鄭金菊 劉 珊 王 榮

1.青島市中心醫(yī)院檢驗科，青島 266042；2.青島市腫瘤醫(yī)院，青島 266042

乙型肝炎病毒DNA定量與乙型肝炎五項結果的對比分析

鄭金菊1劉 珊1王 榮2

1.青島市中心醫(yī)院檢驗科，青島 266042；2.青島市腫瘤醫(yī)院，青島 266042

目的 探討乙型肝炎病毒DNA定量與乙型肝炎五項的相關性。 方法 分別用微粒子化學發(fā)光法和熒光定量PCR法檢測645例患者的乙型肝炎五項和乙型肝炎病毒DNA含量，并分析兩者的關系。 結果 HBsAg、HBeAg、HBcAb陽性組的乙型肝炎病毒DNA陽性率和DNA定量均顯著高于其他組（P＜0.05）。HBeAg陽性組乙型肝炎病毒DNA陽性率為93.4%，HBeAg陰性組乙型肝炎病毒DNA陽性率為42.8%；HBsAg陽性組乙型肝炎病毒DNA陽性率為65.3%，HBsAg陰性組乙型肝炎病毒DNA陽性率為7.4%。結論乙型肝炎病毒DNA與HBeAg呈正相關，部分HBsAg陰性患者也能檢出乙型肝炎病毒DNA，乙型肝炎病毒DNA與乙型肝炎五項聯(lián)合檢測能更好地監(jiān)測乙型肝炎病毒的復制情況，對監(jiān)測療效和判斷預后有重要價值。

乙型肝炎病毒DNA；乙型肝炎五項；分析

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒感染引起的一種疾病，已成為嚴重威脅人類健康的世界性疾病。目前乙型肝炎的病原學診斷指標主要有乙型肝炎五項（俗稱兩對半）和乙型肝炎病毒DNA定量，乙型肝炎五項能反映機體對乙型肝炎病毒免疫應答的情況，但不能反映血清中病毒復制活躍與否，不能監(jiān)測病毒載量的變化。乙型肝炎病毒DNA定量能準確反映血清中病毒復制的活動性，是乙型肝炎病毒存在、活動性復制及具有傳染性的可靠指標[1-3]。本文對本院收治的645例乙型肝炎病毒感染者進行乙型肝炎五項檢測和乙型肝炎病毒DNA定量檢測，并分析其相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2013年1 ～11月到本院就診的645例乙型肝炎病毒感染者，男382例，其中門診152例，住院230例，女263例，其中門診120例，住院143例；年齡13～85歲，平均（46.6±14.7）歲。

1.2 方法

檢測者抽取靜脈血后分別送至免疫室和PCR室，3000 r/min，離心10 min，分離血清，分別進行乙型肝炎五項檢測和乙型肝炎病毒DNA定量檢測。乙型肝炎五項采用微粒子化學發(fā)光法檢測，乙型肝炎病毒DNA采用熒光定量PCR法進行檢測，以copies/ml格式報告，當結果＜5×102copies/ml時直接報告為＜最低檢出限，嚴格按照標準操作程序進行。

1.3 試劑與儀器

乙型肝炎五項試劑：美國雅培公司；儀器：雅培i2000全自動微粒子化學發(fā)光免疫分析儀，美國雅培公司。乙型肝炎病毒DNA定量試劑：乙型肝炎病毒核酸定量檢測試劑盒（PCR-熒光探針法），中山大學達安基因股份有限公司；儀器：Mx 3000P熒光定量PCR儀，美國安捷倫科技有限公司。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析和處理，計量資料以±s表示，采用方差分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同乙型肝炎五項模式乙型肝炎病毒DNA陽性率和乙型肝炎病毒DNA定量的比較

HBsAg、HBeAg、HBcAb陽性組的乙型肝炎病毒DNA陽性率和乙型肝炎病毒DNA定量均顯著高于其他組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）（表1）。

表1不同乙型肝炎五項模式乙型肝炎病毒DNA陽性率和乙型肝炎病毒DNA定量的比較

2.2 HBsAg和HBeAg的乙型肝炎病毒DNA陽性情況

HBsAg陽性組乙型肝炎病毒 DNA陽性率為65.3%（359/550），HBeAg陽性組乙型肝炎病毒DNA陽性率為93.4%（197/211），兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

