.中華本草[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：1626.

[5]何賽萍，徐曉東.桃核承氣湯析[J].浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1999：23（5）：9-11.endprint