李 娟 ，張學(xué)順 ，傅春升

（1．山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250355； 2．山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250011）

近年來(lái)，抗菌藥物被濫用并日益威脅著人類生命安全，尤其是醫(yī)生無(wú)指征用藥、用藥時(shí)間長(zhǎng)、選擇藥物不合理等，造成細(xì)菌耐藥、多藥耐藥菌、超級(jí)細(xì)菌等現(xiàn)象。中藥具有不易產(chǎn)生耐藥性、不良反應(yīng)低、與抗生素聯(lián)用可逆轉(zhuǎn)抗生素的耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，因此從抗細(xì)菌、真菌、支原體、衣原體等方面尋求中藥天然抗生素已成為解決細(xì)菌耐藥的新途徑。筆者就近年來(lái)對(duì)中藥抗菌有效化學(xué)物質(zhì)、抗菌機(jī)制和中藥逆轉(zhuǎn)耐藥性等的研究成果進(jìn)行分類綜述。

1 中藥抗菌制劑

1．1 單味中藥及中藥單體

中藥單味藥、中藥單體在臨床上的應(yīng)用已越來(lái)越廣泛。近幾年發(fā)現(xiàn)了一些具有抗菌作用的單味中藥和中藥單體，如解表藥麻黃、桂枝、菊花，清熱藥金銀花、連翹、青蒿等。江震獻(xiàn)等[1]首次對(duì)蝎子草的抗菌活性化合物進(jìn)行了研究，從蝎子草醋酸乙酯提取物中分離得到了兩個(gè)化合物β－谷甾醇和對(duì)羥基肉桂酸乙酯，發(fā)現(xiàn)其對(duì)金黃色葡萄球菌均有良好的抑制作用。楊小明等[2]用二倍稀釋法測(cè)定了從銀杏外種皮中得到的銀杏酸混合物及C13B0，C15B1，C17B1這3種單體抗菌活性，結(jié)果銀杏酸混合物對(duì)痤瘡丙酸桿菌等革蘭陽(yáng)性菌具有良好的抑制作用，其中以C13B1效果最好。韋建華等[3]以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、綠膿桿菌對(duì)草龍?zhí)崛∥锛皢误w化合物沒(méi)食子酸進(jìn)行抗菌活性研究，結(jié)果沒(méi)食子酸單體對(duì)以上4種細(xì)菌均有良好的抑制作用。

1．2 中藥復(fù)方

中藥多為復(fù)方用藥，中藥復(fù)方的水提物、醇提物等在抗感染方面的研究也有很大的成效。中藥復(fù)方具有多向性、多層面、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)，使細(xì)菌難以同時(shí)產(chǎn)生對(duì)抗多種抗菌成分的多重突變。王新等[4]采用二倍稀釋法測(cè)定黃芩、秦皮、白頭翁、苦參不同組方對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門菌的體外抑菌效果，得出4種中藥體外抗菌最佳配伍比例為1∶4∶1∶2。馬朝等[5]研究了雙黃連片的體內(nèi)抑菌作用，結(jié)果表明雙黃連片對(duì)細(xì)菌感染小鼠有明顯的保護(hù)作用。游思湘等[6]對(duì)大白兔肌肉注射復(fù)方黃連注射劑，測(cè)定不同時(shí)間含藥血清對(duì)耐藥性金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑，結(jié)果表明復(fù)方黃連注射劑含藥血清對(duì)耐藥性金黃色葡萄球菌具有明顯的抑制作用。

2 中藥抗菌有效成分

許多中草藥的活性成分已經(jīng)得到確定，中藥抗菌藥有效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究也越來(lái)越深入。研究表明中藥抗菌的有效成分主要有黃酮類、皂苷類、揮發(fā)油類、生物堿類、糖類等，有些中藥已得到抗菌單體并確定了其化學(xué)結(jié)構(gòu)。

黃酮類：金蓮花具有清熱解毒、抗菌消炎的功效，臨床上常用于治療扁桃體炎和中耳炎。李占林等[7]對(duì)金蓮花水提物中具有抗菌活性的成分進(jìn)行了研究，得到7個(gè)化合物，分別鑒定為藜蘆酸、苯甲酸、R－10，16－二羥基十六烷酸、芹菜素、木犀草素、鼠尾草素和槲皮素。張廣文等[8]對(duì)廣藿香中分離得到的黃酮類化合物進(jìn)行體外抗真菌活性研究，結(jié)果受測(cè)的4個(gè)化合物均具有抗真菌活性。

