石金娥等

摘 要：采用GC-MS監(jiān)測(cè)豆芽中4-氯苯氧乙酸、萘乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸、2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、吲哚乙酸、吲哚丁酸等7種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的含量狀況，以了解吉林省市售豆芽中常見(jiàn)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的濫用情況。抽取的14批次豆芽樣品中，4-氯苯氧乙酸、吲哚乙酸兩種調(diào)節(jié)劑均有不同程度的檢出，4-氯苯氧乙酸的檢出值在0.07～0.99mg/kg范圍，檢出率高達(dá)71.4%；吲哚乙酸的檢出值在0.77～40.82mg/kg范圍，檢出率達(dá)21.4%。說(shuō)明，豆芽市場(chǎng)濫用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的現(xiàn)象依然存在，豆芽市場(chǎng)有待進(jìn)一步監(jiān)管和規(guī)范。

關(guān)鍵詞：豆芽 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 4-氯苯氧乙酸 吲哚乙酸 含量監(jiān)測(cè)

豆芽類蔬菜為廣大市民經(jīng)常食用的一類價(jià)廉物美的食品，其營(yíng)養(yǎng)豐富，富含蛋白質(zhì)、B族維生素和微量元素，且易于被人體消化吸收。一直以來(lái)，我國(guó)豆芽多以作坊式生產(chǎn)為主，在豆芽生產(chǎn)過(guò)程中肆意添加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑催發(fā)豆芽生長(zhǎng)常有發(fā)生，添加的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑主要有2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、4-氯苯氧乙酸（CPA）、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等[1，2]，濫用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑會(huì)給健康帶來(lái)風(fēng)險(xiǎn)，已成為目前食品安全領(lǐng)域的一個(gè)重大問(wèn)題。

目前，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的檢測(cè)手段主要有液相色譜法[3，4]、液相色譜-質(zhì)譜法[5]及氣相色譜-質(zhì)譜法[6]等。而國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)工作要求采用GC/MS法同時(shí)檢測(cè)豆芽中的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，且要求豆芽中的2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、CPA、2，4-D、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑不得在豆芽樣品中檢出（檢出限均為0.01mg/kg），以考察市售豆芽中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的濫用狀況，為進(jìn)一步監(jiān)管和規(guī)范豆芽市場(chǎng)提供數(shù)據(jù)支持。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器

6890GC-5973MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)Agilent公司）；分析天平（梅特勒-托利多公司），精度為0.1mg；超聲波清洗器（江蘇昆山市超聲儀器有限公司）；旋渦混勻器、烘箱、氮吹儀、離心機(jī)（上海精科公司）。

1.2 材料與試劑

乙腈、甲酸、甲醇、乙酸乙酯、正己烷、鹽酸、三氟化硼乙醚溶液、氯化鈉、無(wú)水硫酸鈉均分析純；QuECHERS試劑盒（貨號(hào)CLE008，300mg/管，杭州福?？萍挤?wù)有限公司）；MCX固相萃取柱（200mg/6mL，WATERS公司）。

2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、CPA、萘乙酸、2，4-D、吲哚乙酸、吲哚丁酸標(biāo)準(zhǔn)品，純度均大于99.0%，購(gòu)于德國(guó)Dr Ehrenstorfer GmbH公司

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液及試劑配制

7種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑混合貯備液（1.0g/L）：分別稱取0.025g（精確到0.1mg）上述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇分別溶解并定容至25mL，4℃保存。

5.0mg/L植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑混合應(yīng)用液：各吸取1.0g/L植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑貯備液0.5mL，用甲醇定容至100mL，4℃保存。20%乙酸乙酯-正己烷混合液：吸取2mL乙酸乙酯和8mL正己烷混合而成。10%三氟化硼甲醇衍生溶：吸取1mL三氟化硼乙醚溶液和9mL甲醇混合而成，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.4 樣品處理

實(shí)驗(yàn)采用國(guó)家風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)指定方法[7]對(duì)14批次豆芽樣品進(jìn)行測(cè)定。具體方法如下：

1.4.1 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑提取

稱取搗碎的豆芽試樣10.0g于50mL離心管中，加入20mL乙腈、40μL甲酸，漩渦混勻1min，超聲提取30min，8000r/min離心5min，上清液轉(zhuǎn)移至另一支50mL離心管中，加入3.0gNaCl，漩渦混勻；8000r/min離心5min，吸出乙腈層，用無(wú)水Na2SO4脫水后收集至圓底燒瓶?jī)?nèi)，50℃水浴真空濃縮至干，在圓底燒瓶?jī)?nèi)加入2 mL甲醇超聲溶解。

