劉新芳 姜雅秋

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院心血管內(nèi)科，吉林 長(zhǎng)春 130021)

有研究〔1～3〕證實(shí)內(nèi)皮素(ET)-1、血管緊張素(Ang)Ⅰ、AngⅡ、髓過(guò)氧化物酶(MPO)等血管活性因子在心肌缺血再灌注過(guò)程中參與了心肌細(xì)胞再灌注損傷(MIRI)。高同型半胱氨酸血癥(Hhcy)是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。已有研究證實(shí)〔4,5〕，Hhcy可導(dǎo)致急性心肌梗死(AMI)的發(fā)生，但其對(duì)心肌梗死后MIRI的影響目前少有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)探討Hhcy是否可影響MIRI后上述因子的產(chǎn)生與釋放，并評(píng)價(jià)辛伐他汀對(duì)Hhcy大鼠MIRI后心肌的保護(hù)作用并探討其可能的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料 8周齡(150～200 g體重)SD大鼠〔沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK(遼)2010-0001，遼寧省科學(xué)技術(shù)廳簽發(fā)〕，L-半胱氨酸(Sigma公司產(chǎn)品)，辛伐他汀(片劑、天津施維雅制藥有限公司)，同型半胱氨酸(Hcy)、ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO檢測(cè)試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2方法 SD大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、正常對(duì)照組、Hhcy模型組和辛伐他汀干預(yù)組，每組12只。空白對(duì)照組、正常對(duì)照組分別給予腹腔注射、灌胃生理鹽水5 ml·kg-1·d-1；模型組給予腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml·kg-1·d-1，灌胃生理鹽水5 ml·kg-1·d-1；干預(yù)組給予腹腔注射2% L-半胱氨酸5 ml·kg-1·d-1，灌胃辛伐他汀3.5 ml·kg-1·d-1，所有大鼠均飼以常規(guī)動(dòng)物飼料(繁育鼠全價(jià)固體顆粒飼料，沈陽(yáng)市于洪區(qū)前民動(dòng)物飼料廠提供)和水。連續(xù)給藥12 w后3%戊巴比妥鈉腹腔注射40 mg/kg麻醉，結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左室降支90 min,再灌注90 min，全程采用RM6240多導(dǎo)生理信號(hào)采集系統(tǒng)Ⅱ?qū)?lián)持續(xù)心電監(jiān)測(cè)，觀察結(jié)扎前、缺血及缺血再灌注的心電圖改變，并采集各組大鼠靜脈血檢測(cè)血漿Hcy、ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO的水平，空白對(duì)照組只穿線不結(jié)扎。

2 結(jié) 果

2.1各組大鼠Hcy水平比較 12 w后,模型組〔(27.33±5.66)μmol/L〕、干預(yù)組〔(27.28±4.37)μmol/L〕大鼠血清Hcy水平高于空白對(duì)照組〔(3.56±1.12)μmol/L〕及正常對(duì)照組〔(3.40±1.28)μmol/L〕(P<0.01)。模型組、干預(yù)組大鼠血清Hcy水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但均明顯高于15.0 μmol/L(國(guó)際上規(guī)定的Hhcy水平)，說(shuō)明Hhcy模型大鼠造模成功。

2.2心肌缺血再灌注心電圖的變化 各組大鼠結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左室降支90 min后及松開結(jié)扎線再灌注90 min后均表現(xiàn)為R波下降，ST段抬高并與T波融合為單項(xiàng)曲線，其中模型組PP間期延長(zhǎng)；正常對(duì)照組、干預(yù)組PP間期無(wú)明顯變化。模型組與正常對(duì)照、干預(yù)組兩組間R波下降、PP間期延長(zhǎng)存在明顯差異。模型組出現(xiàn)4例心律失常(PQ、QRS、QT間期延長(zhǎng)的廣泛傳導(dǎo)阻滯，室性期前收縮，室性心動(dòng)過(guò)速和心室顫動(dòng))。結(jié)果表明Hcy對(duì)大鼠心肌具有明顯的損傷作用，缺血再灌注后進(jìn)一步加重。結(jié)扎前干預(yù)組大鼠心電圖R波低下，缺血再灌注后進(jìn)一步降低。而辛伐他汀對(duì)Hhcy大鼠缺血再灌注后有明顯的保護(hù)作用，空白對(duì)照組心電圖無(wú)異常。

