【摘 要】目的：了解本縣地中海貧血基因型的分布情況，為本縣育齡人群優(yōu)生優(yōu)育提供遺傳咨詢。方法：采用PCR和反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)檢測293例篩查陽性標(biāo)本。結(jié)果：293例中143例基因診斷為地中海貧血攜帶者，α-地中海貧血基因攜帶者98例（其中HbH病4例），β-地中海貧血攜帶者37例，α-地貧復(fù)合β-地貧攜帶者8例 。結(jié)論：廣泛宣傳地貧知識、擴(kuò)大篩查范圍、加強(qiáng)基因診斷是地貧高發(fā)區(qū)提高人口質(zhì)量、阻斷重型（包括中間型）地貧患兒出生的有效途徑。

【關(guān)鍵詞】地中海貧血；基因診斷； 篩查

【中圖分類號】R556 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1004-7484（2014）02-0574-02

地中海貧血是一組嚴(yán)重威脅人類健康的致死、致殘的遺傳性血液病，該病在我國南方有較高的發(fā)病率，廣西地區(qū)α-和β-地中海貧血的發(fā)病率最高，其中α-地中海貧血基因攜帶率17.75%，β-地中海貧血基因攜帶率6.54%[1]，每年重型地中海貧血出生新生兒>3000人（包括中間型地中海貧血）[2]，而重癥地貧目前尚無理想的治療方法且需付出高昂的代價，預(yù)防措施是通過基因診斷阻止重型地貧患兒的出生。地中海貧血基因突變有明顯的地域群體差異性，現(xiàn)將 143份診斷結(jié)果分析如下：

1 研究對象和方法

1.1 研究對象、標(biāo)本采集和保存

在賓陽婦幼保健院進(jìn)行孕檢、婚檢和全縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院RBC指標(biāo)MCV和（或）MCH篩查陽性的孕婦及其配偶共293例，每例均是自愿檢查并簽訂地貧基因診斷知情同意書。抽取RBC指標(biāo)篩查陽性的患者靜脈血4ml，2 ml置ETDA-K2抗凝管抗凝2-8℃保溫運(yùn)送本地區(qū)指定的產(chǎn)前篩查中心，未能及時送檢標(biāo)本4℃冰箱保存，一周內(nèi)送檢，另2ml用ETDA抗凝做血紅蛋白分析。

1.2 方法

采用全自動血細(xì)胞分析儀分析RBC指標(biāo)（MCV、MCH），血紅蛋白組分分析采用Bio-RadVARIANTTMⅡ HPLC血紅蛋白分析系統(tǒng)。6種常見α-地中海貧血和17種β-地中海貧血基因檢測送本地區(qū)指定的產(chǎn)前基因診斷中心。

1.3 篩查判斷標(biāo)準(zhǔn)

血液紅細(xì)胞指標(biāo)MCV/MCH陽性標(biāo)準(zhǔn)：MCV<82fl、MCH≤27pg（廣西衛(wèi)生廳標(biāo)準(zhǔn)），血紅蛋白HPLC分析HbA2正常值2.8%，HbA2>4.0%疑為β-地貧，其他類型血紅蛋白參照相應(yīng)的HPLC分析數(shù)據(jù)庫及色譜予以判斷。

1.4 基因診斷檢測類型 α-地中海貧血基因檢測常見3種缺失類型（（即：東南亞缺失型（--SEA/）、右缺失型（-α3.7/）、左缺失型（-α4.2/）和3種非缺失類型類型（即：αcs/α、αQsα/、αWsα/），β-地中海貧血基因檢測中國人常見17種點(diǎn)突變類型即：CD41-42、CD71-72、CD27-28、CD14-15 CD31、CD17、CD43、Int、CAP、IVS-Ⅰ-1、IVS-Ⅰ-5、IVS-Ⅱ-654、βE、-32、-29、-28、-30。

2 結(jié)果

293例RBC指標(biāo)（MCV、MCH）和/或低于判斷標(biāo)準(zhǔn)的雙陽夫婦中，檢出α-地貧98例（包括HbH病4例）。β-地中海貧血37例，診斷為β-地貧攜帶者的HbA2均≥4.1%，α-地中海貧血復(fù)合β-地中海貧血攜帶者8例HbA2均≥5%，HbCS、HbH病全部檢出出CS、HbH，基因檢測6中常見類型α-地中海貧血均被檢出，檢出5種β-地中海貧血突變位點(diǎn)，4例HbH病的基因型為：--SEA/-α3.71例、--SEA/ -α4.21例、--SEA/αcsα 2例。143地中海貧血基因診斷結(jié)果見下表一和表二：

