杜茂波++鞏橋

[摘要] 目的 研究魔芋精粉對(duì)大鼠酒精性肝損傷的保護(hù)作用。 方法 將40只SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（10只）、模型組（14只）、魔芋精粉組（16只），用白酒灌胃的方式建立大鼠酒精性肝損傷模型，12周后，測(cè)定大鼠血液中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）及肝組織水平。 結(jié)果 魔芋精粉組中ALT、AST的含量均低于模型組（P<0.05），大鼠肝組織中丙二醛含量低于模型組（P<0.05），超氧化物歧化酶活性高于模型組（P<0.05）。 結(jié)論 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷有一定的保護(hù)作用。

[關(guān)鍵詞] 魔芋精粉；酒精性肝損傷；保護(hù)作用

[中圖分類號(hào)] R285.5[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A[文章編號(hào)] 1674-4721（2014）06（b）-0018-03

Protective effect study of konjac powder in rats with alcoholic liver injury

DU Mao-bo1 GONG Qiao2

1.Research Center of Chinese Materia Medica Preparation,Institute of Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100700,China;2.Research and Development Center of Moli Technology,Mianyang City in Sichuan Province,Mianyang 621000,China

[Abstract] Objective To study the protective effect of konjac powder in rats with alcoholic liver injury. Methods Forty SD rats were randomly divided into 3 groups: normal group (n=10),model group (n=14),and konjac powder group (n=16).The model of rat with alcoholic liver injury was created by liquor gavage.After 12 weeks,the levels of alanine transaminase (ALT),aspartate aminotransferase (AST),and hepatic tissues in rat′s blood were measured. Results In comparison with the model group,the content of ALT and AST in the konjac powder group were both lower (P<0.05).The content of methane dicarboxylic aldehyde from hepatic tissue in rat in the konjac powder group was lower than that in the model group (P<0.05).The activity of superoxide dismutase from hepatic tissue in konjac powder group was higher than that in the model group (P<0.05). Conclusion Konjac powder has a certain protective effect on alcoholic liver injury.

[Key words] Konjac powder;Alcoholic liver injury;Protective effect

魔芋精粉作為食品天然原料歷史較悠久，對(duì)于現(xiàn)今的技術(shù)等級(jí)和消費(fèi)水平，其仍然是新的食品成分。傳統(tǒng)魔芋食品具有特殊彈性、口感和保健功能。由酒精性肝損傷而引起的酒精性肝病，發(fā)病率也出現(xiàn)不斷增加的趨勢(shì)，成為第二大類肝病[1]。目前人們對(duì)酒精的任意使用和相對(duì)酒精依賴已經(jīng)成為當(dāng)今社會(huì)關(guān)注的重大問題[2]。魔芋中的主要有效成分為魔芋葡甘露聚糖，約占85%。在我國醫(yī)藥領(lǐng)域范圍內(nèi)，魔芋精粉具有調(diào)節(jié)脂肪正常代謝等作用。近年來，科學(xué)工作者潛心大量研究其在食品工業(yè)中的應(yīng)用。本研究探討魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷的保護(hù)作用，以期為魔芋精粉防治酒精性肝病的實(shí)驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

雄性Wistar大鼠40只，體重（240±25） g，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 藥物

魔芋精粉由四川魔力科技有限公司提供，生產(chǎn)批號(hào)：130824-B。

1.3 試劑

無水乙醇（北京化工廠）；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）試劑盒（20100827）；超氧化物歧化酶（SOD）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）檢測(cè)試劑盒（南京建成生物工程研究所提供，批號(hào)130912）；丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號(hào)13821）。

1.4 方法

1.4.1 魔芋精粉的制備魔芋片通過研磨粉碎成粉，粒度在80目。由于魔芋精粉和飛粉之間密度相差很大，因此采用旋風(fēng)分離機(jī)分離提取魔芋精粉。過60目篩子，稱量40 g魔芋精粉于500 ml蒸餾水中溶解，每毫升約含葡甘露聚糖84%。

