薛福龍

（暨南大學(xué)附屬第四醫(yī)院/廣州市紅十字會醫(yī)院普通外科，廣東 廣州 510220）

胰腺癌組織端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶的表達(dá)與臨床病理的關(guān)系研究

薛福龍

（暨南大學(xué)附屬第四醫(yī)院/廣州市紅十字會醫(yī)院普通外科，廣東 廣州 510220）

目的研究胰腺癌組織端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）的表達(dá)與臨床病理的關(guān)系。方法回顧性分析我院在2009年6月至2014年2月間收治的46例胰腺癌患者的臨床資料，對胰腺癌病灶大小、具體部位與臨床分明、組織分級進行描述。利用SABC免疫組化，對hTERT表達(dá)進行檢測。同時取46例患者癌旁組織進行對照。結(jié)果經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，患者腫瘤部位和hTERT表達(dá)無關(guān)聯(lián)（P＞0.05）。通過對胰腺癌患者胰腺組織觀察可得知，有39例患者呈現(xiàn)hTERT表達(dá)為陽性，陽性率為84.8%，在癌旁組織中，有12例標(biāo)本呈現(xiàn)為陽性，陽性率為26.1%。hTERT表達(dá)在臨床分期中具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其在Ⅰ期的hTERT表達(dá)陽性率最低，明顯低于Ⅲ期和Ⅳ期。它與腫瘤分級、大小、位置無關(guān)聯(lián)。結(jié)論人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶在胰腺癌組織中表達(dá)較高，它的表達(dá)與腫瘤臨床分期有很大關(guān)聯(lián)，這表明hTERT表達(dá)在腫瘤組織與癌旁組織中的表達(dá)差異非常大。

胰腺癌；人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶；胰腺組織

1 資料與方法

1.1 一般資料

以我院在2009年6月至2014年2月間收治的46例患者為研究對象，所有患者均行腫瘤切除術(shù)，對46例患者的石蠟包埋標(biāo)本進行分析。男性25例，女性21例，患者年齡35～79歲，平均年齡（51.25±2.74）歲。同時取46例患者的癌旁組織進行對照分析。病理科醫(yī)師均對患者標(biāo)本重新切片，實施HE染色后，對疾病進行確診。根據(jù)手術(shù)情況，記錄腫瘤的大小與具體位置。

1.2 標(biāo)本處理

胰腺癌患者標(biāo)本通過手術(shù)對胰腺癌及癌旁組織進行收集獲取。所有標(biāo)本均行石蠟包埋連續(xù)切片，厚度約為5 μm，并貼于玻片上，在溫度為60 ℃的條件下進行烘烤，1～2 h后，可熔蠟，熔蠟后使其置于37 ℃條件下備用，切片分別進行免疫組化染色與HE染色。

1.3 端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶檢測

利用SABC法，陰性對照為PBS，陽性對照為hTERT表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞。如果細(xì)胞質(zhì)染色中包含棕黃色顆粒，則表明其為陽性細(xì)胞。于光鏡下對細(xì)胞數(shù)量進行觀察，若陽性細(xì)胞數(shù)超過了5%，則表明其為陽性。

1.4 胰腺癌組織分級與臨床分期標(biāo)準(zhǔn)

雨又淅淅瀝瀝地下起來了。楊局長、王敬凱和偵技人員等化了裝，前往大架子山。在一條小道邊，有一棵落葉松的樹干被砍了一個小平面，刷著紅油，他們立即圍著樹干用手摳已被雨水浸得松軟的土地，不一會兒，又一個茶色玻璃藥瓶出現(xiàn)了。經(jīng)檢驗，玻璃瓶上還是沒留下指紋。打開密封的瓶蓋，里面一張紙條上寫著一行字：

根據(jù)權(quán)威組織分級標(biāo)準(zhǔn)，將其分為1級、2級、3級。以TNM臨床分期標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)，將胰腺癌組織臨床分期分為0期、Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

對本組研究的數(shù)據(jù)采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用t檢驗，對計數(shù)資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

通過對患者胰腺癌端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）的表達(dá)觀察可得知，有39例患者呈現(xiàn)為陽性，陽性率為84.8%。在癌旁組織中，有12份標(biāo)本顯示為陽性，陽性率為26.1%。胰腺癌hTERT表達(dá)陽性率明顯高于癌旁胰腺組織的hTERT表達(dá)陽性率，對比存在較大差異，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

如表1所示，從表中可得知，hTERT表達(dá)同腫瘤的具體位置和腫瘤大小無關(guān)，無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。hTERT表達(dá)在胰腺組織分級中也無統(tǒng)計學(xué)意（P＞0.05）。hTERT表達(dá)在臨床分期中具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其在Ⅰ期的hTERT表達(dá)陽性率最低，明顯低于Ⅲ其和Ⅳ期。

3 討 論

端粒酶是一種核糖核蛋白酶，其主要組成物質(zhì)為蛋白質(zhì)與RNA?？梢宰陨鞷NA作為模板，對端粒DNA序列進行逆轉(zhuǎn)錄合，并在染色體末端添加[4]。據(jù)相關(guān)研究表明，在惡性腫瘤組織中，端粒酶檢出率非常高，比例為85%～95%，不過在正常組織與良性腫瘤中，端粒酶檢出率約為3.5%，明顯低于惡性腫瘤端粒酶檢出率[5]。

人類端粒酶的構(gòu)成成分主要有三種，分別為RNA、端粒酶催化亞單位、端粒酶相關(guān)蛋白。根據(jù)臨床研究顯示，端粒酶催化亞單位是端粒酶活性的必要物質(zhì)，它在乳癌、肺癌等疾病中，表達(dá)非常高，端粒酶催化亞單位與端粒酶活性在mRNA水平上一致。曾有研究者以直腸癌患者為例，取患者組織標(biāo)本對其進行觀察，通過觀察發(fā)現(xiàn)，腫瘤組織的hTERT表達(dá)與癌旁組織相比明顯要高。

