李海龍，劉敏，張海，鄭惠文，周凱歌，王云霞，畢曉瑩

血管性抑郁（vascular depression）是老年遲發(fā)性抑郁的一個(gè)主要類(lèi)型，與腦血管疾病及其危險(xiǎn)因素密切相關(guān)，常伴有以執(zhí)行功能障礙為主的認(rèn)知功能障礙，屬難治性抑郁，且易發(fā)展為血管性癡呆（vascular dementia，VaD）。但血管性抑郁的發(fā)病機(jī)制至今不明。炎癥假說(shuō)認(rèn)為，促炎性細(xì)胞因子可通過(guò)影響單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的代謝通路導(dǎo)致5-羥色胺的減少以及色氨酸毒性代謝產(chǎn)物的增加，進(jìn)而促使海馬神經(jīng)元壞死和凋亡，導(dǎo)致了抑郁癥狀和認(rèn)知功能障礙的發(fā)生[1]。本課題組前期的研究也發(fā)現(xiàn)在反復(fù)缺血再灌注法制備的血管性抑郁動(dòng)物模型中，中樞炎癥細(xì)胞——小膠質(zhì)細(xì)胞活化增生，炎癥相關(guān)核轉(zhuǎn)錄因子（nuclear factor kappa B，NF-κB）p65/p50表達(dá)增加[2]，提示炎癥與血管性抑郁可能存在一定的關(guān)系。

但是常規(guī)抗抑郁藥物如5-羥色胺再攝取抑制劑（selective serotonin reuptake inhibitor，SSRI）或5-羥色胺及去甲腎上腺素再攝取抑制劑（serotonin-norepinephrine reuptake inhibitor，SNRI）通過(guò)增加突觸間隙5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）及去甲腎上腺素（norepinephrine，NE）改善抑郁，但對(duì)血管性抑郁療效欠佳。研究發(fā)現(xiàn)，過(guò)高的炎性細(xì)胞因子可影響腦內(nèi)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)（如5-HT）的合成和再攝取，進(jìn)而導(dǎo)致抑郁[3]，提示血管性抑郁中炎癥反應(yīng)所伴的炎性細(xì)胞因子表達(dá)增高可能也參與影響了相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)的代謝及結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致常規(guī)抗抑郁藥物療效不佳，且容易出現(xiàn)認(rèn)知損害。

因此，本研究擬在前期研究的基礎(chǔ)上，通過(guò)外源性抗炎藥物minocycline抑制多種促炎性細(xì)胞因子表達(dá)，觀察血管性抑郁小鼠行為及神經(jīng)遞質(zhì)代謝的變化，初步探討炎癥抑制在血管性抑郁治療中的作用，為臨床對(duì)血管性抑郁患者的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及模型構(gòu)建 CD1雄性小鼠30只，周齡10周，體重25～30 g（訂購(gòu)于第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，SPF級(jí)），隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組和假手術(shù)組，每組10只，造模前常規(guī)條件下飼養(yǎng)1周。

應(yīng)用前期實(shí)驗(yàn)中采用的反復(fù)缺血再灌注法進(jìn)行制備血管性抑郁小鼠模型[2-5]。步驟如下：小鼠經(jīng)腹腔注射0.3%戊巴比妥麻醉成功后，取仰臥位，門(mén)齒及四肢固定，剪開(kāi)頸前皮膚及筋膜，在氣管兩側(cè)分別分離出左右頸動(dòng)脈，使用小號(hào)動(dòng)脈夾阻斷雙側(cè)頸動(dòng)脈供血5 min后，松開(kāi)動(dòng)脈夾恢復(fù)供血10 min，再次阻斷供血5 min后移除動(dòng)脈夾，術(shù)中密切觀察小鼠呼吸、心跳，術(shù)畢縫合皮膚，立即腹腔注射minocycline（30 mg/kg），對(duì)照組給予腹腔注射等劑量生理鹽水，恒溫板上復(fù)蘇，清醒后放回籠中常規(guī)飼養(yǎng)。假手術(shù)組除不阻斷頸動(dòng)脈供血外，其余手術(shù)操作與實(shí)驗(yàn)組相同。小鼠手術(shù)當(dāng)日定為術(shù)后第1天，術(shù)后第1～7天依照不同分組連續(xù)注射minocycline及生理鹽水每日一次，給藥完成后于術(shù)后第8天開(kāi)始行為學(xué)檢測(cè)。前期工作已發(fā)表模型組與假手術(shù)組行為學(xué)檢測(cè)的結(jié)果，在懸尾實(shí)驗(yàn)、暗箱實(shí)驗(yàn)等抑郁行為檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，模型組動(dòng)物較假手術(shù)組出現(xiàn)明顯的抑郁行為，確定動(dòng)物模型成功[4-5]。