1.4.2 實(shí)驗(yàn)分組、給藥購買40只大鼠，適當(dāng)喂養(yǎng)5 d后，將其隨機(jī)分為3組。①模型組（14只）：白酒用蒸餾水調(diào)配成乙醇濃度45%的白酒，依據(jù)10 ml/kg，2次/d灌胃造模[3]，造模需12周[4]；②魔芋精粉組（16只）：除每天白酒灌胃外（方法同模型組），魔芋精粉灌胃12周；③正常對(duì)照組（10只）：采用鹽水（0.9%NaCl）灌胃（方法同模型組）灌胃12周，處死，解剖肝臟，觀察肝細(xì)胞脂肪變化和酒精性肝損傷程度。

1.4.3 酒精性肝損傷模型大鼠血清ALT、AST活性測(cè)定取上述各組實(shí)驗(yàn)大鼠，采用眼眶取血，經(jīng)3500 r/min后，取上清液，測(cè)定ALT、AST活性。

1.4.4 酒精性肝損傷模型大鼠肝臟SOD活性、MDA含量測(cè)定各組大鼠取血后處死，立即取肝，生理鹽水清洗擦干，稱重，按比例重量與體積相比加入生理鹽水，制備成10%勻漿，分別測(cè)定SOD、MDA活性。

1.4.5 肝組織病理變化大鼠經(jīng)處死后取肝左葉，用10%的甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋、切片（片厚0.4 μm），HE染色，光鏡下查看變化。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以x±s表示，采用方差齊性（t）分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠血清ALT、AST含量的影響

模型組ALT、AST的活性明顯高于正常對(duì)照組（P<0.05），說明酒精性肝損傷模型建立成功；魔芋精粉組ALT、AST活性高于正常對(duì)照組（P<0.05），低于模型組（P<0.05），說明魔芋精粉能夠減輕酒精性肝損傷，保護(hù)肝臟，在一定程度上抑制ALT和AST活性（表1）。

表1 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠血清ALT、AST含量的

影響（U/L，x±s）

與正常對(duì)照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.2 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的影響

與正常對(duì)照組比較，模型組MDA含量顯著升高（P<0.05），肝細(xì)胞氧化受損；魔芋精粉組MDA含量高于正常對(duì)照組（P<0.05），低于模型組（P<0.05）。與正常對(duì)照組比較，模型組SOD活性顯著降低（P<0.05），是由于模型組大鼠長(zhǎng)期攝入酒精，肝臟SOD清除大量自由基和脂質(zhì)過氧化物而大量消耗；魔芋精粉組SOD活性顯著低于正常對(duì)照組（P<0.05），高于模型組（P<0.05）（表2）。

表2 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的

影響（mol/ml，x±s）

與正常對(duì)照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.3 肝組織的病理變化

大鼠解剖后肉眼觀察可見，正常對(duì)照組大鼠肝臟結(jié)構(gòu)正常，無肝細(xì)胞脂肪病變壞死；模型組的肝小葉結(jié)構(gòu)受到破壞，肝細(xì)胞水腫發(fā)生變性，肝細(xì)胞脂肪出現(xiàn)病變；魔芋精粉組較模型組肝細(xì)胞水腫程度減輕，肝小葉結(jié)構(gòu)也基本正常（圖1）。

正常對(duì)照組 模型組魔芋精粉組

圖1 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝組織的影響（HE，×400）

3 討論

中醫(yī)學(xué)書目中雖然沒有明確記錄“酒精性肝損傷”的病名，但長(zhǎng)期飲酒會(huì)造成嚴(yán)重傷害[5]。根據(jù)病情在臨床上的突出表現(xiàn)，可以把它稱為醫(yī)學(xué)的“傷酒”“酒癖”“酒脹”“酒疸”等范疇。醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，科學(xué)家對(duì)酒精性肝損傷病已經(jīng)早有研究[6]。