香豆素類：香豆素類化合物具有抗真菌、細(xì)菌的藥理活性，是具有較大抗菌應(yīng)用價(jià)值的一類化合物。蔡正軍等[9]對(duì)白根獨(dú)活抗菌有效部位氯仿萃取部位的的化學(xué)成分進(jìn)行分離純化，經(jīng)鑒定得到異歐前胡素、異氧化前胡素、水合氧化前胡內(nèi)酯、佛手柑內(nèi)酯、栓翅芹烯醇，均為線性呋喃香豆素。孫藝方等[10]從紫花地丁的甲醇提取物中分離鑒定出4個(gè)具有抗菌活性的香豆素類化合物，七葉內(nèi)酯，6，7－二甲氧基香豆素，東莨菪內(nèi)酯和5－甲氧基－7－羥甲基香豆素，發(fā)現(xiàn)其對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等均有抑菌和殺菌活性。

揮發(fā)油類：含揮發(fā)油的中草藥或提取出的揮發(fā)油大多具有抑菌作用，如中藥枳實(shí)、艾葉、蒼術(shù)、花椒、姜黃的揮發(fā)油提取物都具有不同程度的抑菌作用。劉俊等[11]通過(guò)GC－MS從白木香種子揮發(fā)油中檢出23個(gè)成分，測(cè)定種子揮發(fā)油樣品溶液的抗菌活性，結(jié)果表明種子揮發(fā)油對(duì)抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌具有抑制作用。趙夏博等[12]用水蒸氣蒸餾法提取降香揮發(fā)油，以硫酸卡那霉素為陽(yáng)性對(duì)照測(cè)定揮發(fā)油的抗菌活性，結(jié)果表明其對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和金黃色葡萄球菌均有抑制作用。

多糖類：研究發(fā)現(xiàn)，升麻、蜂花粉、土茯苓等的多糖成分也具有一定的抗菌作用。王紀(jì)祥等[13]對(duì)升麻化學(xué)成分的抗菌活性進(jìn)行了研究，鑒定出的3種化合物25－O－乙酰升麻醇、興安升麻苷C、12β－羥基升麻醇具有良好的抗菌活性，其中興安升麻苷C的抗菌活性最好。楊曉杰等[14]對(duì)亞洲蒲公英花序內(nèi)多糖的抗菌活性進(jìn)行了研究，表明其多糖成分有一定的抗細(xì)菌和真菌作用。

生物堿類：苦參中的有效成分主要為苦參堿和氧化苦參堿。桂蜀華等[15]對(duì)苦參堿進(jìn)行了抗皮膚癬菌的活性研究，表明苦參堿對(duì)皮膚真菌菌株有良好的抑制作用，具有較強(qiáng)的抗真菌活性。楊勇等[16]對(duì)黃連中4種生物堿小檗堿、黃連堿、藥根堿的抑菌活性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明4種生物堿均具有抗菌活性，其中小檗堿的抑菌活性最大。

3 中藥抗菌作用機(jī)制

中藥由于其成分的復(fù)雜性和作用的多樣性，對(duì)其抗菌機(jī)制的研究目前還比較淺顯，研究手段也比較局限。中藥既可以直接抑殺細(xì)菌，又可以通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體免疫力而發(fā)揮抑菌作用。近幾年的研究表明，中藥抗菌作用機(jī)制主要有干擾細(xì)胞壁合成、損傷胞漿膜、影響細(xì)胞蛋白合成、影響核酸合成、干擾遺傳密碼復(fù)制等。

影響細(xì)胞蛋白質(zhì)合成：江惠[17]從竹葉中提取純化天然活性抗菌肽，通過(guò) N－苯甲酰－DL－精氨酸 －對(duì)硝基苯胺鹽酸鹽法（BAPNA法）測(cè)定竹葉天然抗菌肽對(duì)胰蛋白酶的抑制活性，結(jié)果表明，竹葉有良好的抑菌作用。張明[18]對(duì)金果欖有效成分的抗菌機(jī)理進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其有效成分巴馬亭／藥根堿可致細(xì)菌菌絲畸形、內(nèi)容物外泄，植物病原真菌菌絲體的可溶性蛋白含量降低。

損傷胞漿膜：萬(wàn)力等[19]將山蒼子油作用于申克孢子絲菌，電鏡觀察顯示山蒼子油作用24 h后申克孢子絲菌胞膜及胞壁結(jié)構(gòu)模糊，胞漿皺縮，細(xì)胞器及細(xì)胞核結(jié)構(gòu)模糊，結(jié)果提示山蒼子油可破壞菌胞膜，從而破壞胞膜選擇通透性，使細(xì)胞內(nèi)滲透壓降低，干擾其正常代謝，促進(jìn)了細(xì)胞的死亡。

