胡衛(wèi)東汪濤高永喜趙雁平曾凡波

(1.解放軍武漢療養(yǎng)院，430074；2.華中科技大學同濟醫(yī)學院藥學院，430030)

復方太子參片質(zhì)量標準研究

胡衛(wèi)東1汪濤1高永喜1趙雁平1曾凡波2

(1.解放軍武漢療養(yǎng)院，430074；2.華中科技大學同濟醫(yī)學院藥學院，430030)

目的 建立復方太子參片的質(zhì)量控制方法。方法 用TLC法對太子參、桔梗進行定性鑒別；HPLC法測定復方太子參片中所含淫羊藿苷的量，選用Kromasil C18色譜柱，流動相為乙腈-1%醋酸(21∶79)，檢測波長270 nm。結(jié)果 TLC檢出了太子參、桔梗特征斑點，淫羊藿苷進樣量在0.211～1.055μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r＝0.999 9)，加樣回收率為99.41%，RSD為1.24%。結(jié)論 質(zhì)量控制方法簡便、穩(wěn)定、可靠，可作為本品的質(zhì)量控制方法。

復方太子參片；質(zhì)量標準；高效液相色譜法；薄層色譜法

復方太子參片為解放軍武漢療養(yǎng)院研制開發(fā)的純中藥制劑，于2011年取得軍隊醫(yī)療機構(gòu)制劑臨床研究批準文號：廣L2011003，具有扶正固本、鎮(zhèn)咳平喘、清熱解毒的作用。用于治療慢性支氣管炎、過敏性支氣管炎、老年性慢性支氣管炎引起的咳嗽、咳痰及哮喘等癥。為更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，對太子參、桔梗兩味藥材進行了薄層色譜鑒別，并采用高效液相色譜法(HPLC)對方中淫羊藿苷進行了含量測定，為該制劑建立完善的質(zhì)量標準提供了依據(jù)?，F(xiàn)總結(jié)如下。

1 儀器與試藥

日本島津LC-20A高效液相色譜儀(SPD-M20A紫外-可見光檢測器，SIL-20AC自動進樣器，CTO-20AC柱溫箱)；電子天平(CP225D，1/10萬)；KQ-500B型超聲波清洗器(江蘇省昆山市超聲儀器有限公司)。

淫羊藿苷對照品(批號：110737-200312)由中國藥品生物制品檢定所提供。復方太子參片(批號為：130123、130214、130321)由解放軍武漢療養(yǎng)院提供。硅膠H薄層板、硅膠G薄層板均由青島海洋化工廠分廠提供。乙腈(色譜純，美國Fisher公司)；水為純水機凈化水(純水機型號Millipore Milli-Qbiocel型純水器)。其余試劑均為分析純。

2 薄層色譜鑒別

2.1 太子參 取本品5片，研細，加甲醇20 mL，溫浸，振搖30 min，濾過，濾液濃縮至1 mL，作為供試品(樣品)溶液。另取太子參對照藥材1 g，同法制成對照品溶液。再取缺太子參的模擬片20片，按供試品(樣品)溶液制備法制備陰性液。照薄層色譜法[1]附錄(Ⅵ B)34試驗，吸取上述3種溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶1)為展開劑，置用于展開劑預飽和15 min的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，噴以0.2%茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。

2.2 桔梗 取本品5片，研細，加7%硫酸乙醇-水(1∶3)混合液20 mL，加熱回流3 h，放冷，用三氯甲烷振搖提取2次，20 mL/次，合并三氯甲烷液，加水洗滌2次，30 mL/次，棄去洗液，三氯甲烷液用無水硫酸鈉脫水，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為共試品(樣品)溶液。另取桔梗對照藥材1 g，同法制成對照品溶液。再取缺桔梗的模擬片20片，按供試品(樣品)溶液制備法制備陰性液。照薄層色譜法[1]附錄(Ⅵ B)34試驗，吸取上述3種溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙醚(1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。

3 淫羊藿苷的含量測定

3.1 色譜條件 色譜柱：Kromasil C18柱；流動相：乙腈-1%醋酸(21∶79)；流速：1 mL/min；檢測波長：270 nm；柱溫：室溫；進樣量：10μL。

