司曉盼

【摘要】目的對于EDTA依賴性血小板減少的標本如何計數(shù)血小板。方法抽取正常人靜脈血，分別用EDTA-K2和枸櫞酸鈉抗凝，同時取其末梢血涂片，用血細胞分析儀XS_800i分別計數(shù)血小板，用EDTA-K2和櫞酸鈉兩種抗凝劑分別抽取4例EDTA-K2依賴性血小板減少患者靜脈血與血細胞分析儀上計數(shù)，同時取其末梢血進行人工計數(shù)。結果兩種抗凝劑在一定的時間內血小板計數(shù)無統(tǒng)計學差異。

【關鍵詞】EDTA-K2；枸櫞酸鈉；血小板減少

血小板計數(shù)是臨床最常用的實驗室檢測指標之一，其結果的準確性直接影響患者的診斷和治療，隨著血細胞計數(shù)儀在臨床的應用，引起血小板假性減少的原因逐漸增多，其中較常見的原因就是EDTA-K2抗凝劑引起的血小板減少，可發(fā)生于正常人和患者，雖然發(fā)生率很低（0.07%-1%），但給臨床帶來了巨大的困擾。本文就EDTA-K2抗凝劑依賴性引起的假性血小板減少的血小板計數(shù)方法經性探討。

1資料和方法

1.1臨床材料收集我院健康體檢人40例，其中男20例，女20例，年齡在18-65歲，平均年齡（40±12）歲，血常規(guī)檢查各項指標正常，EDTA-K2依賴性血小板減少患者4例，除血小板檢查減少外，其余肝、脾、淋巴結無腫大，皮下黏膜無出血。

1.2儀器法XS_800i血細胞分析儀試劑是廠家配套的試劑和質控品，EDTA-K2抗凝靜脈血2ml，109mmol/l枸櫞酸鈉抗凝血2ml，分別混勻，嚴格按XS_800i血細胞分析儀標準操作規(guī)程全血模式測定，記錄PLT。每份標本同時涂片兩張，進行瑞—吉染色。

1.3手工法按第三版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》，準確吸取手指末梢血20μl加入到0.38ml草酸銨血小板稀釋液中充分混勻，待完全溶血后再次混勻，取血小板懸液1滴沖入計數(shù)池內，靜置10-15min后，高倍鏡計數(shù)血小板數(shù)量。

2結果

2.140例正常人EDTAK2抗凝血、枸櫞酸鈉抗凝血不同時間血小板計數(shù)見表1。

3討論

乙二胺四乙酸（EDTA）能與血液中Ca2+結合成螯合物，而使Ca2+失去凝血作用，從而阻止血液凝固。EDTA-K2具有對血液標本中的細胞形態(tài)和計數(shù)影響非常小等優(yōu)點，國際血液學標準化委員會（ICSH）1993年建議將EDTA-K2作為血常規(guī)檢驗的抗凝劑。隨著全自動血細胞分析儀的推廣使用，EDTA-K2已在臨床廣泛使用[1]。

EDTA-K2作為血細胞分析的常用抗凝劑有很大的優(yōu)點，但對有些患者或者健康人的血液的血小板有一定的聚集作用，造成假性血小板減少，分析原因有以下兩點：①EDTA-K2可使血液發(fā)生免疫介導，產生冷抗血小板抗體，使血小板互相發(fā)生凝集現(xiàn)象，這種EDTA依賴的冷抗血小板自身抗體還能直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上，同時這種與血小板結合后的自身抗Fc端又可與淋巴細胞或單核細胞膜上Fc受體結合，出現(xiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象。②EDTA-K2可導致血小板活化，使血小板形態(tài)發(fā)生改變，導致血小板膜表面某種隱匿性抗原表位發(fā)生構象改變，這些活化的血小板與血漿中的自身抗體結合后，激活了細胞膜中的某些能活化血小板纖維蛋白的原受體的活性物質，促使血小板與纖維蛋白原聚集成團[2]。這兩種原因在表象上都表現(xiàn)為血小板的體積增大，EDTA依賴性假性血小板減少癥可見于正常人，但多數(shù)情況下伴某些疾病，如癌癥、自身免疫性疾病、肺心病、肝病及一些原因不明的疾病。雖然發(fā)生率不高，但應加以重視。

當臨床上發(fā)現(xiàn)血小板減少而無出血癥狀的患者，應首先做血涂片，觀察血小板的大小形態(tài)，聚集，確定是否為EDTA-K2引起的血小板聚集，再用枸櫞酸鈉抗凝靜脈血做血小板計數(shù)，10分鐘內做完，獲得準確的血小板計數(shù)，雖然手工法也可以準確計數(shù)，但較繁鎖，影響因素也較多，可作為復查的方法。

參考文獻

[1]邦顯，劉思景.抗凝劑EDTA-K2引起的血小板減少原因分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2011，8（19）：2357.

[2]高瓊.EDTA鹽依賴性血小板減少癥1例分析[J].中國誤診學雜志，2012，12（3）：584.