干擾核酸合成：煙曲霉是一種重要的致病菌，進(jìn)入人體后能引起多重變應(yīng)性和侵入性疾病。王剛生等[20]將桂皮油藿香油的復(fù)合物作用于煙曲霉菌，電鏡觀察顯示藥物穿透細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，干擾甘露聚糖幾丁質(zhì)－葡聚糖的合成，破碎的細(xì)胞壁刺入細(xì)胞內(nèi)，干擾核酸和蛋白質(zhì)的合成，使細(xì)胞器、細(xì)胞核受到損傷，內(nèi)容物流失，直至細(xì)胞崩裂死亡。

干擾細(xì)胞壁合成：張慧蕓等[21]將丁香提取物作用于大腸桿菌和單增李斯特菌，掃描細(xì)胞膜受到嚴(yán)重的損壞，表明作用機(jī)理為膜密度降低，內(nèi)容物減少，干擾蛋白質(zhì)和細(xì)胞壁的合成。姜濤等[22]將含有沒(méi)食子酸酯的綠茶粗提物作用于恥垢分枝桿菌，作用后細(xì)胞壁呈現(xiàn)膨出、變形等形態(tài)學(xué)變化，細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)疏密不均現(xiàn)象，推測(cè)主要成分與恥垢分枝桿菌細(xì)胞質(zhì)膜蛋白特異性結(jié)合后影響了細(xì)胞壁肽聚糖的代謝，從而產(chǎn)生抑菌作用。

4 中藥逆轉(zhuǎn)細(xì)菌耐藥性的研究

隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌對(duì)抗生素藥物產(chǎn)生耐藥性的問(wèn)題越來(lái)越嚴(yán)峻，中藥具有不易產(chǎn)生耐藥性的優(yōu)點(diǎn)，研究和開發(fā)抗菌中藥對(duì)解決細(xì)菌耐藥性具有重要意義。中藥逆轉(zhuǎn)耐藥性的機(jī)制，主要有消除耐藥質(zhì)粒、抑制β－內(nèi)酰胺酶、基因突變、抑制耐藥菌外排泵、抑制細(xì)菌生物被膜形成等[23]。

消除耐藥質(zhì)粒：王小平等[24]通過(guò)研究松蘿酸對(duì)金黃色葡萄球菌耐藥質(zhì)粒體外消除發(fā)現(xiàn)，松蘿酸對(duì)該耐藥菌株質(zhì)粒有消除作用。汪東海等[25]將黃芩苷作用于對(duì)慶大霉素和環(huán)丙沙星雙重耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌，部分耐藥株的最低抑菌濃度（MIC）值下降至敏感水平，表明黃芩苷能夠消除鮑曼不動(dòng)桿菌低水平耐藥株攜帶的質(zhì)粒，恢復(fù)菌株對(duì)慶大霉素和環(huán)丙沙星的敏感性。

基因突變：王禹等[26]用五倍子、防風(fēng)、丹皮等中藥含藥血清對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）進(jìn)行耐藥性逆轉(zhuǎn)試驗(yàn)，觀察試驗(yàn)前后受試菌抑菌環(huán)直徑的變化，藥物組均能不同程度擴(kuò)大頭孢唑林鈉、頭孢呋辛等藥物的抑菌環(huán)直徑，推測(cè)它們可能通過(guò)MRSA的mecA基因或其調(diào)控因素影響基因的表達(dá)，或使PBP2a產(chǎn)生減少或消除從而達(dá)到耐藥逆轉(zhuǎn)的作用。

抑制β－內(nèi)酰胺酶：何明等[27]對(duì)清熱解毒中藥雙黃連、清開靈作用的β－內(nèi)酰胺酶（ESBLs）大腸埃希菌活性進(jìn)行測(cè)定，作用后細(xì)菌β－內(nèi)酰胺酶活性較未處理的肉湯菌酶活性均有明顯的降低，表明雙黃連、清開靈具有抑制β－內(nèi)酰胺酶活性的作用。蘆亞君等[28]用三黃湯、黃連解毒湯和五味消毒飲探討對(duì)超廣譜β－內(nèi)酰胺酶活性及表達(dá)的抑制作用，表明三黃湯、黃連解毒湯和五味消毒飲抑制超廣譜β－內(nèi)酰胺酶的活性和表達(dá)是其降低細(xì)菌耐藥性的機(jī)制之一。

