柳 立，鄧小華，周冀衡，樊在斗，劉曉穎

（1. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)煙草研究院，湖南 長(zhǎng)沙410128；2. 大理州煙草公司，云南 大理615000）

紅花大金元（簡(jiǎn)稱紅大）為云南清香型煙葉風(fēng)格的代表品種之一[1]。煙草中存在多種酚類化合物，主要是綠原酸和蕓香苷，其含量可占多酚總量的75%～95%，常被作為優(yōu)質(zhì)煙葉化學(xué)成分評(píng)價(jià)指標(biāo)之一[2-4]。近年來(lái)，有關(guān)烤煙香氣質(zhì)量與多酚物質(zhì)含量的相關(guān)性研究較多。例如：武麗、蘇強(qiáng)等[5-7]研究了不同種植區(qū)域烤煙多酚類物質(zhì)含量的差異，認(rèn)為云南、貴州等省的烤煙多酚類物質(zhì)含量顯著高于其他產(chǎn)區(qū)，且多酚含量高的煙葉，其香氣質(zhì)量較好；劉陽(yáng)等[8]發(fā)現(xiàn)中煙100 的多酚類物質(zhì)含量較高，云煙85 和云煙87 的多酚類物質(zhì)含量相對(duì)較低；俞京等[9]采用典型相關(guān)分析方法研究了不同多酚種類與感官評(píng)吸質(zhì)量指標(biāo)存在一定的關(guān)系；楊虹琦等[10]認(rèn)為綠原酸、蕓香苷含量較高時(shí)，其香氣質(zhì)和香氣量也較高；過(guò)偉民等[11]通過(guò)典型相關(guān)分析方法證實(shí)了綠原酸和蕓香苷與香氣質(zhì)的正相關(guān)性較強(qiáng)。但是，對(duì)云南紅大烤煙品種的多酚類物質(zhì)含量與感官評(píng)吸質(zhì)量的相關(guān)性報(bào)道較少。因此，試驗(yàn)通過(guò)液相色譜法測(cè)定了云南紅大品種烤煙的綠原酸和蕓香苷含量，并利用灰色關(guān)聯(lián)法探索了多酚含量對(duì)感官評(píng)吸質(zhì)量的影響，旨在為提高烤煙的香氣質(zhì)和香氣量提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

于2009年以云南省各鄉(xiāng)鎮(zhèn)為單位安排86個(gè)采樣點(diǎn)，品種為當(dāng)?shù)刂髟云贩N。取樣要求選擇該鄉(xiāng)鎮(zhèn)有代表性、土壤及水利條件較好、施肥合理、營(yíng)養(yǎng)適中、各生育期生長(zhǎng)發(fā)育正常、長(zhǎng)勢(shì)中等、病蟲害輕、適時(shí)成熟的地塊進(jìn)行取樣。分別選取紅大和對(duì)照品種中生長(zhǎng)勢(shì)有代表性、烘烤正常的C3F（中橘三）煙葉作為樣品。共取煙葉樣品106個(gè)，其中紅大（HD）品種49個(gè)，K326 品種13個(gè)，云煙87（Y87）品種28個(gè)，云煙85（Y85）品種12個(gè)，NC297 品種4個(gè)。

1.2 樣品測(cè)定及數(shù)據(jù)分析

樣品統(tǒng)一寄送到湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)煙草研究院進(jìn)行檢測(cè)分析，其中綠原酸和蕓香苷含量采用液相色譜法測(cè)定[12]。另外，取試驗(yàn)煙葉回潮到含水率18.0%～21.0%，于塑料袋中密閉存放約2 h 后切絲，調(diào)節(jié)煙絲含水率在12.5%左右下卷制成卷煙；依據(jù)單料煙評(píng)吸基本要求，參照標(biāo)準(zhǔn)，由專職評(píng)吸人員按單料煙9 分制評(píng)吸方法對(duì)卷煙的香氣特征、煙氣特征和口感特征進(jìn)行評(píng)價(jià)，其中香氣特征包括：香氣質(zhì)、香氣量、透發(fā)性、雜氣；煙氣特征包括：勁頭、濃度、細(xì)膩度、成團(tuán)性；口感特征包括：刺激性、干燥度、干凈程度、回甜度。