1.4.2 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑凈化

取上述甲醇樣液1mL，加到QuECHERS試劑管中，混勻，靜止5min，混勻，10000r/min離心2min，取上清液進(jìn)行GC/MS分析測(cè)定2，4-D-乙酯和2，4-D-丁酯。

另取甲醇樣液1mL，加入9mL 40m mol/L HCl，超聲混勻，轉(zhuǎn)移至離心管后8000r/min離心5min，上清液待凈化。先用5mL甲醇、5mL水、5mL 40mmol/L HCl溶液活化MCS柱，活化結(jié)束后上清液轉(zhuǎn)移到MCS柱內(nèi)，待樣液過(guò)柱后，用5mL水淋洗除雜，真空抽干柱內(nèi)液體后加入5mL甲醇洗脫，收集于10mL具塞試管內(nèi)，待衍生。

1.4.3 衍生化

將待衍生組分加入1mL10%三氟化硼甲醇衍生溶液，渦旋混勻，70℃加熱衍生30min，取出冷卻后再加入1.0mL20%乙酸乙酯-正己烷混合液和2mL純水，渦旋混勻，4000r/min離心5min，吸出上層有機(jī)相，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶中進(jìn)行GC/MS分析。分別吸取5.0mg/L植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑混合應(yīng)用液0.05，0.1，0.2，0.4和1.0mL，以甲醇定容至1.0mL與樣品一起進(jìn)行衍生測(cè)定，繪制含量（0.25，0.5，1.0，

2.0和5.0mg/L）與響應(yīng)面積標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.5 分析條件

氣相色譜條件DB-5MS毛細(xì)管色譜柱（30m×0.25mm×0.25μm），進(jìn)樣口溫度：260℃；載氣：高純氦氣，純度≥99.999%；載氣流速：1.0mL/min；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1μL。升溫程序：80℃，保持1min，以10℃/min升溫至290℃，保持5min；質(zhì)譜條件GC/MS接口溫度：280℃；離子源溫度：230℃；四級(jí)桿溫度150℃；電離方式EI源；電離電壓：70eV；選擇離子監(jiān)測(cè)模式，監(jiān)測(cè)離子見(jiàn)表1。

2 結(jié)果與討論

2.1 7種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在豆芽中的檢出情況

抽取14批次市售豆芽，其中黃豆芽5批次，綠豆芽9批次。檢測(cè)結(jié)果顯示，CPA和吲哚乙酸均有不同程度的檢出，其他生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑均未檢出，具體檢出情況見(jiàn)表2；總離子流圖見(jiàn)圖1。

2.2 結(jié)果分析

吉林省抽取的14批次豆芽樣品中，CPA、吲哚乙酸兩種調(diào)節(jié)劑均有不同程度的檢出，CPA的檢出值在0.07～0.99mg/kg范圍，檢出率高達(dá)71.4%；吲哚乙酸的檢出值在0.77～40.82mg/kg范圍，檢出率達(dá)21.4%。目前國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)工作要求豆芽中的2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、CPA、2，4-D、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑不得在豆芽樣品中檢出，由上述較高的檢出率說(shuō)明，豆芽市場(chǎng)濫用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的現(xiàn)象依然存在，豆芽市場(chǎng)有待進(jìn)一步監(jiān)管和規(guī)范。

3 討論

豆芽是人們喜歡的蔬菜之一，在生產(chǎn)過(guò)程中部分生產(chǎn)者喜歡用生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑催芽，從而導(dǎo)致其生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑含量偏高。由于目前國(guó)內(nèi)還沒(méi)有生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑殘留的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)和限量標(biāo)準(zhǔn)，加之植物中還有內(nèi)源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和外源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑之分，因此在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中很難判定生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑是否超標(biāo)。

同時(shí)蔬菜中生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的檢測(cè)方法也不盡完善，沒(méi)有相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。目前多采用液相色譜、液質(zhì)聯(lián)用、氣質(zhì)聯(lián)用等方法，因此如何統(tǒng)一方法，建立標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)完善蔬菜中生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的使用和監(jiān)督有重要作用。

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