張麗麗

【摘要】 目的：分析用AVE-763B型自動尿沉渣分析儀檢測紅細(xì)胞的影響因素。方法：采用AVE-763B型自動尿沉渣分析儀和顯微鏡檢測法分析了545份住院患者的尿液標(biāo)本，并將二者結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果：AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀檢測標(biāo)本紅細(xì)胞的假陽性率為15.2%，假陰性率為0，靈敏度為100%，特異度為84.8%。與顯微鏡檢測法相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)晶、上皮細(xì)胞核、酵母菌等是影響AVE-763B型自動尿沉渣分析儀檢測結(jié)果的主要因素。結(jié)論：為獲得準(zhǔn)確可靠的尿紅細(xì)胞檢測結(jié)果，應(yīng)以AVE-763B型自動尿沉渣分析儀進(jìn)行篩查并結(jié)合顯微鏡檢查。

【關(guān)鍵詞】 尿沉渣； 紅細(xì)胞； 尿沉渣分析儀

【Abstract】 Objective： To analyze the influencing factors regarding determination of urine red blood cells by AVE-763B automated urinalysis analyzer. Method： 545 samples of urine from hospitalized patients were tested by AVE-763B automated urinalysis analyzer and microscopic examination. The results were compared with statistics method. Result： The false-positive rate， false-negative rate， sensitivity and specificity of determination of urine red blood cells by AVE-763B automated urinalysis analyzer were 15.2%， 0，1%， 84.8% respectively. When compared with the microscopic examination group， the results were statistic difference （P<0.05）. The results showed that the crystal， epithelial cells， yeast were main factors of affecting the detected results by AVE-763B automated urinalysis analyzer. Conclusion： Discussion AVE-763B automated urinalysis analyzer must combine microscope examination in order to improve the urine examination quality.

【Key words】 Urinalysis； Erythrocytes； Urinalysis analyzer

First-authors address： Peoples Hospital of Yanjiang District， Ziyang 641300， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.25.045

尿液紅細(xì)胞（RBC）檢測對于泌尿系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷有重要的參考價值，因此血尿檢測的準(zhǔn)確性非常重要。AVE-763自動尿沉渣分析儀的問世，給尿沉渣篩選帶來了許多方便。它采用機(jī)器視覺技術(shù)對尿液有形成分進(jìn)行定量分析，樣本不需離心，通過擴(kuò)大計數(shù)面積提高陽性檢出率。但由于尿中多種有形成分十分復(fù)雜，因此在實際工作中該儀器常出現(xiàn)不能識別或誤判的現(xiàn)象，從而造成尿液紅細(xì)胞出現(xiàn)假陽性結(jié)果。筆者的實驗對這些影響因素進(jìn)行了觀察，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 隨機(jī)收集本院住院患者晨尿545份，其中男284份，女261份。

1.2 儀器及試劑 AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀及其配套試劑（湖南愛威公司）。

1.3 實驗方法 用一次性尿杯收集住院患者潔凈中段晨尿，充分混勻后倒入干凈試管約10 mL，每份標(biāo)本一分為二，其中一份用AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀作沉渣分析和干化學(xué)分析，另一份留作顯微鏡復(fù)檢對照用。嚴(yán)格按照AVE-763操作方法進(jìn)行尿液分析，所有標(biāo)本在取樣后2 h內(nèi)完成。鏡檢尿液以1000 g，離心5 min，留沉渣約0.2 mL，作顯微鏡檢查。AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀結(jié)果男RBC>4個/μL、女RBC>6個/μL為陽性；顯微鏡檢查結(jié)果RBC>3個/HP為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 使用SPSS 14.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)采用McNemar 字2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

在545份住院患者的標(biāo)本中，AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀提示紅細(xì)胞異常者132份，而顯微鏡檢查紅細(xì)胞陽性者58份，兩者符合率44%，差異具統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。按美國NCCLS文件規(guī)定[1]，尿沉渣細(xì)胞計數(shù)以顯微鏡檢查為標(biāo)準(zhǔn)，AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀檢測標(biāo)本紅細(xì)胞的假陽性率為15.2%，假陰性率為0，靈敏度為100%，特異度為84.8%。AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀與顯微鏡檢測結(jié)果的比較見表1。