1.2 行為學(xué)檢測(cè) 抑郁行為學(xué)檢測(cè)包括懸尾實(shí)驗(yàn)（tail suspension test，TST）、探洞曠場(chǎng)試驗(yàn)（open-field test）、認(rèn)知功能檢測(cè)為Morris水迷宮檢測(cè)。造模術(shù)后第8天開(kāi)始行為學(xué)測(cè)試。

TST檢測(cè)動(dòng)物的抑郁行為，基于Steru等[6]之前建立的方法稍加改進(jìn)，采用美國(guó)MED association公司Med小鼠懸尾系統(tǒng)，安排在術(shù)后第8天18∶00～22∶00進(jìn)行，距尾尖約1 cm處用膠布固定于懸尾系統(tǒng)測(cè)試箱的尾鉤上，小鼠頭部距地面約7.5 cm，關(guān)閉測(cè)試箱開(kāi)始計(jì)時(shí)，共觀察6 min，適應(yīng)2 min，設(shè)定軟件記錄后4 min的小鼠不動(dòng)時(shí)間。與假手術(shù)組的小鼠不動(dòng)時(shí)間相比較，當(dāng)實(shí)驗(yàn)組或?qū)φ战M小鼠不動(dòng)時(shí)間顯著延長(zhǎng)，可判定為小鼠出現(xiàn)抑郁行為。

探洞曠場(chǎng)試驗(yàn)檢測(cè)動(dòng)物的抑郁行為，根據(jù)文獻(xiàn)中介紹的通用的小鼠分析方法[7]。采用上海吉量軟件科技公司的DigBehv動(dòng)物行為視頻跟蹤分析系統(tǒng)于術(shù)后第9天進(jìn)行，將小鼠依次放入曠場(chǎng)測(cè)試箱（25 cm×25 cm×38 cm）中，測(cè)試箱底部有16個(gè)圓形小洞，放入小鼠后2 min開(kāi)始記錄，測(cè)試時(shí)間15 min，記錄探洞次數(shù)、活動(dòng)時(shí)間與總路程。當(dāng)實(shí)驗(yàn)組或?qū)φ战M小鼠較假手術(shù)組小鼠探洞次數(shù)減少、活動(dòng)時(shí)間縮短或總路程減少且差異有顯著性時(shí)，可判定為該組小鼠出現(xiàn)抑郁行為。

Morris水迷宮檢測(cè)動(dòng)物的認(rèn)知行為，按照文獻(xiàn)中[8]對(duì)小鼠空間認(rèn)知檢測(cè)的方法進(jìn)行定位航行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)采用上海吉量軟件科技公司的DigBehv動(dòng)物行為視頻跟蹤分析系統(tǒng)水迷宮裝置，水池直徑120 cm，高50 cm，維持水溫21～22℃，第三象限放置平臺(tái)，平臺(tái)置于水面下1 cm，術(shù)后第10天開(kāi)始測(cè)試（第9天進(jìn)行訓(xùn)練，每只小鼠訓(xùn)練4次，每次120 s），隨機(jī)選擇4個(gè)象限作為入水點(diǎn)，將動(dòng)物面向池壁放入水中，同時(shí)開(kāi)始記錄小鼠入池至尋找并爬上平臺(tái)所需時(shí)間，即潛伏期（latency），使其在平臺(tái)上停留20 s后取走，如小鼠在120 s內(nèi)未找到平臺(tái)則將其引導(dǎo)上臺(tái)并停留20 s，記錄潛伏期為120 s，計(jì)算每只小鼠的平均潛伏期。

1.3 海馬組織腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-6含量測(cè)定 小鼠術(shù)后第11天處死，磷酸鈉鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）灌注，剝離腦組織，冰上操作分離海馬，稱(chēng)重后加入150 μl生理鹽水勻漿，采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)盒（上海酶聯(lián)生物科技公司提供），根據(jù)操作說(shuō)明進(jìn)行測(cè)定腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor α，TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）含量，檢測(cè)范圍最低值分別為1.4 pg/mg、9.1 pg/mg及0.2 pg/mg。