根據(jù)不同烤煙品種、不同煙田類型、不同海拔高度對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析，研究品種、煙田、海拔高度對(duì)煙葉綠原酸和蕓香苷含量的影響。同時(shí)，將紅大煙葉樣品看作一個(gè)灰色系統(tǒng)，以感官評(píng)吸質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)為比較數(shù)列（子序列）、綠原酸和蕓香苷為參考數(shù)列（母序列）進(jìn)行灰色關(guān)聯(lián)分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19 和Excel 等統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 云南紅大品種烤煙綠原酸和蕓香苷含量的描述性統(tǒng)計(jì)

由表1 可知，云南紅大品種綠原酸和蕓香苷含量存在中等變異，綠原酸含量的變異系數(shù)小于蕓香苷的。綠原酸的偏度系數(shù)小于0，屬負(fù)偏態(tài)；蕓香苷的偏度系數(shù)大于0，屬正偏態(tài)；偏度系數(shù)絕對(duì)值在0～1，說(shuō)明偏離中心值不遠(yuǎn)。綠原酸、蕓香苷的峰度系數(shù)絕對(duì)值在0～1，屬低闊峰；綠原酸的峰度系數(shù)小于0，數(shù)據(jù)分布比較分散；蕓香苷的峰度系數(shù)大于0，數(shù)據(jù)分布比較集中。

表1 云南紅大品種烤煙綠原酸和蕓香苷含量描述性統(tǒng)計(jì)

2.2 不同品種烤煙綠原酸和蕓香苷含量差異

由圖1 可知，5個(gè)烤煙品種綠原酸含量從高到低排列依次為HD＞K326＞Y87＞Y85＞NC297，各品種間差異不顯著（F=0.606，Sig.=0.659）。不同烤煙品種的蕓香苷含量從高到低排列依次為HD＞Y87＞Y85＞K326＞NC297，紅大蕓香苷含量顯著高于其他品種（F=10.372，Sig.=0.000）。

圖1 不同品種烤煙綠原酸和蕓香苷含量比較

2.3 不同煙田類型烤煙綠原酸和蕓香苷含量差異

按田煙（PLT，稻田種植的烤煙，23個(gè)樣品）和地?zé)煟―LT，旱地種植的烤煙，26個(gè)樣品），分別統(tǒng)計(jì)紅大品種的綠原酸和蕓香苷含量。由圖2 可知，不同煙田類型種植的紅大品種，綠原酸含量以田煙大于地?zé)?，蕓香苷含量以是地?zé)煷笥谔餆?。方差分析結(jié)果，地?zé)熀吞餆熼g烤煙綠原酸（F=0.2.344，Sig.=0.133）和蕓香苷（F=0.894，Sig.=0.349）含量差異均不顯著。

2.4 不同海拔高度烤煙綠原酸和蕓香苷含量差異

圖2 不同煙田類型紅大品種烤煙綠原酸和蕓香苷含量比較

云南大理屬低緯度高海拔煙區(qū)，烤煙種植主要分布在海拔1 500～2 400 m 的范圍內(nèi)。根據(jù)當(dāng)?shù)乜緹煼N植的實(shí)際情況，將海拔高度分為3 類：高海拔（HA＞2 000 m）、中海拔（MA=2 000～1 700 m）、低海拔（LA＜1 700 m），其樣品分別為15個(gè)、29個(gè)、5個(gè)。由圖3 可知，不同海拔高度種植的紅大品種綠原酸含量從高到低排列依次為低海拔＞高海拔＞中海拔，蕓香苷含量從高到低排列依次為高海拔＞中海拔＞低海拔。方差分析結(jié)果表明，綠原酸（F=1.458，Sig.=0.244）和蕓香苷（F=0.427，Sig.=0.655）含量在不同海拔間差異不顯著。

圖3 不同海拔高度紅大品種烤煙綠原酸和蕓香苷含量比較

2.5 紅大品種綠原酸和蕓香苷含量與感官評(píng)吸質(zhì)量的灰色關(guān)聯(lián)分析

對(duì)綠原酸和蕓香苷和評(píng)吸質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化變換，取△min=0，ρ=0.5，其灰色關(guān)聯(lián)矩陣見表2。按照灰色關(guān)聯(lián)分析原則，灰色關(guān)聯(lián)系數(shù)大的數(shù)列與參考數(shù)列的關(guān)系最為密切，灰色關(guān)聯(lián)系數(shù)小的數(shù)列與參考數(shù)列的關(guān)系最為疏遠(yuǎn)[13-14]。從表2 中可以看出，綠原酸與評(píng)吸質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)的關(guān)聯(lián)度以回甜度最高，干凈程度其次，香氣量最低；回甜度、干凈程度與煙葉口感特征相關(guān)性較高，表明綠原酸主要影響煙葉的口感特征。蕓香苷與評(píng)吸質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)的關(guān)聯(lián)度以透發(fā)性最高，香氣質(zhì)其次，勁頭最低；透發(fā)性、香氣質(zhì)與煙葉的香氣特征相關(guān)性較高，表明蕓香苷主要影響煙葉的香氣特征。