2.3心肌缺血再灌注后ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO水平變化 正常對(duì)照組血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO均明顯高于空白對(duì)照組(P<0.01)，模型組血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO均明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)，模型組血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO水平亦均明顯高于干預(yù)組(P<0.01)。見表1、表2。

表1 各組血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ水平比較

表2 各組血清CRP、MPO水平比較

3 討 論

心肌細(xì)胞缺血再灌注中常會(huì)有MIRI，MIRI導(dǎo)致心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、功能、代謝及電生理進(jìn)一步損傷，臨床上可出現(xiàn)血壓驟降、心功能不全、心律失常甚至猝死，嚴(yán)重影響患者預(yù)后，ET-1、AngⅠ、AngⅡ、MPO等血管活性因子產(chǎn)生和釋放增加是其機(jī)制之一〔1～3〕。本研究證實(shí)SD大鼠缺血再灌注后上述因子明顯增加，Hhcy大鼠增加更明顯，辛伐他汀則能顯著降低Hhcy大鼠缺血再灌注后上述因子的水平，明顯降低MIRI。

AMI再灌注治療成功后，抬高ST段應(yīng)該逐漸回落到等電位線，然而如果存在微循環(huán)損傷，抬高的ST段則仍持續(xù)存在。本實(shí)驗(yàn)表明Hhcy+缺血再灌注組再灌注后微血管損傷較缺血再灌注組明顯，而辛伐他汀可顯著降低Hhcy介導(dǎo)的MIRI。

ET-1、AngⅠ、AngⅡ均為已知的強(qiáng)內(nèi)源性縮血管因子，在AMI缺血再灌注過(guò)程中，血管內(nèi)皮細(xì)胞受損、心肌局部RAAS的激活等引起上述因子短時(shí)間大量生成及釋放，促使冠脈痙攣、白細(xì)胞激活、局部?jī)翰璺影愤^(guò)量、微血栓形成等，促進(jìn)心肌細(xì)胞MIRI。

CRP為炎性反應(yīng)、感染和組織損傷急性反應(yīng)的主要敏感標(biāo)志物之一，MPO為中性粒細(xì)胞活化標(biāo)志物。AMI時(shí)，心肌壞死誘發(fā)急性炎癥反應(yīng)，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)并釋放MPO到胞外〔6〕，產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能受損，造成內(nèi)皮細(xì)胞源性NO產(chǎn)生障礙，影響血管平滑肌舒張功能，從而減少心肌局部組織血流供應(yīng)，導(dǎo)致心肌細(xì)胞壞死和凋亡增加，血清CRP、MPO水平明顯增高。

Hcy是心血管獨(dú)立的危險(xiǎn)因素，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)Hhcy可促進(jìn)ET-1、AngⅠ、AngⅡ、MPO等因子產(chǎn)生和釋放增加，促進(jìn)冠脈收縮和痙攣；同時(shí)，Hcy本身?yè)p傷血管內(nèi)皮，加重MIRI,炎性因子CRP早期即參與其中。

辛伐他汀為經(jīng)典的降血脂藥物，對(duì)穩(wěn)定斑塊、抗氧自由基、抑制炎癥反應(yīng)、抑制缺氧復(fù)氧心肌細(xì)胞凋亡方面發(fā)揮作用。兩項(xiàng)回顧性研究〔7,8〕表明，AMI患者在PCI術(shù)前長(zhǎng)期應(yīng)用他汀類藥物可有效減少無(wú)復(fù)流現(xiàn)象的發(fā)生，極大改善AMI患者的預(yù)后。本研究證實(shí)辛伐他汀干預(yù)組雖不能降低Hcy水平，但可有效降低缺血再灌注后ET-1、AngⅠ、AngⅡ、MPO等因子產(chǎn)生和釋放，進(jìn)而減少缺血再灌注過(guò)程中微血管痙攣及白細(xì)胞浸潤(rùn)，減輕MIRI。

4 參考文獻(xiàn)

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