陳詠君陳詠玫張立群夏莉吳麗霞郭晶

219株銅綠假單胞菌感染分布與耐藥性分析*

陳詠君①陳詠玫②張立群③夏莉①吳麗霞①郭晶①

目的：了解銅綠假單胞菌的感染情況及其耐藥性，為臨床合理應(yīng)用抗生素提供科學(xué)依據(jù)。方法：收集本院臨床分離銅綠假單胞菌，分析其科室分布、標(biāo)本來源及耐藥情況。結(jié)果：銅綠假單胞菌主要分布于干診三病房（53.9%），主要以痰液分離最多（91.3%）；其耐藥率分別為：復(fù)方新諾明（100%）、頭孢噻肟（83.94%）、慶大霉素（53.42%）、頭孢他啶（51.83%）、氨曲南（50.55%）、頭孢西林（50.27%）、環(huán)丙沙星（48.62%）、左氧氟沙星（44.95%）、妥布霉素（43.38%）、頭孢吡肟（42.66%）、阿米卡星（26.30%）、哌拉西林/他唑巴坦（22.57%）、美羅培南（16.90%）、亞胺培南（14.39%）。結(jié)論：銅綠假單胞菌的耐藥機(jī)制復(fù)雜，應(yīng)加強(qiáng)醫(yī)院耐藥菌株的監(jiān)測，指導(dǎo)臨床合理使用抗生素，采取有效的防范措施最大限度減少銅綠假單胞菌感染。

銅綠假單胞菌； 耐藥； 分布

銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa PA）廣泛分布于周圍環(huán)境及正常人的皮膚、呼吸道和消化道等部位，是醫(yī)院感染最常見的條件致病菌之一[1]。隨著抗菌藥物的廣泛使用和各種創(chuàng)傷性檢查、治療手段的增加，各種條件致病菌的感染機(jī)會大幅增加，尤其是當(dāng)機(jī)體免疫力低下時，可引起多種感染。臨床報道銅綠假單胞菌是分離率最高的條件致病菌之一，而且呈逐年上升趨勢，銅綠假單胞菌是院內(nèi)感染的主要病原菌。本文對2013年本院住院患者各類標(biāo)本的銅綠假單胞菌分離株的臨床分布特征和耐藥趨勢進(jìn)行回顧性分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集本院2013年門診及住院患者各類標(biāo)本，如痰、膿液、尿液、腹腔引流液等臨床標(biāo)本中分離的銅綠假單胞菌219株（排除重復(fù)菌株）。質(zhì)控菌株為ATCC27853（購自遼寧省臨檢中心）。

1.2 儀器與試劑 采用法國生物梅里埃公司提供的ATB Expression細(xì)菌分析系統(tǒng)，試劑采用配套的ID32GN及ATB ATB G-5藥敏試驗(yàn)板條。

1.3 方法 菌株分離與藥敏試驗(yàn)：標(biāo)本采集和分離培養(yǎng)嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行[2]，獲得純培養(yǎng)后，經(jīng)革蘭染色、氧化酶試驗(yàn)等初篩，再用ID32GN鑒定條在ATB Expression細(xì)菌分析系統(tǒng)上進(jìn)行菌株鑒定，嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程進(jìn)行操作。藥敏試驗(yàn)使用配套假單胞菌藥敏試劑條ATB ATB G-5檢測最低抑菌濃度。每周用銅綠假單胞菌ATCC27853做質(zhì)控，參照美國臨實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會藥敏判斷標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果[3]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用WHONET 5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 219株銅綠假單胞菌的來源分布 219株銅綠假單胞菌分布來源比例可以看出，痰液比例最高，達(dá)91.3%（200/219）；其次為分泌物5.9%（13/219）、尿標(biāo)本1.4%（3/219）、膿液0.5% （1/219）、血液0.5%（1/219）、其他0.5%（1/219）。

2.2 219株銅綠假單胞菌的科室分布 219株銅綠假單胞菌科室分布分別為干診三病房118株（53.9%），心外科病房37株（16.9%），呼吸病房28株（12.8%），干診二病房16株（7.4%），干一病房6株（2.7%），普外病房4株（1.8%），耳鼻喉病房3株（1.4%），其他科室7株（3.2%）。

2.3 219株銅綠假單胞菌對14種抗菌藥物的耐藥率 其中敏感率較高的抗菌藥物有亞胺培南（14.39%）、美羅培南（16.90%）、阿米卡星（26.3%）、哌拉西林/他唑巴坦（22.6%），而對復(fù)方新諾明（100%）、頭孢噻肟（83.94%）、慶大霉素（53.42%）、環(huán)丙沙星（48.62%）、頭孢他啶（51.83%）等耐藥率均較高，見表3。

表3 219株銅綠假單胞菌對14種抗菌藥物的耐藥率

3 討論

銅綠假單胞菌分布廣泛，是正常人皮膚、黏膜、呼吸道和消化道中常見的定植菌，因此也是醫(yī)院感染最常見的病原菌之一[1]。本研究資料顯示，銅綠假單胞最常見分離自痰標(biāo)本（91.3%），其次是分泌物（5.9%），表明銅綠假單胞菌在本院院內(nèi)感染中最常見的感染部位是呼吸道。這與國內(nèi)的報道相同[4-8]。219株銅綠假單胞菌科室分布以干診三病房分離率為最高118株（53.9%），其次為心外病房37株（16.9%），再次為呼吸病房28株（12.9%），提示干診三病房、心外病房、呼吸病房的患者為醫(yī)院感染的高危人群，應(yīng)加以注意。

