李飛胡衛(wèi)東李衛(wèi)興劉朝華汪濤曾凡波

(1.中國(guó)人民解放軍武漢療養(yǎng)院，430074；2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，430030)

龍?zhí)俳罟瞧瑢?duì)小鼠肝腎功能影響的實(shí)驗(yàn)研究

李飛1胡衛(wèi)東1李衛(wèi)興1劉朝華1汪濤1曾凡波2

(1.中國(guó)人民解放軍武漢療養(yǎng)院，430074；2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，430030)

目的 觀察龍?zhí)俳罟瞧瑢?duì)小鼠肝腎功能的影響。方法 通過(guò)灌胃給小鼠l d內(nèi)最大質(zhì)量濃度及最大體積的藥量，連續(xù)用藥40 d，觀察動(dòng)物一般行為、進(jìn)食量變化、體質(zhì)量變化及肝、腎臟體比和肝腎功能改變。結(jié)果 龍?zhí)俳罟瞧盟幒?，除小鼠進(jìn)食量減少、精神較差外，龍?zhí)俳罟瞧瑢?duì)血清TP、ALB、AST、ALT、UA、BUN、Cr未見明顯影響。結(jié)論 龍?zhí)俳罟瞧谳^大劑量連續(xù)用藥后對(duì)小鼠肝腎功能未見明顯影響。

龍?zhí)俳罟瞧?；肝腎功能；小鼠

龍?zhí)俳罟瞧?原名783片)是一復(fù)方中成藥制劑，由我院制劑室生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：廣制字(2011)F03001號(hào)，由牛膝、熟地、雞血藤、骨碎補(bǔ)、獨(dú)活、羌活、地龍、海桐皮組成，用于補(bǔ)腎活血、通絡(luò)止痛、散寒除濕。主治肥大性關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)增生、腰椎間盤突出、坐骨神經(jīng)痛、肩周炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。本實(shí)驗(yàn)是為了解龍?zhí)俳罟瞧瑢?duì)小鼠肝腎功能的影響，以確保其食用安全。

1 材料與方法

1.1 樣品 龍?zhí)俳罟瞧杀驹褐苿┦已兄?規(guī)格：0.3 g/片，批號(hào)：110602)。實(shí)驗(yàn)時(shí)以去離子水將受試藥物配成所需濃度的藥液供灌胃給藥，使各劑量組給藥體積相等。

1.2 動(dòng)物 清潔級(jí)昆明種小鼠，體質(zhì)量(20±2)g，雌雄各半，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[許可證號(hào)：SCXK(鄂)2008-010]。動(dòng)物雌雄各半分籠群養(yǎng)，每籠5只，飼以華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心生產(chǎn)的鼠用顆粒飼料，自由飲水。環(huán)境溫度為(22±2)℃，相對(duì)濕度為(65±5)%。

1.3 試劑和儀器 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)試劑盒，四川邁克生物科技股份有限公司提供(批號(hào)分別為：0711061、0611041、0211011、0211011、0711051、0711071、0811061)；主要儀器：7020型全自動(dòng)生化分析儀(日本日立公司)，MP120-2型電子天平，上海第二天平儀器廠。

1.4 方法 取小鼠80只，按性別隨機(jī)分為4組，每組雌雄各10只；實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，正常飲水。龍?zhí)俳罟瞧娜擞脛┝繛椋?片/次，3次/d，總劑量為4.5 g/d。以體質(zhì)量計(jì)算，人劑量為0.075 g/(kg·d)，按人體推薦用量5、10和20倍，設(shè)3個(gè)劑量組為0.375、0.75和1.5 g/(kg·d)，空白對(duì)照組用等體積蒸餾水灌胃，連續(xù)灌胃40 d，給藥期間每天觀察小鼠的體質(zhì)量、外觀、行為、四肢活動(dòng)、進(jìn)食、排泄物、死亡等情況，并詳細(xì)記錄。最后1次給藥后，禁食，并于尾端約0.5 cm處斷尾采血約0.3 mL，做肝腎功能檢測(cè)，同時(shí)取肝腎做肉眼及組織病理學(xué)檢查。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以SPSS 17.0計(jì)算機(jī)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，用藥前后各項(xiàng)指標(biāo)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 龍?zhí)俳罟瞧瑢?duì)小鼠體質(zhì)量變化及肝、腎臟體比的影響(表1) 給藥期間及停藥觀察期間，各組小鼠的外觀、行為、呼吸、四肢活動(dòng)、進(jìn)食、排泄均未見明顯異常；無(wú)水腫；無(wú)中毒死亡現(xiàn)象。各劑量組小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)以及肝、腎臟體比與空白對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.2 龍?zhí)俳罟瞧瑢?duì)小鼠肝腎功能的影響(表2) 龍?zhí)俳罟瞧?個(gè)劑量組小鼠的肝功指標(biāo)(TP、ALB、AST、ALT)，腎功指標(biāo)(UA、BUN、Cr)與空白對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表1 龍?zhí)俳罟瞧瑢?duì)小鼠體質(zhì)量變化及肝、腎臟體比的影響

