林玉芳　謝倩　陳清西

摘 要 橄欖的苦澀味及藥用成分都與多酚類物質(zhì)密切相關。本試驗利用高效液相色譜法測定橄欖果實中的多酚組分。結(jié)果表明：橄欖中主要的多酚物質(zhì)為鞣花酸，其次是蘆丁、沒食子酸甲酯、金絲桃苷。不同地區(qū)、品種（株系）之間多酚組分含量不相同?！R坑22號和‘霞溪本所含的鞣花酸含量最高，分別達2 484.633、2 214.457 mg/100 g；蘆丁含量最高為‘檀頭和‘霞溪本，分別為490.137、478.545 mg/100 g。

關鍵詞 橄欖；高效液相色譜；多酚類化合物

中圖分類號 S667.5 文獻標識碼 A

橄欖作為藥食兩用的果品，其中所含的橄欖多酚是重要的藥效功能成分。據(jù)悉，橄欖多酚具有解酒護肝、抗菌、抗炎鎮(zhèn)痛、抑制血糖升高、增加骨密度、抗乙肝病毒等作用[1]，橄欖中的多酚主要有沒食子酸、沒食子酸甲酯、短葉蘇木酚、金絲桃苷以及鞣質(zhì)類多酚化合物等。因其自身的營養(yǎng)保健功能，橄欖中的多酚物質(zhì)已被廣泛應用于食品、生化制藥以及日?；瘖y品等各項高科技領域。鞣花酸作為國外正在大力開發(fā)的藥物和保健食品，具有抗突變、抗癌變、抗菌、抗病毒等作用[2-4]。蘆丁被廣泛應用在臨床診治中，具有抗脂質(zhì)過氧化、抗自由基活性、抗急性胰膜炎、抗病毒等作用[5-6]。金絲桃苷是多酚類化合物中的黃酮醇苷類物質(zhì)，具有廣泛的藥理作用，包括鎮(zhèn)痛作用、抗氧化、保肝以及抗乙肝病毒等，具有良好的發(fā)展應用前景，倍受重視[7-9]。

之前關于橄欖多酚的研究僅僅局限于沒食子酸總量以及黃酮總量等的研究，除何志勇[10]對一個品種的橄欖多酚進行純化鑒定外，橄欖各個品種的多酚類化合物組分研究還未曾見過報道。本試驗利用HPLC法對福建省若干橄欖品種（株系）多酚類化合物進行分析，確定各個品種中橄欖多酚組分差異，為今后橄欖的開發(fā)利用提供針對性的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料 從福建省各個地區(qū)選取20個橄欖品種（株系），均為露地栽培。選擇成熟度一致、無病蟲、無畸形的橄欖果實，進行清洗、去核、-40 ℃冷藏等前處理，然后進行真空干燥，干燥果肉用多功能粉碎機磨成粉末，過80目篩，置于-40 ℃冰箱中備用。各個橄欖品種（株系）見表1。

1.1.2 試劑 所用試劑甲醇、乙腈均為色譜純；水為雙蒸水；標樣綠原酸、咖啡酸、香豆酸、阿魏酸、鞣花酸、短葉蘇木酚、沒食子酸、金絲桃苷、山萘酚、沒食子酸甲酯、蘆丁、槲皮素等均為色譜純。

1.2 方法

1.2.1 多酚類化合物的提取 精確稱取0.1 g橄欖干粉，用1 mL甲醇提取，10 min后于9 000 g，4 ℃下離心15 min，重復3次，合并上清液于5 mL容量瓶中，用甲醇定容，以0.45 μm微孔有機膜過濾備用。

1.2.2 HPLC分析 用高效液相色譜（Hitachi L-2000，四元梯度洗脫，自動進樣器）檢測橄欖果實多酚類化合物組分。色譜柱：Agilent C18柱（150 mm×4.6 mm），為日立UV-VIS L2419紫外檢測器，配有EZ Chrom Elite D-2000工作站。流動相由A、B 2相組成，A相為水/乙酸（100/0.5，V/V），B相為乙腈，流速為1 mL/min，進樣量20 μL，洗脫梯度見表2。

1.3 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用Excel與SPSS 17.0軟件進行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 橄欖多酚組分差異分析

從橄欖酚類化合物的HPLC色譜圖（圖1、圖2）可知，圖中顯示提取物中有12種酚類組分，其中出峰時間為11.88 min的組分吸收信號最強，在部分品種中，含量高達90.41%，確定為橄欖提取物的主要酚類物質(zhì)。通過比較橄欖各酚類組分與各個標樣的HPLC出峰時間，可以確定出峰時間為11.88 min的酚類組分為鞣花酸，由此初步推斷，橄欖中的主要酚類物質(zhì)為鞣花酸。