1.4 5-羥色胺、去甲腎上腺素、多巴胺含量測(cè)定方法與標(biāo)準(zhǔn)曲線 采用美國(guó)安捷倫公司高效液相色譜儀Agilent 1100 Series HPLC，包括在線脫氣機(jī)、四元泵、高性能自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、熒光檢測(cè)器，色譜柱采用Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱（4.6×150 mm 5 μm）；流動(dòng)相：0.1 mol NaAc+0.01 mol乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-2Na）（醋酸調(diào)節(jié)pH=5.1）：甲醇（V/V）=93∶7；柱溫：30℃；流速：1.0 ml/min；進(jìn)樣量：20 μl；熒光增益值：10；激發(fā)波長(zhǎng)：290 nm；發(fā)射波長(zhǎng)：330 nm。精密稱(chēng)取3種神經(jīng)遞質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品至10 ml量瓶中，用2%的HClO4生理鹽水溶解制得標(biāo)準(zhǔn)溶液。對(duì)3種標(biāo)準(zhǔn)溶液依次稀釋?zhuān)频脻舛葹?.0 μg/ml、1.0 μg/ml、0.4 μg/ml、0.2 μg/ml、0.1 μg/ml和0.04 μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，取標(biāo)準(zhǔn)系列溶液20 μl進(jìn)樣分析，以各成分的濃度（C，μ g/ml）對(duì)3種待測(cè)物峰面積（Y），用最小二乘法進(jìn)行線性回歸分析，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程及相關(guān)系數(shù)（表1）。

表1 去甲腎上腺素、多巴胺、5-羥色胺標(biāo)準(zhǔn)曲線

1.5 海馬組織中5-羥色胺、去甲腎上腺素、多巴胺的含量測(cè)定 精密稱(chēng)取小鼠海馬組織于1.5 ml的EP管中，加入150 μl生理鹽水勻漿，加入100 μl的4%HClO4溶液，于14 000 rpm下低溫離心 20 min，取上清液進(jìn)樣分析。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（s）表示，各組間比較采用單因素方差分析，兩組之間的比較采用SNK檢驗(yàn)，P＜0.05被認(rèn)為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 minocycline對(duì)血管性抑郁小鼠抑郁行為及認(rèn)知能力的影響 懸尾實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組及假手術(shù)組的小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間差異具有顯著性（F=6.59，P=0.005）（表2），SNK檢驗(yàn)顯示，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組和假手術(shù)組懸尾不動(dòng)時(shí)間縮短，差異有顯著性，實(shí)驗(yàn)組小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間長(zhǎng)于假手術(shù)組，但兩組差異無(wú)顯著性；探洞曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組及假手術(shù)組的小鼠探洞次數(shù)、活動(dòng)時(shí)間、活動(dòng)路程差異具有顯著性（F=6.17，P=0.008；F=11.55，P＜0.001；F=13.47，P＜0.001）（表2），SNK檢驗(yàn)顯示，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組和假手術(shù)組探洞次數(shù)、活動(dòng)時(shí)間、活動(dòng)路程均增多，且差異有顯著性，實(shí)驗(yàn)組較假手術(shù)組的探洞次數(shù)增多、活動(dòng)時(shí)間減少，但兩組間差異無(wú)顯著性，實(shí)驗(yàn)組較假手術(shù)組小鼠活動(dòng)路程減少，且差異有顯著性。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中，3組小鼠的潛伏期差異有顯著性（F=16.09，P＜0.001），SNK檢驗(yàn)顯示，與假手術(shù)組相比，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組潛伏期延長(zhǎng)，但兩組間相比潛伏期差異無(wú)顯著性。結(jié)果表明，經(jīng)給予minocycline抗炎處理后，血管性抑郁小鼠的抑郁行為可得到改善，但其認(rèn)知能力卻無(wú)明顯改善（表2）。

2.2 minocycline對(duì)小鼠海馬組織腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-6含量的影響 ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組及假手術(shù)組小鼠海馬組織勻漿中TNF-α、IL-1β、IL-6含量差異均有顯著性（F=13.42，P＜0.001；F=18.69，P＜0.001；F=5.49，P=0.010）（圖1），SNK檢驗(yàn)顯示，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組和假手術(shù)組3種促炎性細(xì)胞因子均降低，差異有顯著性，實(shí)驗(yàn)組小鼠海馬炎癥因子含量稍高于假手術(shù)組，但兩組差異無(wú)顯著性。結(jié)果顯示，minocycline對(duì)血管性抑郁小鼠海馬組織中3種促炎性細(xì)胞因子的表達(dá)均有抑制作用。