表2 龍?zhí)俳罟瞧瑢?duì)小鼠肝腎功能的影響

2.3 病理組織學(xué)檢查結(jié)果 龍?zhí)俳罟瞧鲃┝拷M小鼠肝、腎組織表面平整光滑、色澤鮮紅、質(zhì)軟未發(fā)現(xiàn)明顯的病變，各項(xiàng)生化指標(biāo)未改變。因此僅對(duì)高劑量組和空白對(duì)照組做病理組織學(xué)檢查。鏡檢結(jié)果：龍?zhí)俳罟瞧邉┝拷M小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)正常，未見肝細(xì)胞變性、壞死；未見小葉中央靜脈周圍炎細(xì)胞浸潤(rùn)，匯管區(qū)未發(fā)現(xiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)。腎組織結(jié)構(gòu)正常，未見腎小球毛細(xì)血管充血、腎小球纖維化、腎間質(zhì)及腎盂炎細(xì)胞浸潤(rùn)、移行上皮細(xì)胞及纖維組織增生等現(xiàn)象。

3 討論

龍?zhí)俳罟瞧瑟?dú)活、羌活、當(dāng)歸、牛膝、雞血藤、熟地、骨碎補(bǔ)、地龍、海桐皮組成。獨(dú)活入膀胱、腎經(jīng)、去風(fēng)勝濕，散寒止痛。藥理研究，獨(dú)活可擴(kuò)張血管，減少滲出，有鎮(zhèn)痛抗炎作用[1]1705。羌活能解熱鎮(zhèn)痛、抗炎，增加腦血流量，緩解上焦疼痛和抗凝[2]。當(dāng)歸入肝、心、脾經(jīng)，補(bǔ)血，治血虛痿痹。當(dāng)歸和其有效成分可通過(guò)抑制肝組織細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，保護(hù)肝細(xì)胞器和酶結(jié)構(gòu)，對(duì)多種原因引起的肝損傷有明顯的保護(hù)作用[3]。牛膝入肝、腎經(jīng)，補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋骨，活血去瘀，治腰膝骨痛，四肢拘攣。藥理研究認(rèn)為，牛膝通過(guò)擴(kuò)張下肢血管，改善血液黏度和微循環(huán)，起到消腫的治療作用。雞血藤入肝、腎經(jīng)，活血舒筋，治療腰膝酸痛，麻木癱瘓。雞血藤可促進(jìn)機(jī)體紅細(xì)胞生成素分泌、成熟和釋放，以補(bǔ)充破壞和死亡的紅細(xì)胞，維持紅細(xì)胞相對(duì)穩(wěn)定而發(fā)揮補(bǔ)血作用[4-5]。熟地入心、肝、腎經(jīng)，滋陰補(bǔ)血，治陰虛血少，腰膝痿弱[1]2626。骨碎補(bǔ)入腎、心經(jīng)，補(bǔ)腎，活血，治腎虛腰痛，風(fēng)濕痹痛[1]1659，骨碎補(bǔ)中的總黃酮具有較強(qiáng)的抗膝骨關(guān)節(jié)炎作用[6]。地龍入肝經(jīng)、肺經(jīng)、膀胱經(jīng)，清熱熄風(fēng)，平肝降壓，清絡(luò)通痹，清肺平喘，利尿通淋[7]。海桐皮入肝、脾經(jīng)，祛風(fēng)濕，通經(jīng)絡(luò)，治風(fēng)濕痹痛。

臨床關(guān)于壯骨關(guān)節(jié)丸造成肝損害的報(bào)道，以血清堿性磷酸酶的顯著升高為特征，嚴(yán)重者有黃疸、肝臟腫大[8-9]。引起肝毒性的藥材，主要是乳香、沒(méi)藥、補(bǔ)骨脂[10]。本實(shí)驗(yàn)顯示，龍?zhí)俳罟瞧踩行?，無(wú)肝臟、腎臟功能的損害。

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Objective To study the influence of Longtengjingu tablets on hepatic and renal function of mice.Methods The mice were given a gavage of the maximum mass concentration and the maximum volume of longtengjingu tablets for continuous 40 days.During the experimental period，these mice were kept under close observation on the general behavior，the quantity change of food in-take，body weight change，proportion of liver and kidney to the body，index and the changes of hepatic and renal function.Results A fter taking longtengjingu tablets，the m ice showed no significant effects on the serum levels of TP，ALB，AST，ALT，UA，BUN and Cr except reduced food-intake and poormind performance.Conclusion Longtengjingu tablets has no significant effects on hepatic and renal function even when used in a large dosage for a continuous period of time.

Longtengjingu tablets；Hepatic and renal function；M ice

1005-619X(2014)01-0006-02

2013-06-14)