3 討論

乙型肝炎病毒是與人類關系密切的嗜肝DNA病毒，是病毒性肝炎的主要病原體之一[4-5]。目前乙型肝炎病毒的病原學檢測指標主要有乙型肝炎免疫學標志物和乙型肝炎病毒DNA定量。乙型肝炎五項是反映乙型肝炎病毒感染后機體免疫應答情況的指標，主要包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb[6]。本研究顯示，HBsAg、HBeAg、HBcAb陽性患者乙型肝炎病毒DNA陽性率高達93.4%，顯著高于其他組，DNA含量也高于其他組，表明大三陽患者體內乙型肝炎病毒復制活躍，病毒載量高，傳染性強，大三陽組有6.6%的患者乙型肝炎病毒DNA陰性，可能是病毒基因S區(qū)發(fā)生有意義的點突變或插入、缺失突變[7]，導致現(xiàn)用的熒光定量PCR試劑無法檢測出乙型肝炎病毒DNA；HBsAg、HBeAb、HBcAb陽性患者乙型肝炎病毒DNA陽性率為55.4%，低于大三陽組，但乙型肝炎病毒DNA含量仍然較高，表明小三陽患者體內HBeAg雖然轉陰，但并不表示病毒復制停止，仍具有傳染性，與相關文獻報道一致[8]。

乙型肝炎病毒感染后HBsAg是第一個出現(xiàn)的血清學標志物[9]，HBsAg陽性可見于急性肝炎、慢性肝炎或無癥狀攜帶者。本研究顯示，HBsAg陽性組乙型肝炎病毒DNA陽性率為65.3%，顯著低于HBeAg陽性組，表明HBsAg并不能作為乙型肝炎病毒復制的標志；陰性組乙型肝炎病毒DNA陽性率為7.4%，表明HBsAg陰性患者仍可能存在乙型肝炎病毒復制；HBeAg陽性組乙型肝炎病毒DNA陽性率高達93.4%，表明乙型肝炎病毒復制與HBeAg呈顯著正相關，主要因為HBeAg是乙型肝炎病毒基因前C或C區(qū)的mRNA表達[10]，與乙型肝炎病毒的活動性關系密切，但陰性并不能排除乙型肝炎病毒復制，HBeAg陰性組乙型肝炎病毒DNA陽性率為42.8%，可能與乙型肝炎病毒基因突變有關，突變后HBeAg表達減弱，甚至消失，但病毒仍在復制。

對于乙型肝炎病毒感染者如果只檢測乙型肝炎五項容易造成漏診及延誤治療，要準確了解乙型肝炎患者病毒復制情況有必要同時檢測乙型肝炎病毒DNA定量，乙型肝炎病毒DNA是診斷乙型肝炎病毒感染最直接的指標，檢測乙型肝炎病毒DNA對于了解乙型肝炎患者的傳染性大小、正確判斷抗病毒的療效及預后意義重大[4，11]。本研究所用的熒光定量PCR法通過PCR反應，使極微量的DNA在體外呈百萬倍擴增，極大地提高了檢測敏感性。乙型肝炎五項與乙型肝炎病毒DNA定量同時檢測才能正確判斷病情及預后，更好地監(jiān)測乙型肝炎病毒的復制情況、觀察病情的變化、判斷病毒載量的大小及監(jiān)測抗病毒的療效，為臨床診斷及抗病毒治療提供重要依據(jù)。

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Comparision analysis of HBV-DNA and five items in patient with hepatitis B

ZHENG Jin-ju1LIU Shan1WANG Rong2
1.Department of Laboratory,Central Hospital of Qingdao City,Qingdao 266042,China;2.Tumor Hospital of Qingdao City, Qingdao 266042,China

ObjectiveTo investigate the correlation between HBV-DNA and HBV five makers.MethodsChemiluminescent microparticles immunoassay analysis method and fluorogenic quantitative PCR method was used to detect the HBV serological markers and HBV-DNA in 645 patients with hepatitis B respectively,and then correlation between HBV-DNA and HBV five makers was analyzed.ResultsHBV-DNA positive rate and HBV-DNA content in HBsAg, HBeAg and HBcAb positive group was high than that in other groups respectively(P＜0.05).HBV-DNA positive rate in HBeAg positive group was 93.4%,HBV-DNA positive rate in HBeAg negative group was 42.8%.HBV-DNA positive rate in HBsAg positive group was 93.4%,HBV-DNA positive rate in HBsAg negative group was 42.8%.ConclusionHBV-DNA is positively correlated with HBeAg.HBV-DNA can be detected in part of HBsAg negative patients.Combined detection of HBV-DNA and HBV five makers can effectively monitor HBV replication,it has important value in monitoring curative effect and judging prognosis.

HBV-DNA;HBV five makers;Analysis

R512.6

A

1674-4721（2014）03（c）-0096-03

2014-02-13本文編輯：李亞聰）