2.3 minocycline對(duì)小鼠海馬組織5-羥色胺、去甲腎上腺素、多巴胺含量的影響 通過(guò)對(duì)前處理方法的優(yōu)化，最終選擇2%的HClO4生理鹽水溶解，以保證3種神經(jīng)遞質(zhì)的化學(xué)穩(wěn)定性，在此色譜條件下，3種神經(jīng)遞質(zhì)的色譜峰完全分離，保留時(shí)間分別為1.35 min，2.65 min，4.56 min，典型的色譜圖如圖2所示。其標(biāo)準(zhǔn)曲線方程如表1所示，從結(jié)果看出3種化合物在此濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r＞0.9990。海馬組織勻漿中3種神經(jīng)遞質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果顯示，3組樣本中5-HT、DA的含量差異具有顯著性（F=4.17，P=0.026；F=5.18，P=0.012），NE的含量差異無(wú)顯著性（F=2.13，P=0.139）（圖3）。SNK檢驗(yàn)顯示，與實(shí)驗(yàn)組相比，對(duì)照組和假手術(shù)組5-HT含量差異無(wú)顯著性，但假手術(shù)組5-HT含量高于對(duì)照組；與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組與假手術(shù)組DA含量增高，差異具有顯著性，但兩組間DA的含量差異無(wú)顯著性。結(jié)果表明，minocycline對(duì)血管性抑郁模型小鼠海馬中5-HT和NE無(wú)明顯影響，但DA含量增加（圖3）。

表2 minocycline對(duì)血管性抑郁小鼠抑郁行為及認(rèn)知能力的影響

圖1 ELISA檢測(cè)2組小鼠海馬組織勻漿中TNF-α、IL-1β、IL-6濃度注：A：3組海馬勻漿中TNF-α含量對(duì)比，實(shí)驗(yàn)組與假手術(shù)組低于對(duì)照組（**P＜0.01）；B：3組海馬勻漿中IL-1β含量對(duì)比，實(shí)驗(yàn)組與假手術(shù)組均低于對(duì)照組（**P＜0.01）；C：3組海馬勻漿中IL-6濃度對(duì)比，實(shí)驗(yàn)組與假手術(shù)組低于對(duì)照組（*P＜0.05；**P＜0.01）；ELISA：酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定；TNF-α：腫瘤壞死因子-α；IL-1β：白細(xì)胞介素-1β；IL-6：白細(xì)胞介素-6

圖2 高效液相色譜法檢測(cè)海馬勻漿中5-HT、NE、DA色譜圖注：A：5-HT、NE、DA標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品色譜圖，峰1為NE，峰2為DA，峰3為5-HT；B：海馬勻漿中3種遞質(zhì)色譜圖；5-HT：5-羥色胺；NE：去甲腎上腺素；DA：多巴胺

圖3 高效液相色譜檢測(cè)2組小鼠海馬組織勻漿中5-HT、NE、DA含量對(duì)比注：與對(duì)照組相比，*P＜0.05；**P＜0.01；5-HT：5-羥色胺；NE：去甲腎上腺素；DA：多巴胺

3 討論

1997年Alexopoulos首次提出“血管性抑郁”的概念，但腦血管疾病導(dǎo)致抑郁發(fā)生的機(jī)制不明。Alexopoulos分析了一系列臨床研究后于2011年提出了血管性抑郁發(fā)病機(jī)制的“炎癥反應(yīng)假說(shuō)”[9]，認(rèn)為年齡及腦血管病相關(guān)的炎癥過(guò)程介導(dǎo)了抑郁癥狀的發(fā)生。

薈萃分析發(fā)現(xiàn)，經(jīng)典的SSRI類(lèi)抗抑郁藥物可降低血清中TNF、IL-1β、IL-6水平[10]，TNF-α拮抗劑依那西普和非甾體消炎藥塞來(lái)昔布對(duì)重癥抑郁患者的癥狀改善具有一定的治療效果，但機(jī)制仍不明確[11-12]。盡管抗炎治療抑郁的研究取得一定進(jìn)展，但針對(duì)血管性抑郁的抗炎干預(yù)研究仍然較少。