據(jù)研究表明，端粒酶催化亞單位是端粒酶活性最需要的物質(zhì)，在肺癌與乳癌中有表達(dá)較高，染色體5P是端粒酶催化亞單位的基因定位。從本次研究結(jié)果中可看出，hTERT表達(dá)在腫瘤組織中的表達(dá)非常高，且明顯高于癌旁組織，不過二者并未存在太大關(guān)聯(lián)。通過抗hTERT抗體，可實施免疫組化檢測，經(jīng)檢測可發(fā)現(xiàn)，對于端?；钚蕴偷囊认俳M織而言，其hTERT表達(dá)十分顯著。對hTERT蛋白實施原位測定，有利于將端粒酶活性展現(xiàn)出來，對惡性腫瘤進行診斷。

從本次研究可得知，hTERT表達(dá)與腫瘤大小、位置、分級均無太大關(guān)聯(lián)，它與臨床分期關(guān)系較大，在癌旁組織中，陽性率為26.1%，這表明hTERT表達(dá)在腫瘤組織與癌旁組織中的表達(dá)存在很大差異。

[1] 鐘英強,沈溪明,李海剛,等.hTERT在人胰腺癌組織中的表達(dá)及其與COX-2、P-gp、Bcl-2蛋白表達(dá)和臨床病理特征的關(guān)系[J/OL].中華臨床醫(yī)師雜志(電子版),2008,2(8):877-885.

[2] 林若蕓.重組人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因表達(dá)載體的構(gòu)建及檢測端粒長度新方法初探[D].南寧:廣西醫(yī)科大學(xué),2011.

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表2 研究指標(biāo)與感染的關(guān)系分析

經(jīng)Logistic分析顯示，未進行產(chǎn)前阻斷、母體HBV DNA陽性、陰道順產(chǎn)及出生后未24 h內(nèi)接種疫苗均是乙型肝炎病毒攜帶孕產(chǎn)婦母嬰傳播的危險因素，詳細(xì)分析數(shù)據(jù)見表2。

3 討 論

乙型肝炎病毒攜帶孕產(chǎn)婦是孕產(chǎn)婦中極為特殊的一類人群，不僅其自身的疾病需進行有效防控[2,3]，且關(guān)于母嬰傳播方面的干預(yù)控制也極為重要。而要做到有效的防控母嬰傳播的目的，對于母嬰傳播的影響因素全面且細(xì)致的掌握是必要的。臨床中對于此方面的研究并不少見，但是對于其中較多研究指標(biāo)的研究差異不同程度存在[4,5]，如對于母乳喂養(yǎng)的合理性研究爭議較大，另外，對于其他方面研究結(jié)果的差異也提示我們需進一步對此方面進行研究分析。本文中我們即就乙型肝炎病毒攜帶孕產(chǎn)婦母嬰傳播的影響因素進行分析研究，結(jié)果顯示，251例乙型肝炎病毒攜帶孕產(chǎn)婦中新生兒感染的發(fā)生率為5.18%，基本與以往的較多研究一致，且其中未進行產(chǎn)前阻斷、母體HBV DNA陽性、陰道順產(chǎn)及出生后未24 h內(nèi)接種疫苗的新生兒感染率相對更高，但是母乳喂養(yǎng)與人工喂養(yǎng)的感染率之間則無顯著性差異，說明只要做好一定的相關(guān)措施，對于此類產(chǎn)婦仍提倡母乳喂養(yǎng)[6-8]，其并未造成感染率的明顯提升，另經(jīng)Logistic分析處理顯示，未進行產(chǎn)前阻斷、母體HBV DNA陽性、陰道順產(chǎn)及出生后未24 h內(nèi)接種疫苗均是乙型肝炎病毒攜帶孕產(chǎn)婦母嬰傳播的危險因素，應(yīng)注意對上述方面的控制。

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Pancreatic Cancer Telomerase Reverse Transcriptase the Relationship between the Expression and Clinical Pathological Study

XUE Fu-long
(Department of General Surgery, the Fourth Affiliated Hospital of Jinan University, Guangzhou Red Cross Hospital, Guangzhou 510220, China)

ObjectiveResearch on pancreatic cancer telomerase reverse transcriptase (hTERT) expression and clinical pathologic relationship.MethodsRetrospective analysis of our hospital from June 2009 to February 2014 were clinical data of 46 cases of patients with pancreatic cancer, on pancreatic cancer lesion size, site and clinical grading, organization clearly described. Using SABC immunohistochemistry, the expression of hTERT for testing. At the same time take 46 patients with tissue adjacent to carcinoma were compared.ResultsThe study found that patients with tumor site and expression of hTERT unrelated (P＞0.05). Through the observation of patients with pancreatic cancer in the pancreas, 39 patients present expression of hTERT positive, positive rate was 84.8%, in the tissue adjacent to carcinoma, 12 cases with specimen appears as positive, positive rate was 26.1%. Expression of hTERT in clinical stage statistically significant (P＜0.05), and its expression of hTERT positive rate in stage Ⅰ, the lowest significantly below its Ⅲ and Ⅳ. It has to do with tumor grade, size,location.ConclusionHuman telomerase reverse transcriptase in pancreatic cancer tissues is higher, its expression associated with tumor has a great clinical stage, indicating that hTERT expression in tumor tissue and the expression of tissue adjacent to carcinoma difference is very big.

Pancreatic cancer; Human telomerase reverse transcriptase; The pancreas

R735.9

B

1671-8194（2014）11-0004-02