抑制耐藥菌外排泵：黃瑞玉等[29]研究連翹對(duì)多藥耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌主動(dòng)外排泵編碼基因adeB的影響，通過(guò)分析作用前后MIC變化較大的代表菌株的基因片段，表明較低濃度時(shí)可通過(guò)抑制鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)環(huán)丙沙星的主動(dòng)外排作用，并可引起主動(dòng)外排泵編碼基因adeB序列發(fā)生變異從而降低環(huán)丙沙星的MIC。韓燕等[30]復(fù)方清熱顆粒對(duì)耐環(huán)丙沙星銅綠假單胞菌外排泵影響的作用機(jī)制，表明復(fù)方清熱顆粒含藥血清可抑制銅綠假單胞菌的外排泵。

抑制細(xì)菌生物被膜形成：郭向華等[31]探討苦參堿對(duì)慢性銅綠假單胞菌（PA）生物膜肺部感染大鼠的免疫保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)苦參堿能夠誘導(dǎo)肺Th1型免疫反應(yīng)，加快PA生物膜肺炎大鼠肺部的細(xì)菌清除及減輕肺部病理?yè)p傷，對(duì)PA生物膜肺感染大鼠具有免疫保護(hù)作用。黃曉敏等[32]研究發(fā)現(xiàn)，五倍子醇提液能明顯減少不同MIC濃度對(duì)假單胞銅綠桿菌生物膜的數(shù)量，增加至2倍的MIC時(shí)24 h內(nèi)生物膜活菌數(shù)被完全清除。表明五倍子醇提液對(duì)銅綠假單胞菌生物膜細(xì)菌有清除效應(yīng)和完全清除效應(yīng)。

5 中藥與抗菌藥物聯(lián)用

某些中藥不僅自身具有抗菌作用，中藥與抗生素聯(lián)用也可增強(qiáng)藥物的抗菌性。隨著抗生素藥物耐藥性的不斷增強(qiáng)，開發(fā)研究抗菌中藥已成為研究的又一熱點(diǎn)。江滟等[33]將川參通注射液與頭孢曲松聯(lián)用，檢測(cè)其對(duì)糞鏈球菌、淋病奈瑟菌、大腸埃希菌及普通變形桿菌的MIC和最低殺菌濃度（MBC），結(jié)果表明川參通注射液與頭孢曲松配伍對(duì)淋病奈瑟菌、大腸埃希菌的MIC和MBC顯著低于單一藥物。陳醒民等[34]將穿琥寧、喜炎平分別與頭孢噻肟、左氧氟沙星、阿米卡星抗菌藥物聯(lián)用，作用于敏感的肺炎克雷伯菌，測(cè)定作用4 h后釋放內(nèi)毒素的量，結(jié)果表明聯(lián)用比單用抑制細(xì)菌釋放內(nèi)毒素的效果好，且穿琥寧比喜炎平配伍更能抑菌，濃度越高，抑菌效果越好。丘春東等[35]探討中藥灌腸聯(lián)合西藥抗菌治療慢性盆腔炎，對(duì)照組采用西藥頭孢菌素＋甲硝唑聯(lián)合靜脈滴注，觀察組在對(duì)照組用藥的基礎(chǔ)上加用中藥灌腸治療，結(jié)果治療組明顯優(yōu)于對(duì)照組，表明中藥與抗生素聯(lián)用，抗菌效果更加顯著。

6 結(jié)語(yǔ)

中藥成分復(fù)雜，但有效成分和抗菌機(jī)制的研究不夠深入，研究手段也比較局限，有必要定向分離研究不同組分的藥效和機(jī)制；中藥與抗菌藥物配伍的穩(wěn)定性之間存在一些問(wèn)題，如清開靈注射液與青霉素配伍可使有效成分含量降低，復(fù)方丹參注射液與卡那霉素、慶大霉素、小諾霉素、西梭霉素配伍產(chǎn)生沉淀等培育[36]。中藥也存在作用不突出、抑菌殺菌效率低下、抗菌專屬性差、醫(yī)師信賴度低等缺點(diǎn)，所以開發(fā)研究與抗生素聯(lián)用的高效抗菌中藥具有極大意義。中藥抗菌的研究多為體外進(jìn)行，藥物體內(nèi)作用的安全性和有效性有待進(jìn)一步考察，還可開發(fā)更多的抗菌中藥新劑型，使藥物達(dá)到靶向抗菌作用，中藥抗菌藥物的研究還處于一個(gè)起始階段，要獲得合理有效的中藥抗菌藥物仍需要一個(gè)較長(zhǎng)的探索過(guò)程。

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