3.2 溶液的制備

3.2.1 供試品溶液 取復方太子參片10片，研磨成細粉，精密稱取粉末0.5 g，置25 mL量瓶中，加入甲醇適量，超聲10 min，放冷后補加甲醇至刻度，搖勻濾過，取續(xù)濾液經(jīng)0.45μm微孔濾膜濾過即得。

3.2.2 對照品溶液 精密稱取淫羊藿苷對照品適量，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解，搖勻，即得濃度為0.103 7 mg/mL的對照品溶液。

3.2.3 陰性對照溶液 按處方組成，制備不含淫羊藿的陰性模擬制劑，按上述供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液。

3.3 系統(tǒng)適用性試驗 取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各10μL，按上述色譜條件分別進樣測定，結(jié)果(圖1)。由圖可見，淫羊藿苷峰保留時間約17.2 min，陰性對照溶液在淫羊藿苷峰位置無干擾峰，淫羊藿苷峰與其他組分可完全分離。理論塔板數(shù)按淫羊藿苷計算不低于1 500。

3.4 線性關(guān)系考察 分別精密量取0.103 7 mg/mL的淫羊藿苷對照品溶液2、3、6、8、10 mL至10 mL量瓶中，以甲醇定容得0.211 0、0.312 8、0.625 7、0.084 1、0.105 5μg/μL淫羊藿苷溶液，各取10μL進樣測定，以峰面積為縱坐標Y，淫羊藿苷的量(μg)為橫坐標X，繪制標準曲線[2]。得回歸方程：Y＝3 578.6X＋2.276 5，r＝0.999 9。結(jié)果表明淫羊藿苷在0.211～1.055μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

圖1 HPLC色譜圖

3.5 精密度試驗 精密吸取淫羊藿苷對照品溶液10 mL，重復進樣6次，得峰面積的RSD為0.65%，說明儀器的精密度良好[3]。

3.6 重復性試驗 按供試品測定方法測定，對同一批樣品(批號：130214)重復測定6份。結(jié)果復方太子參片的平均含量為11.2 mg/g，RSD為0.60%，表明方法的重復性良好[4]。

3.7 穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液(批號：130214)，分別于配制后0、2、4、8、16、24 h依樣品測定法測定，記錄色譜圖。結(jié)果淫陽藿苷峰面積的RSD為1.87%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

3.8 加樣回收率試驗 精密稱取6份已知含量的同一批號(復方太子參片，批號：130214)樣品0.1 g，精密加入淫羊藿苷對照品(0.103 7 mg/mL)5、6、7 mL，按3.2.1項下的方法制備供試品溶液，進樣測定，計算回收率。結(jié)果(表1)表明方法可行[5]。

表1 加樣回收率試驗結(jié)果

3.9 樣品測定 精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 mL，注入液相色譜儀中，按外標一點法以峰面積測得3批樣品中淫羊藿苷的平均含量為11.2 mg/片，結(jié)果(表2)。暫定復方太子參片中淫羊藿苷的含量不低于10.9 mg/片。

表2 樣品測定結(jié)果

4 討論

采用薄層色譜法對復方太子參片中太子參、桔梗兩味藥材進行鑒別，并采用高效液相色譜法對方中淫羊藿所含淫羊藿苷進行含量測定，淫羊藿為復方太子參片中的主藥之一，主要有效成分為淫羊藿苷，故選擇它作為本制劑的含量測定指標成分。對淫羊藿苷對照品溶液在紫外分光光度儀上進行全波長掃描，結(jié)果在270 nm處有最大吸收。本方法簡便，專屬性、重復性好，且結(jié)果穩(wěn)定，可用于復方太子參片的質(zhì)量控制。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[Z].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[2]張萍，孔維軍，王伽伯，等.高欣膠囊的質(zhì)量標準研究[J].解放軍藥學學報，2010，26(1)：47-49.

[3]王元有，王正俊.仙靈骨葆顆粒的質(zhì)量標準研究[J].工業(yè)經(jīng)緯，2008，5(2)：44-47.

[4]黃丹瑩，李惠敏.抗骨增生片質(zhì)量標準的研究[J].中成藥，2010，32(6)：1073-1076.

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1005-619X(2014)01-0023-02

2013-08-21)