葉 剛 池建平 李英倫

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，四川 雅安 625014)

慢性前列腺炎(CP)以其治愈率低、復(fù)發(fā)率高而成為非常棘手的疾病〔1～3〕。目前針對CP多以抗生素治療為主〔4,5〕，長時間、大劑量的抗生素治療會對機體產(chǎn)生嚴重的毒副作用，并容易誘導(dǎo)耐藥菌株的產(chǎn)生，且在抗生素治療后6～12個月CP復(fù)發(fā)率較高〔6〕。中醫(yī)治療前列腺疾病的報道越來越多，其中針刺以其作用機制獨特，沒有或極少有毒副作用，并對慢性疾病有其獨特療效而越來越受到重視。目前已有160余個國家和地區(qū)使用針刺療法，接受針刺治療的人數(shù)也不斷增加〔7～11〕。本實驗以中醫(yī)針刺理論為指導(dǎo)，旨在探討針刺對CP大鼠血清中腫瘤壞死因子(TNF)-α和白細胞介素(IL)-6的影響，為針刺治療CP提供理論參考。

1 材料和方法

1.1實驗動物與試劑 健康雄性Wistar大鼠75只，體重(300±20)g，購自四川大學(xué)實驗動物中心。大鼠購進后常規(guī)飼養(yǎng)，觀察1 w無異常后進行實驗。大鼠IL-6 ELISA試劑盒96T、大鼠TNF-α ELISA 試劑盒96T，均購自成都欣博盛生物科技有限公司。

1.2大鼠病理造模 將禁食12 h的大鼠用10%水合氯醛(300 mg/kg)腹腔麻醉后，用手術(shù)膠布將其固定在手術(shù)臺上，4%硫化鈉溶液脫毛、備皮、消毒，在無菌條件下，利用微創(chuàng)技術(shù)在大鼠下腹正中切開一個1.0～1.5 cm左右的切口，打開腹壁和腹膜，直達腹腔，暴露附于精囊內(nèi)側(cè)的前列腺背葉，模型組于前列腺左、右背側(cè)葉包膜下分別注入25 %消痔靈注射液各0.2 ml，假手術(shù)組則注入生理鹽水0.2 ml。0.5%碘伏棉球輕輕按壓針眼后，縫合腹壁肌肉、皮膚，碘酊消毒創(chuàng)口，放回鼠籠。術(shù)后注意大鼠的保暖，12 h后可以自由飲水，2次/d碘伏消毒創(chuàng)口，防止感染。

1.3實驗處理 空白對照組于實驗開始后與針刺組以同樣的時間和方法固定，但不做任何治療；模型組在造模后的其他操作同對照組一樣；藥物組每天灌胃“前列通”藥液2 ml；針刺組以0.28 mm×25 mm毫針按順序針刺關(guān)元→腎腧→三陰交→脾俞→太沖，1次/d，10 d為1個療程；針刺藥物組以0.28 mm×25 mm毫針按順序針刺關(guān)元→腎腧→三陰交→脾俞→太沖，1 d/次，10 d為1個療程，同時每只大鼠每天灌胃“前列通”藥液2 ml。

1.4組織切片觀察 各組分別于3個療程結(jié)束后對試驗大鼠處死，取前列腺組織進行切片觀察。

1.5TNF-α和IL-6測定 各組分別于3個療程結(jié)束后對試驗大鼠采血，分離血清進行TNF-α和IL-6的測定。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS13.0軟件進行單因素方差分析。

2 結(jié) 果

2.1蘇木素-伊紅(HE)染色光鏡觀察結(jié)果 3個療程結(jié)束后，正常組大鼠前列腺組織經(jīng) HE染色后，光鏡下可見腺上皮細胞多為單層柱狀或立方狀，呈柱狀排列，腺腔形態(tài)不一，腺組織呈較規(guī)則的圓形或橢圓形，無炎性細胞浸潤或水腫；模型組可見大量成纖維細胞及炎性細胞；藥物組前列腺組織趨于正常，部分腺上皮細胞仍可見增生，但僅見少量炎性細胞，無明顯水腫；針刺組偶見上皮細胞增生，偶見炎性細胞，腺上皮細胞排列整齊，腺泡結(jié)構(gòu)完整；針刺組藥物腺上皮細胞排列整齊，腺泡結(jié)構(gòu)完整，偶見炎性細胞，間質(zhì)無明顯水腫、增生。見圖1。

2.2TNF-α和IL-6檢測結(jié)果 模型組IL-6、TNF-α水平均明顯高于正常組(均P<0.01)；藥物組、針刺組、針刺藥物組IL-6、TNF-α水平均明顯低于模型組(均P<0.01)；針刺藥物組IL-6水平明顯低于藥物組(P<0.01)。針刺組與針刺藥物組TNF-α水平明顯低于藥物組(P<0.01)。 見表1。

正常組

模型組

藥物組

針刺組

針刺藥物組

表1 3個療程后不同組大鼠TNF-α和IL-6水平比較

3 討 論

CP的病因?qū)W研究顯示，免疫現(xiàn)象在CP的發(fā)病過程中扮演著重要角色，而這一過程均是以細胞因子為介導(dǎo)發(fā)生，它們通過自分泌或旁分泌方式完成細胞自身的功能，參加復(fù)雜的細胞-細胞調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。機體在病原或其他抗原刺激下，巨噬細胞被激活，一方面巨噬細胞產(chǎn)生大量的促炎性細胞因子，如TNF-α、IL-6等，另一方面巨噬細胞將抗原呈遞給T細胞，激活T細胞，產(chǎn)生大量細胞因子，進一步使免疫反應(yīng)擴大。TNF-α、IL-6等作為促炎因子，可以促進趨化因子和環(huán)氧合酶(COX)-2以及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)和細胞間黏附分子(ICAM)的表達，而這些表達產(chǎn)物通過各自的機制對機體組織造成損傷并導(dǎo)致疼痛，從而產(chǎn)生前列腺炎的各種臨床癥狀。

目前對于針刺免疫的調(diào)節(jié)國內(nèi)研究較多。劉婷婷等〔12〕通過對造模為非細菌性前列腺炎的大鼠進行電針和普通針刺治療的研究，發(fā)現(xiàn)電針和普通針刺治療均能顯著升高大鼠血清中IL-2水平，降低TNF-α水平。王鳳艷等〔13〕將84例診斷為CP的患者隨機分為治療組(電針+藥物)和對照組(藥物治療)進行臨床研究，同時對治療前后的前列腺液內(nèi)白細胞(EPS-WBC)及前列腺液內(nèi)的卵磷脂(EPS-SPI)進行檢測。結(jié)果表明，治療組的總有效率為93.2%，明顯優(yōu)于對照組的82.5%，差異非常顯著；治療組及對照組均能引起EPS-WBC減少和EPS-SPL增加，但兩組比較無顯著意義。朱愛茹等〔14〕研究發(fā)現(xiàn)針刺中極、陰陵泉等穴能顯著提高CP患者前列腺液中IL-1β的含量。

綜上，單用針刺方法對CP有一定治療作用，而針刺聯(lián)合藥物治療，效果優(yōu)于單用針刺和單用藥物治療。有關(guān)針刺對CP治療作用機制還需做進一步深入研究。

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