AVE-763型自動尿沉渣分析儀和顯微鏡檢測不符合的74份標(biāo)本中，經(jīng)顯微鏡鏡檢確認(rèn)由結(jié)晶引起的紅細(xì)胞假陽性標(biāo)本有31份；因上皮細(xì)胞核引起的紅細(xì)胞假陽性標(biāo)本有17份；因細(xì)菌引起的紅細(xì)胞假陽性標(biāo)本有14份；因霉菌引起的紅細(xì)胞假陽性標(biāo)本有9份；因脂肪滴引起的紅細(xì)胞假陽性標(biāo)本3份。

3 討論

尿液中的有形成分是診斷泌尿系統(tǒng)疾病，尤其是腎臟疾病的重要檢測指標(biāo)[2]。尤其是尿液中的紅細(xì)胞，更是在腎臟疾病的診斷、治療、病情進(jìn)展以及預(yù)后判斷中有著非常重要的意義[3]。尿沉渣的檢測方法包括傳統(tǒng)離心法、標(biāo)準(zhǔn)鏡檢法、熒光染色流式細(xì)胞分析法和智能顯微鏡-圖像分析處理系統(tǒng)等[4]，其中尿沉渣檢查的經(jīng)典方法是標(biāo)本離心后在顯微鏡下進(jìn)行人工鏡檢。為了規(guī)范實驗方法學(xué)，中華醫(yī)學(xué)會檢驗分會推薦了尿沉渣規(guī)范化的檢測方法，即取10 mL尿液放入離心管內(nèi)，RCF400×g下離心5 min，準(zhǔn)確留取0.2 mL沉渣混勻，滴入細(xì)胞計數(shù)板內(nèi)，先用低倍鏡觀察，后用高倍鏡，計數(shù)細(xì)胞或管型，按XX/μL報告[5]。但是，人工鏡檢操作繁瑣、速度慢，容易出現(xiàn)人工誤差，且標(biāo)本有形成分達(dá)到一定濃度時將嚴(yán)重影響測定結(jié)果[4]。近年來，為了實現(xiàn)尿液有形成分檢測的標(biāo)準(zhǔn)化、快速化和自動化，其檢測方法已由人工檢查發(fā)展到了自動化檢測。智能成像分析技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)等已用于尿液分析，使得全自動尿沉渣分析儀的應(yīng)用越來越廣泛。目前，臨床使用的尿沉渣分析儀器種類較多，其檢測原理也不盡相同?；谥悄艹上穹治黾夹g(shù)技術(shù)的湖南愛威公司的AVE系列全自動尿沉渣分析儀是目前國內(nèi)使用較為廣泛的一種尿沉渣分析儀。AVE-763型自動尿沉渣分析儀按照經(jīng)典的顯微鏡鏡檢方法的流程來設(shè)計，工作時通過低倍鏡以多于人工鏡檢檢查量對樣品進(jìn)行掃描過篩，然后以低倍鏡抓取目標(biāo)定位后轉(zhuǎn)高倍鏡采集目標(biāo)（如細(xì)胞，管行，結(jié)晶等）的特征參數(shù)（如大小、軸比、形狀、紋理、梯度、顏色、灰度等），運(yùn)用計算機(jī)對其各種特征參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計，聚類，擬和，參照建立模型，自動識別出該圖像所代表的實物[6]。此儀器前端配有自動送樣裝置，在進(jìn)行尿沉渣定量分析時，操作者將樣本置入樣本架后，從進(jìn)樣、采集圖像、低倍過篩、低倍目標(biāo)跟蹤到高倍圖像處理全部由儀器自動完成，檢測速度為40～80個樣本/h，因而具備了使用簡單、高效、快速和標(biāo)本不需離心等優(yōu)點(diǎn)。目前，AVE-763型自動尿沉渣分析儀的可靠性即精密度、線性、互染、準(zhǔn)確性等方面的評價已有報道[7]。國內(nèi)也有學(xué)者對AVE-763尿沉渣分析儀檢測白細(xì)胞結(jié)果的影響因素及措施進(jìn)行了研究[8]，然而關(guān)于該儀器在檢測紅細(xì)胞準(zhǔn)確性方面的文章較少報道。