本次研究證實(shí)大鼠酒精性肝損傷模型有很好效果，通過魔芋精粉模型組大量的灌胃實(shí)驗(yàn)，大鼠肝組織輕度脂肪變性[7]。ALT和AST存在肝細(xì)胞漿和線粒體轉(zhuǎn)氨酶，當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生病變，ALT、AST會(huì)滲漏入血，所有血清中ALT、AST活性是大鼠肝損傷的定性指標(biāo)[8]。MDA是機(jī)體進(jìn)行脂質(zhì)代謝產(chǎn)生的終產(chǎn)物，過多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此MDA是肝組織過氧化損傷程度的衡量指標(biāo)[9-10]。本實(shí)驗(yàn)顯示大鼠血清ALT、AST升高，研究中發(fā)現(xiàn)魔芋精粉可降低ALT、AST含量，對(duì)大鼠肝損傷有保護(hù)作用。模型組大鼠肝組織中SOD活性降低，MDA含量增加。機(jī)體長(zhǎng)期攝入酒精，代謝產(chǎn)生自由基引起SOD耗盡，自身抗氧化受損，引起自由基堆積，脂質(zhì)過氧化，因此MDA會(huì)增加[11]。本實(shí)驗(yàn)由于灌胃魔芋精粉，肝組織SOD活性提高，MDA含量降低，說明魔芋精粉可提高肝臟抗氧化能力，減少體內(nèi)自由基和脂質(zhì)過氧化，對(duì)大鼠肝臟損傷起到保護(hù)作用。

本文通過魔芋精粉組模型對(duì)酒精性肝損傷模型的保護(hù)作用，評(píng)價(jià)了對(duì)肝損傷的修復(fù)作用，并初探保護(hù)的機(jī)制，為魔芋精粉功能性產(chǎn)品的開發(fā)奠定了實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。

[參考文獻(xiàn)]

[1]鞠輝，魏良洲.酒精性肝病的流行病學(xué)現(xiàn)狀[J].肝臟，2006，2（11）：57.

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[6]劉紅，王曉，周平，等.魔芋多糖對(duì)大鼠組織脂的影響[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2009，36（17）：342-343.

[7]張茂玉，黃承玨，沈君蓉，等.魔芋食品對(duì)人體脂質(zhì)代謝影響的研究[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，1989，11（2）：22-24.

[8]吳偉青，陳靜，劉超群，等.綠茶多酚對(duì)小鼠肝損傷的保護(hù)作用[J].食品科學(xué)，2012，33（13）：22-23.

[9]Masalkar PD，Abhang SA.Oxidative stress and antioxidant srarus in patients with alcoholic liver disease[J].Clin Chim Acta，2009，345（3）：57-60.

[10]劉同剛，沙凱輝，王邦茂，等.三七對(duì)大鼠急性酒精肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].山東醫(yī)藥，2010，48（6）：34-36.

[11] 龐杰，李斌，謝筆鈞，等.氧化魔芋葡甘聚糖結(jié)構(gòu)研究[J].結(jié)構(gòu)化學(xué)，2012，23（6）：103-104.

（收稿日期：2014-03-05本文編輯：郭靜娟）

表1 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠血清ALT、AST含量的

影響（U/L，x±s）

與正常對(duì)照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.2 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的影響

與正常對(duì)照組比較，模型組MDA含量顯著升高（P<0.05），肝細(xì)胞氧化受損；魔芋精粉組MDA含量高于正常對(duì)照組（P<0.05），低于模型組（P<0.05）。與正常對(duì)照組比較，模型組SOD活性顯著降低（P<0.05），是由于模型組大鼠長(zhǎng)期攝入酒精，肝臟SOD清除大量自由基和脂質(zhì)過氧化物而大量消耗；魔芋精粉組SOD活性顯著低于正常對(duì)照組（P<0.05），高于模型組（P<0.05）（表2）。