第二代半合成四環(huán)素類(lèi)藥物minocycline可快速通過(guò)血腦屏障，抑制腦內(nèi)炎癥反應(yīng)，其抗炎作用主要通過(guò)直接和間接地抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)中小膠質(zhì)細(xì)胞的激活和增殖，進(jìn)而減少TNF-α、IL-1β、IL-6等細(xì)胞因子的釋放表達(dá)[13]。而前述的炎癥反應(yīng)抑制劑依那西普、塞來(lái)昔布僅針對(duì)部分炎性細(xì)胞因子的表達(dá)進(jìn)行抑制，非特異性抗炎作用不如minocycline全面有效。本研究首先觀察了給藥后海馬組織勻漿中的TNF-α、IL-1β、IL-6含量，結(jié)果顯示給藥組3種炎性細(xì)胞因子的表達(dá)明顯減少，表明minocycline可以顯著抑制血管性抑郁小鼠海馬中炎性細(xì)胞因子的表達(dá)。

本研究采用前期研究中使用過(guò)的血管性抑郁小鼠模型，模擬缺血低灌注損傷所致的血管性抑郁，在前期工作中，本課題組在抑郁行為檢測(cè)中觀察到該模型小鼠較假手術(shù)小鼠具有明顯的抑郁行為且不伴有神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能缺損，同時(shí)在腦組織中觀察到以少突膠質(zhì)細(xì)胞減少為特征的腦白質(zhì)損傷（white matter lesions，WMLs）[4-5]。而Sneed等[14]研究證實(shí)皮層下深部白質(zhì)損傷是血管性抑郁特征性的神經(jīng)病理學(xué)改變，同時(shí)也是血管性抑郁作為老年遲發(fā)性抑郁一種亞型的依據(jù)。因此，該模型能夠有效地模擬血管性抑郁的病理生理狀態(tài)，是研究血管性抑郁的可靠模型。本研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)連續(xù)給予minocycline抑制炎癥反應(yīng)后，實(shí)驗(yàn)組小鼠抑郁行為較對(duì)照組明顯改善，進(jìn)一步驗(yàn)證了TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性細(xì)胞因子在血管性抑郁發(fā)生中的重要作用。

炎性細(xì)胞因子導(dǎo)致抑郁發(fā)生的機(jī)制很多，其中神經(jīng)遞質(zhì)消耗被認(rèn)為是主要途徑之一[15]。研究認(rèn)為，炎性細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ激活2，3-吲哚胺雙加氧酶（indoleamine 2，3-dioxygenase，IDO），降低了左旋色氨酸水平，從而導(dǎo)致腦內(nèi)5-HT生成減少，是炎癥導(dǎo)致抑郁的重要分子通路[16]。炎性細(xì)胞因子還可以通過(guò)影響5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)體的活性來(lái)調(diào)節(jié)突觸5-HT的利用度。研究證實(shí)，IL-1β、TNF-α均可通過(guò)p38絲裂原活化蛋白激酶（mitogenactivated protein kinase，MAPK）依賴(lài)的信號(hào)通路快速激活5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)體，導(dǎo)致突觸間隙5-HT減少，這也是炎癥誘發(fā)動(dòng)物抑郁樣行為的機(jī)制之一[17]。此外，炎性細(xì)胞因子激活的MAPK信號(hào)通路還可以提高多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體的活性，從而使多巴胺再攝取增加致使突觸間隙中多巴胺濃度降低[18]。

血管性抑郁與應(yīng)激相關(guān)的抑郁有不同之處，患者易同時(shí)伴有以執(zhí)行功能障礙為主的認(rèn)知能力損害，且對(duì)SSRI類(lèi)抗抑郁藥的療效較差[19]。本研究中，抗炎治療盡管抑郁行為有所改善，但并不能顯著提高海馬勻漿5-HT和NE的含量，且DA含量明顯升高，可能由于血管性抑郁的抑郁行為并非單純基于5-HT或NE的減少，這也可能是臨床上SSRI類(lèi)藥物療效欠佳的原因之一，因此，臨床針對(duì)血管性抑郁的患者，早期應(yīng)用具有調(diào)節(jié)多巴胺受體功能的藥物（如非典型性抗精神病藥物），可能具有預(yù)防認(rèn)知障礙的作用。這與本課題前期工作通過(guò)非典型性抗精神病藥物預(yù)防血管性癡呆動(dòng)物認(rèn)知障礙及白質(zhì)髓鞘損傷的研究結(jié)果相吻合[5]。在血管性抑郁發(fā)生過(guò)程中，炎癥對(duì)DA代謝的具體調(diào)節(jié)通路及機(jī)制有待在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)水平進(jìn)一步完善和驗(yàn)證。