3討論

293份RBC表型篩查陽性標(biāo)本，有143例基因診斷為地中海貧血基因攜帶者，確診率占地中海貧表型篩查陽性的48.81%（143/293），尤其β-地貧攜帶者初篩和基因診斷完全吻合，充分證明在地中海貧血高發(fā)區(qū)對育齡人群大規(guī)模實(shí)行RBC指標(biāo)（MCV、MCH） 篩查和血紅蛋白初診的重要性。143例地中海貧血基因攜帶者中，α-地中海貧血占68.5%（98/143），以--SEA/、αc s α/、-α3.7/ 3種類型多見，結(jié)果與報(bào)道的南寧[3]、橫縣[4]、梧州[5]相似，其中非缺失型α-地貧也占到27.66%與廣州的相同[6]，而αcsα/高于αWsα/，與有關(guān)資料不同[7]，原因可能是αcsα/能引起較重的血液學(xué)表型而被納入基因確診的范圍有關(guān)，輕型α-地貧、輕型β-地貧、α復(fù)合β地貧和中間型地貧一般引起MCV、MCH的明顯變化，表現(xiàn)出典型的小細(xì)胞低色素性貧血，臨床上相對不容易漏診，而靜止型地貧的 MCV、MCH通常都沒有明顯異常，臨床上極容易漏診，所以當(dāng)配偶基因診斷為輕型地貧時，另一方必須做地貧基因診斷以避免中間型地貧患兒的出生（此型患者臨床表現(xiàn)輕重不一，輕者只有輕度貧血，重者需要依靠輸血才能維持生命），但由于地貧知識的缺乏和沒有足夠的重視，沒有表型陽性的一方通常忽視醫(yī)生的建議而不做基因診斷。37例β-地中海貧血攜帶者檢出5種基因突變類型，以CD41-42和CD17的突變?yōu)橹?，而較少見的IVS-Ⅰ-1（G>T ）在送檢標(biāo)本不多（293份）的情況被檢出與有關(guān)資料不同 [8]，說明地中海貧血突變基因具有高度的異質(zhì)性，某些突變甚至表現(xiàn)出明顯的地域性或群體特異性。廣西是α和β地貧高發(fā)區(qū)，必然存在較多見的α地貧和β-地復(fù)合形成的遺傳類型，由于α-復(fù)合β-地貧表型篩查表現(xiàn)為輕型β-地貧的特征，因此在進(jìn)行基因診斷和遺傳咨詢時，對篩查為β-地貧的攜帶者一定考慮合并α-地貧的可能。缺鐵性貧血和輕型、中間型α、β地貧都表現(xiàn)小細(xì)胞低色素性貧血，而缺鐵性貧血在妊娠中較常見，基因診斷能明確病因?qū)ΠY治療，從而避免濫用補(bǔ)血劑和感染時誤服氧化性藥物，而且對地貧攜帶者的保健提供指導(dǎo)和及早發(fā)現(xiàn)地貧基因遺傳家族也具有重要意義。現(xiàn)今廣西的免費(fèi)篩查僅限于婚檢人群，基因診斷補(bǔ)助對象也僅限于表型篩查雙陽的夫婦，而該地區(qū)地貧和異常血紅蛋白病總攜帶率高達(dá)24.55%，同型地貧婚配的發(fā)生率也較高，同時如今臨床的基因檢測也存在缺陷，只檢測我國95-98%的地貧基因，所以有關(guān)機(jī)構(gòu)支持和推進(jìn)地中海貧血相關(guān)研究就顯得非常重要，由于靜止型、輕型地貧攜帶者的生理、智力、壽命都不受影響無需治療，而重型、中間型地貧卻致死、致殘，如果把篩查范圍擴(kuò)大到新生兒、兒童、青少年，陽性者告知其進(jìn)行基因診斷并出具檢測卡，并提供將來婚配遺傳風(fēng)險(xiǎn)咨詢，讓公眾廣泛認(rèn)識地貧是可防可控的遺傳性疾病，提高基因診斷與產(chǎn)前診斷重要性的認(rèn)識，是預(yù)防重型地貧患兒出生的有效途徑。

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[8] 徐湘民，張新華，陳荔麗. 地中海貧血預(yù)防控制操作指南[M].人民軍醫(yī)出版社，2011年3月第一版：P20.

作者簡介：

文謹(jǐn)，女，主管技師，研究方向：醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，Email：2771882359@qq.com