有學(xué)者研究認(rèn)為，AVE-763B檢測標(biāo)本出現(xiàn)偏差的原因是，形態(tài)不規(guī)則、處在不同平面和角度的細(xì)胞，被儀器拍攝時的形態(tài)與機(jī)器內(nèi)部儲存的典型細(xì)胞形態(tài)相比不一致，造成機(jī)器誤認(rèn)[9]。同時，還有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，尿液中大量的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型、上皮細(xì)胞、黏液絲等對AVE-763B尿沉渣分析儀的檢測結(jié)果影響較大[10-11]。筆者的研究結(jié)果顯示，AVE-763尿沉渣分析儀檢測紅細(xì)胞的假陰性率為0，靈敏度為100%，該結(jié)果提示當(dāng)紅細(xì)胞檢測結(jié)果為陰性時不必復(fù)檢。然而，研究結(jié)果同樣顯示，AVE-763尿沉渣分析儀檢測紅細(xì)胞的假陽性率為15.2%，特異度為84.8%。其中造成假陽性的主要因素有：（1）在影響檢測尿紅細(xì)胞準(zhǔn)確性的因素中結(jié)晶占首位。其原因可能因為草酸鈣結(jié)晶、非晶形鹽類和藥物結(jié)晶增多時，其大小、形態(tài)與紅細(xì)胞類似而被誤判，以草酸鈣結(jié)晶最為多見。草酸鈣結(jié)晶是尿中最常見的有形結(jié)晶之一，在酸性尿液中形態(tài)有啞鈴形、球形及折光性強(qiáng)的八面體，有時也在中性或堿性尿中出現(xiàn)，不溶于乙酸。（2）住院患者，尤其是糖尿病患者和腦梗死患者，尿中?？沙霈F(xiàn)大量酵母菌。酵母菌的形態(tài)和大小與紅細(xì)胞類似，也容易被儀器誤判為紅細(xì)胞。（3）大量上皮細(xì)胞、細(xì)菌、脂肪滴等存在于尿液中時也容易造成儀器識別錯誤。常見于被白帶污染的尿液標(biāo)本、細(xì)菌性尿路感染患者的尿液標(biāo)本以及經(jīng)婦科外用藥后患者的尿液標(biāo)本。

研究結(jié)果表明，AVE-763B全自動尿沉渣分析儀采用不離心、多數(shù)量的計數(shù)方式，具有較高的靈敏度，用于尿液有形成分快速篩選是可取的，但它在準(zhǔn)確辨認(rèn)有形成分的能力方面有一定局限性，這一研究與國內(nèi)很多學(xué)者的研究一致[12-14]。為了提高儀器的準(zhǔn)確性，應(yīng)重視儀器的日常維護(hù)保養(yǎng)工作，包括調(diào)好顯微鏡的焦距、保持流動池清潔等，以提高儀器的識別率，減少對檢測結(jié)果的影響。由于顯微鏡鏡檢是形態(tài)學(xué)檢查的金標(biāo)準(zhǔn)。因此，在臨床工作中當(dāng)尿沉渣分析儀測定結(jié)果出現(xiàn)上述成分且紅細(xì)胞結(jié)果異常時，先采用儀器審核程序取消誤判結(jié)果，同時進(jìn)行顯微鏡復(fù)檢。又因尿中紅細(xì)胞的形態(tài)常受尿的pH值、比重、尿液放置時間以及病理情況的影響而呈現(xiàn)很大的變化，有時單純用顯微鏡復(fù)檢也難以辨認(rèn)，必須結(jié)合尿干化學(xué)試紙法結(jié)果綜合判斷[15]，從而提高檢測準(zhǔn)確性，為臨床診斷與治療提供有力依據(jù)。

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（收稿日期：2014-03-05） （本文編輯：王宇）