本研究顯示銅綠假單胞菌對復(fù)方新諾明、頭孢噻肟的耐藥率分別為100%和83.94%，因此在治療中應(yīng)首先排除此類藥物。本研究顯示：對銅綠假單胞菌耐藥率較低的抗菌藥物依次為亞胺培南（14.39%）、美羅培南（16.90%）阿米卡星（26.30%）、哌拉西林/他唑巴坦（22.57%）。哌拉西林是半合成青霉素中抗菌作用最強(qiáng)的，在臨床大量使用抗生素的情況下，耐藥率逐年上升，為50.27%，而當(dāng)與β內(nèi)酰胺酶抑制劑他唑巴坦聯(lián)合使用時耐藥率可降至22.57%。因此臨床治療應(yīng)首選以上耐藥率低的藥物。

銅綠假單胞菌對亞胺培南的耐藥機(jī)制包括：Opr D2的缺失、金屬酶的產(chǎn)生、主動泵出系統(tǒng)和Amp C酶的超水平表達(dá)等等[9]。亞胺培南產(chǎn)生耐藥有兩個危險因素：主要因素是曾經(jīng)使用過亞胺培南藥物；因?yàn)橛眠^亞胺培南藥物治療的患者產(chǎn)生耐藥的概率是未用過的24倍；其次是患者接受過其他內(nèi)酰胺類藥物進(jìn)行抗感染治療，則可能會激活β‐內(nèi)酰胺酶生成脫抑制，繼而會誘導(dǎo)銅綠假單胞菌失去其孔蛋白Opr D2，形成亞胺培南耐藥[10]。本研究結(jié)果顯示，銅綠假單胞菌對亞胺培南耐藥率為14.39%，可見臨床應(yīng)合理使用抗菌藥物，特別是亞胺培南的使用應(yīng)謹(jǐn)慎，以延緩銅綠假單胞菌對亞胺培南的耐藥性發(fā)展。

本研究中銅綠假單胞菌對頭孢吡肟、頭孢他啶、環(huán)丙沙星、哌拉西林、慶大霉素、妥布霉素、和左氧氟沙星的耐藥率＞40%，其中喹諾酮類抗菌藥中環(huán)丙沙星與左氧氟沙星的耐藥率分別為48.62%和44.95%，與2010年全國銅綠假單胞菌耐藥監(jiān)測結(jié)果基本一致[11]。環(huán)丙沙星與左氧氟沙星的耐藥，可能由于本院臨床這兩種藥的使用率較高，致使其易發(fā)生細(xì)菌DNA旋轉(zhuǎn)酶A亞單位的結(jié)構(gòu)突變和細(xì)胞膜通透性改變，因此應(yīng)注意限制其使用，降低此類抗菌藥物的選擇壓力，以期恢復(fù)其敏感性。

銅綠假單胞菌的耐藥機(jī)制十分復(fù)雜，包括外膜通透性障礙、作用靶位改變、產(chǎn)生滅活酶、形成生物膜和主動外排泵系統(tǒng)等，且其對不同抗生素耐藥機(jī)制也有所不同，往往是幾種耐藥機(jī)制共同作用，使其對多種抗生素產(chǎn)生耐藥[12-13]。因此，應(yīng)加強(qiáng)醫(yī)院耐藥菌株的監(jiān)測，并且及時報告給各臨床科室，指導(dǎo)其合理使用抗生素，采取有效的預(yù)防措施最大限度限制銅綠假單胞菌的醫(yī)院感染。

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Infection Distribution and Drug Resistance Analysis of 219 Strains of Pseudomonas Aeruginosa

CHEN Yongjun，CHEN Yong-mei，ZHANG Li-qun，et al.//Medical Innovation of China，2014，11（12）：080-082

Objective：To understand Pseudomonas aeruginosa infection and drug resistance for clinical rational use of antibiotics and provide scientific basis.Method：219 strains of clinical isolated pseudomonas aeruginosa were collected in our hospital， its distribution， specimen source department and drug resistance were analyzed.Result：Pseudomonas aeruginosa was mainly distributed in the three veteran cadres wards （53.9%）， was mainly the separation of sputum specimens （91.3%）；drug resistance rate： cotrimoxazole （100%）， cefotaxime （83.94%）， gentamicin （53.42%）， ceftazidime （51.83%） aztreonam （50.55%）， cephalosporins amoxicillin （50.27%）， ciprofloxacin （48.62%）， levofloxacin （44.95%）， tobramycin （43.38%），cefepime （42.66%）， amikacin （26.3%）， piperacillin / tazobactam （22.57%）， meropenem （16.9%）， imipenem （14.39%）.Conclusion：Drug resistance of Pseudomonas aeruginosa mechanism is complex， should strengthen the monitoring of hospital drug resistant strains， to guide clinical rational use of antibiotics， take effective measures to prevent minimize Pseudomonas aeruginosa infection.

Pseudomonas aeruginosa； Resistance； Distributed

10.3969/j.issn.1674-4985.2014.12.030

2014-02-11） （本文編輯：蔡元元）

沈陽醫(yī)學(xué)院科技基金項(xiàng)目（2013020）；遼寧省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目（L2013399）

①沈陽醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院 遼寧 沈陽 110002

②北京海淀婦幼保健院

③沈陽醫(yī)學(xué)院

陳詠君

First-author’s address：The Second Affiliated Hospital of Shenyang Medical College，Shenyang 110002，China