表2 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的

影響（mol/ml，x±s）

與正常對(duì)照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.3 肝組織的病理變化

大鼠解剖后肉眼觀察可見，正常對(duì)照組大鼠肝臟結(jié)構(gòu)正常，無肝細(xì)胞脂肪病變壞死；模型組的肝小葉結(jié)構(gòu)受到破壞，肝細(xì)胞水腫發(fā)生變性，肝細(xì)胞脂肪出現(xiàn)病變；魔芋精粉組較模型組肝細(xì)胞水腫程度減輕，肝小葉結(jié)構(gòu)也基本正常（圖1）。

正常對(duì)照組 模型組魔芋精粉組

圖1 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝組織的影響（HE，×400）

3 討論

中醫(yī)學(xué)書目中雖然沒有明確記錄“酒精性肝損傷”的病名，但長(zhǎng)期飲酒會(huì)造成嚴(yán)重傷害[5]。根據(jù)病情在臨床上的突出表現(xiàn)，可以把它稱為醫(yī)學(xué)的“傷酒”“酒癖”“酒脹”“酒疸”等范疇。醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，科學(xué)家對(duì)酒精性肝損傷病已經(jīng)早有研究[6]。

本次研究證實(shí)大鼠酒精性肝損傷模型有很好效果，通過魔芋精粉模型組大量的灌胃實(shí)驗(yàn)，大鼠肝組織輕度脂肪變性[7]。ALT和AST存在肝細(xì)胞漿和線粒體轉(zhuǎn)氨酶，當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生病變，ALT、AST會(huì)滲漏入血，所有血清中ALT、AST活性是大鼠肝損傷的定性指標(biāo)[8]。MDA是機(jī)體進(jìn)行脂質(zhì)代謝產(chǎn)生的終產(chǎn)物，過多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此MDA是肝組織過氧化損傷程度的衡量指標(biāo)[9-10]。本實(shí)驗(yàn)顯示大鼠血清ALT、AST升高，研究中發(fā)現(xiàn)魔芋精粉可降低ALT、AST含量，對(duì)大鼠肝損傷有保護(hù)作用。模型組大鼠肝組織中SOD活性降低，MDA含量增加。機(jī)體長(zhǎng)期攝入酒精，代謝產(chǎn)生自由基引起SOD耗盡，自身抗氧化受損，引起自由基堆積，脂質(zhì)過氧化，因此MDA會(huì)增加[11]。本實(shí)驗(yàn)由于灌胃魔芋精粉，肝組織SOD活性提高，MDA含量降低，說明魔芋精粉可提高肝臟抗氧化能力，減少體內(nèi)自由基和脂質(zhì)過氧化，對(duì)大鼠肝臟損傷起到保護(hù)作用。

本文通過魔芋精粉組模型對(duì)酒精性肝損傷模型的保護(hù)作用，評(píng)價(jià)了對(duì)肝損傷的修復(fù)作用，并初探保護(hù)的機(jī)制，為魔芋精粉功能性產(chǎn)品的開發(fā)奠定了實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。

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[4]彭恕生，李玉瓊，張銀珠，等.魔芋精粉對(duì)大鼠腦、肝、心血管細(xì)胞老化影響[J].毒理學(xué)雜志，2010，24（12）：38-40.

[5] 黃訓(xùn)端，何家慶.我國酒精性肝病的流行病學(xué)現(xiàn)狀[J].肝組織，2006，2（12）：56-57.

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[8]吳偉青，陳靜，劉超群，等.綠茶多酚對(duì)小鼠肝損傷的保護(hù)作用[J].食品科學(xué)，2012，33（13）：22-23.

[9]Masalkar PD，Abhang SA.Oxidative stress and antioxidant srarus in patients with alcoholic liver disease[J].Clin Chim Acta，2009，345（3）：57-60.

[10]劉同剛，沙凱輝，王邦茂，等.三七對(duì)大鼠急性酒精肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].山東醫(yī)藥，2010，48（6）：34-36.

[11] 龐杰，李斌，謝筆鈞，等.氧化魔芋葡甘聚糖結(jié)構(gòu)研究[J].結(jié)構(gòu)化學(xué)，2012，23（6）：103-104.