從表3的橄欖多酚組分含量可以看出，所測20個品種（株系）中，含量最高的基本都為鞣花酸，在124.43～2 484.63 mg/100 g之間，占總多酚物質(zhì)的90.41%～17.11%，其中以‘馬坑22號和‘霞溪本含量最高，‘南安1號含量最低。其次是蘆丁和沒食子酸甲酯，含量分別在110.23～490.14 mg/100 g、73.63～185.94 mg/100 g之間。從表3還可以看出，香豆酸、山萘酚和短葉蘇木酚在各個品種中含量很少，幾乎檢測不出；而槲皮素在部分品種中也幾乎沒有，如‘上丈21號和‘長營株系。各個品種中多酚類組分含量均不相同，所占總多酚比例也不盡相同，由此可以推測，橄欖中所含多酚組分的比例與橄欖口感、風味等關系密切。

2.2 橄欖多酚及品種聚類分析

2.2.1 橄欖多酚類組分聚類分析 根據(jù)橄欖多酚組分聚類分析可知（圖3），鞣花酸自成一類，無相似項；蘆丁和沒食子酸甲酯聚為一類，即為相似水平類；其他多酚組分聚為同一類，相似程度較高。

2.2.2 橄欖品種聚類分析 從20個橄欖品種（株系）的聚類距離和先后步驟可以看出（圖4），D1和B1（‘馬坑22號、‘霞溪本）在各個多酚組分含量上相似水平較高，首先聚為一類；D2和D4（‘惠圓、‘檀頭）聚為一類，即二者為相似水平類；其次是A1、A3、C1、D3、D7、E1、C4聚為一類，同為相似類；最后剩下的9個品種聚為一類。

3 討論與結(jié)論

橄欖的苦澀味及藥用成分均與其所含多酚類物質(zhì)密切相關。根據(jù)何志勇[10]報道，橄欖果實中主要的酚類化合物為沒食子酸，其次為鞣花酸。陳崗[11]報道，橄欖中主要酚類物質(zhì)是蘆丁。本研究發(fā)現(xiàn)，橄欖中主要的多酚物質(zhì)是鞣花酸。關于鞣花，已在石榴皮[12]、葡萄[13]、烏帕[14]以及紅木莓、草莓等[15]植物中提取得到。本試驗中，‘馬坑22號和‘霞溪本所含的鞣花酸含量最高，達2 484.633、2 214.457 mg/100 g，可作為鞣花酸提取來源進行工業(yè)化生產(chǎn)。

本試驗研究還得出，在20個橄欖品種中，蘆丁含量相對較高，最高的為‘檀頭和‘霞溪本，含量分別為490.137、478.545 mg/100 g，在所測品種中，所有橄欖的蘆丁含量均遠高于同是藥食兩用的桑葚蘆丁含量（51.05 mg/100 g）[16]，可見，橄欖也可作為蘆丁工業(yè)化生產(chǎn)的原料。沒食子酸甲酯含量相對較高的是‘上丈21號，為199.527 mg/100 g，最低的是‘惠園，為61.958 mg/100 g，目前對沒食子酸甲酯的藥效研究較少，主要在工業(yè)上進行合成[17]，因此有必要對橄欖中的沒食子酸甲酯進行深入研究，以確定其藥效作用。

在橄欖中，因品種不同，金絲桃苷含量高低相差較大，最高的可達236.517 mg/100 g（‘攀岐18號），而最低含量僅為12.082 mg/100 g（‘惠圓），可見不同品種之間，金絲桃苷含量差異顯著，應根據(jù)不同需要對不同品種進行有針對性的開發(fā)利用。

不同的橄欖所含的多酚組分不同，即使含量很少的香豆酸、槲皮素、山萘酚以及短葉蘇木酚等也都呈現(xiàn)不一樣的差異，且各個組分在藥理作用上均有所差別，無法判定品種的優(yōu)劣，應對橄欖的藥理及食用價值進行判斷，并有針對性地進行分析研究，以確定橄欖今后的加工及藥物開發(fā)利用方向，為其提供一定的研究基礎。目前，關于橄欖中多酚組分的具體藥效尚未進行試驗認證，因此今后可進一步對橄欖各個多酚組分進行小白鼠試驗，以明確橄欖多酚的具體藥理作用，為更好地利用其奠定良好的基礎。

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