本研究的不足在于，由于用藥時(shí)間較短，抗炎治療對(duì)動(dòng)物的認(rèn)知恢復(fù)未觀察到明顯的效果，仍然不能說(shuō)明抗炎治療對(duì)認(rèn)知改善無(wú)效。目前針對(duì)認(rèn)知障礙前期——即可逆期的研究成為熱點(diǎn)，本研究將進(jìn)一步進(jìn)行長(zhǎng)程給藥與預(yù)防性給藥對(duì)認(rèn)知功能的影響，為臨床防治血管性認(rèn)知障礙提供依據(jù)。

1 Taylor WD, Aizenstein HJ, Alexopoulos GS. The vascular depression hypothesis:mechanisms linking vascular disease with depression[J].Mol Psychiatry, 2013, 18:963-974.

2 Bi X, Yan B, Fang S, et al. Quetiapine regulates neurogenesis in ischemic mice by inhibiting NF-kappaB p65/p50 expression[J].Neurol Res, 2009, 31:159-166.

3 Miller AH. Norman Cousins Lecture.Mechanisms of cytokine-induced behavioral changes:psychoneuroimmunology at the translational interface[J]. Brain Behav Immun,2009, 23:149-158.

4 Yan B, He J, Xu H, et al. Quetiapine attenuates the depressive and anxiolyticlike behavioural changes induced by global cerebral ischemia in mice[J]. Behav Brain Res,2007, 182:36-41.

5 Bi X, Zhang Y, Yan B, et al. Quetiapine prevents oligodendrocyte and myelin loss and promotes maturation of oligodendrocyte progenitors in the hippocampus of global cerebral ischemia mice[J]. J Neurochem, 2012,123:14-20.

6 Steru L, Chermat R, Thierry B, et al.The tail suspension test:a new method for screening antidepressants in mice[J].Psychopharmacology (Berl), 1985, 85:367-370.

7 王維剛, 劉震澤, 吳文婷, 等. 小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法系列專(zhuān)題(七) 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)在小鼠行為分析中的應(yīng)用[J]. 中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào), 2011, 33:1191-1196.

8 宋沖, 楚亞楠, 賀桂瓊, 等. 梓醇對(duì)淀粉樣蛋白前體/早老素1雙轉(zhuǎn)基因小鼠老年斑和學(xué)習(xí)記憶的影響[J]. 中華神經(jīng)科雜志, 2013, 46:265-268.

9 Alexopoulos GS, Morimoto SS. The inflammation hypothesis in geriatric depression[J]. Int J Geriatr Psychiatry, 2011, 26:1109-1118.

10 Hannestad J, Dellagioia N, Bloch M. The effect of antidepressant medication treatment on serum levels of inflammatory cytokines:a meta-analysis[J]. Neuropsychopharmacology,2011, 36:2452-2459.

11 Muller N, Schwarz MJ, Dehning S, et al. The cyclooxygenase-2 inhibitor celecoxib has therapeutic effects in major depression:results of a double-blind,randomized, placebo controlled, add-on pilot study to reboxetine[J]. Mol Psychiatry, 2006,11:680-684.

12 Tyring S, Gottlieb A, Papp K, et al.

Etanercept and clinical outcomes, fatigue,and depression in psoriasis:double-blind placebo-controlled randomised phase III trial[J]. Lancet, 2006, 367:29-35.

13 Chen M, Ona VO, Li M, et al. Minocycline inhibits caspase-1 and caspase-3 expression and delays mortality in a transgenic mouse model of Huntington disease[J]. Nat Med, 2000,6:797-801.

14 Sneed J R, Rindskopf D, Steffens DC, et al.The vascular depression subtype:evidence of internal validity[J]. Biol Psychiatry, 2008,64:491-497.

15 Makhija K, Karunakaran S. The role of infla m m ator y cytokines on the aetiopathogenesis of depression[J]. Aust N Z J Psychiatry, 2013, 47:828-839.

16 Sublette ME, Postolache TT. Neuroinflammation and depression:the role of indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) as a molecular pathway[J].Psychosom Med, 2012, 74:668-672.

17 Zhu CB, Blakely RD, Hewlett WA. The proinflammatory cytokines interleukin-1beta and

【點(diǎn)睛】

本研究通過(guò)minocyclin抑制血管性抑郁小鼠腦內(nèi)非特異性炎癥反應(yīng)顯著改善其抑郁行為，為臨床上探索此類(lèi)抑郁的治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。