（收稿日期：2014-03-05本文編輯：郭靜娟）

表1 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠血清ALT、AST含量的

影響（U/L，x±s）

與正常對(duì)照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.2 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的影響

與正常對(duì)照組比較，模型組MDA含量顯著升高（P<0.05），肝細(xì)胞氧化受損；魔芋精粉組MDA含量高于正常對(duì)照組（P<0.05），低于模型組（P<0.05）。與正常對(duì)照組比較，模型組SOD活性顯著降低（P<0.05），是由于模型組大鼠長(zhǎng)期攝入酒精，肝臟SOD清除大量自由基和脂質(zhì)過氧化物而大量消耗；魔芋精粉組SOD活性顯著低于正常對(duì)照組（P<0.05），高于模型組（P<0.05）（表2）。

表2 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的

影響（mol/ml，x±s）

與正常對(duì)照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.3 肝組織的病理變化

大鼠解剖后肉眼觀察可見，正常對(duì)照組大鼠肝臟結(jié)構(gòu)正常，無肝細(xì)胞脂肪病變壞死；模型組的肝小葉結(jié)構(gòu)受到破壞，肝細(xì)胞水腫發(fā)生變性，肝細(xì)胞脂肪出現(xiàn)病變；魔芋精粉組較模型組肝細(xì)胞水腫程度減輕，肝小葉結(jié)構(gòu)也基本正常（圖1）。

正常對(duì)照組 模型組魔芋精粉組

圖1 魔芋精粉對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝組織的影響（HE，×400）

3 討論

中醫(yī)學(xué)書目中雖然沒有明確記錄“酒精性肝損傷”的病名，但長(zhǎng)期飲酒會(huì)造成嚴(yán)重傷害[5]。根據(jù)病情在臨床上的突出表現(xiàn)，可以把它稱為醫(yī)學(xué)的“傷酒”“酒癖”“酒脹”“酒疸”等范疇。醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，科學(xué)家對(duì)酒精性肝損傷病已經(jīng)早有研究[6]。

本次研究證實(shí)大鼠酒精性肝損傷模型有很好效果，通過魔芋精粉模型組大量的灌胃實(shí)驗(yàn)，大鼠肝組織輕度脂肪變性[7]。ALT和AST存在肝細(xì)胞漿和線粒體轉(zhuǎn)氨酶，當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生病變，ALT、AST會(huì)滲漏入血，所有血清中ALT、AST活性是大鼠肝損傷的定性指標(biāo)[8]。MDA是機(jī)體進(jìn)行脂質(zhì)代謝產(chǎn)生的終產(chǎn)物，過多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此MDA是肝組織過氧化損傷程度的衡量指標(biāo)[9-10]。本實(shí)驗(yàn)顯示大鼠血清ALT、AST升高，研究中發(fā)現(xiàn)魔芋精粉可降低ALT、AST含量，對(duì)大鼠肝損傷有保護(hù)作用。模型組大鼠肝組織中SOD活性降低，MDA含量增加。機(jī)體長(zhǎng)期攝入酒精，代謝產(chǎn)生自由基引起SOD耗盡，自身抗氧化受損，引起自由基堆積，脂質(zhì)過氧化，因此MDA會(huì)增加[11]。本實(shí)驗(yàn)由于灌胃魔芋精粉，肝組織SOD活性提高，MDA含量降低，說明魔芋精粉可提高肝臟抗氧化能力，減少體內(nèi)自由基和脂質(zhì)過氧化，對(duì)大鼠肝臟損傷起到保護(hù)作用。

本文通過魔芋精粉組模型對(duì)酒精性肝損傷模型的保護(hù)作用，評(píng)價(jià)了對(duì)肝損傷的修復(fù)作用，并初探保護(hù)的機(jī)制，為魔芋精粉功能性產(chǎn)品的開發(fā)奠定了實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。

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[6]劉紅，王曉，周平，等.魔芋多糖對(duì)大鼠組織脂的影響[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2009，36（17）：342-343.

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（收稿日期：2014-03-05本文編輯：郭靜娟）