表2 綠原酸和蕓香苷與評(píng)吸質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)的灰色關(guān)聯(lián)矩陣

3 討論

煙葉中多酚類物質(zhì)是影響烤煙品質(zhì)的重要香氣前體物[15]，其在調(diào)制與醇化的過(guò)程中降解生成的一系列物質(zhì)能賦予卷煙優(yōu)雅的香氣，增加香氣量，尤其是降解生成的糖骯可增加卷煙抽吸時(shí)口腔的生津回甜感[16]。紅大品種煙葉含有較高的多酚類物質(zhì)，特別是蕓香苷含量較高，這也許是紅大品種煙葉具有典型清甜香風(fēng)格特征和良好品質(zhì)的關(guān)鍵內(nèi)在原因之一。

蕓香苷分子含有兩個(gè)苯環(huán)，具有吸收紫外光較強(qiáng)的特性，所以它可以起到“紫外光過(guò)濾器”的作用，以減少紫外光對(duì)植物細(xì)胞的傷害。云南大理州地處低緯高原，其強(qiáng)烈的紫外光誘導(dǎo)紅大品種生物合成和積累較多的蕓香苷，以適應(yīng)生存環(huán)境，這可能是紅大品種更能適應(yīng)云南低緯高原生態(tài)環(huán)境條件一個(gè)重要原因，也成就了紅大品種是最能彰顯云南清香型煙葉風(fēng)格的代表性品種。

蘇強(qiáng)等比較了福建、江西、河南、湖南、山東、貴州、云南等煙區(qū)烤煙的綠原酸和蕓香苷含量差異，其中各地烤煙的綠原酸含量差異不顯著，而貴州和云南烤煙的蕓香苷與福建、江西、河南、湖南、山東存在顯著差異，但貴州和云南烤煙之間的差異不顯著，福建、江西、河南、湖南、山東等省之間的差異也不顯著。楊虹琦等[17]研究認(rèn)為湖南省不同煙區(qū)烤煙蕓香苷含量差異不顯著。武麗等研究了遼寧、安徽、福建、貴州、云南等省烤煙多酚類物質(zhì)含量差異，其中貴州和云南兩省烤煙多酚類物質(zhì)含量的差異不顯著，但分別與遼寧、安徽、福建等省烤煙的多酚類物質(zhì)含量存在顯著差異。劉陽(yáng)等比較了豫中地區(qū)云煙85、云煙87、NC89 和中煙100 等品種的綠原酸和蕓香苷含量，發(fā)現(xiàn)云煙85 和云煙87 兩個(gè)品種的差異不顯著，但分貝與中煙100 存在顯著差異。從以上研究可以發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)間烤煙綠原酸和云香苷存在差異，海拔或緯度相近煙區(qū)之間差異不顯著，但海拔或緯度相距較遠(yuǎn)煙區(qū)之間存在顯著差異；不同品種間烤煙綠原酸和云香苷也存在差異，親緣關(guān)系較近品種間差異不顯著，但親緣關(guān)系較遠(yuǎn)品種間存在顯著差異。該研究認(rèn)為云南大理紅大品種綠原酸和蕓香苷的含量在不同煙田類型、不同海拔、不同生態(tài)區(qū)域差異不顯著，但紅大品種的蕓香苷含量顯著高于其他品種，其結(jié)果與上述研究結(jié)果基本上是一致的。從以上研究結(jié)論可以推測(cè)，生態(tài)環(huán)境對(duì)烤煙綠原酸和蕓香苷含量的影響主要是由大尺度生態(tài)環(huán)境差異導(dǎo)致的（云南和貴州都屬于低緯高原煙區(qū)）。

Kallianos[18]認(rèn)為某些酚類化合物通過(guò)燃燒期間發(fā)生的降解和重排反應(yīng)，可產(chǎn)生增加煙氣香味的揮發(fā)性化合物，因而在提高煙葉品質(zhì)的研究中，多酚類物質(zhì)是不容忽視的。該研究采用灰色關(guān)聯(lián)分析表明綠原酸主要影響吃味，蕓香苷主要影響香氣。這主要與綠原酸和蕓香苷在熱裂解中的產(chǎn)物不同有關(guān)。

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