張明忠 秦 麗 趙 敏
湖北恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院,湖北恩施 445000
隨著社會的發(fā)展進(jìn)步,男性生育障礙越來越受到重視[1]。 而精液檢驗(yàn)已成為診斷男性不育癥及評估男性不育癥治療效果的重要檢查手段。目前臨床用于精液檢驗(yàn)的主要有傳統(tǒng)手工分析方法、計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)及SQA-V 精子質(zhì)量分析系統(tǒng)三種, 但是傳統(tǒng)手工分析方法常受檢驗(yàn)者操作水平的影響,常導(dǎo)致檢測結(jié)果差異較大,重復(fù)性差,缺少客觀性,無法滿足臨床需要[2]。 而計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)及SQA-V 精子質(zhì)量分析系統(tǒng)有著操作方便、 檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確的特點(diǎn),目前臨床應(yīng)用較廣。 本研究通過應(yīng)用計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)及SQA-V 精子質(zhì)量分析系統(tǒng)對湖北恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院(以下簡稱“我院”)收集的土家族男性精液進(jìn)行分析,以對比兩種檢驗(yàn)系統(tǒng)的準(zhǔn)確性及相關(guān)性。
收集2009 年5 月~2013 年4 月于我院就診行精液檢查的土家族男性3000 例,年齡25~41 歲,平均(33.41±11.36)歲。 正常組2236 例,不育癥組764 例。 不育癥診斷標(biāo)準(zhǔn)為:婚后性生活正常,未采取任何避孕措施1 年以上配偶未懷孕者,且配偶生育能力正常者[3]。
精液采集前受檢者禁止性生活3~5 d, 在此期間應(yīng)避免自慰或夢遺等情況, 保持正常飲食及作息,勞逸結(jié)合不可勞累過度,另外應(yīng)戒除煙酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。 精液采集前排凈尿液,應(yīng)用手淫法采集精液,將一次性射精精液用清潔玻璃小瓶收集(禁用避孕套),標(biāo)本保持于30~40℃之間,并于采集1 h 內(nèi)送檢。
正常精液判斷標(biāo)準(zhǔn)[4-5]:①精液量2~5 mL;②精子密度≥20×106/mL; ③精子活力具有前向運(yùn)動的精子(a 級+b 級) 百分比>50%或a 級精子百分比>25%;④pH 值7.2~8.0;⑤精子活率a 級(%)+b 級(%)+c 級(%)≥60%;⑥液化時間<60 min;⑦正常形態(tài)精子>70%或精子畸形率<30%。 當(dāng)精液檢測結(jié)果均符合上述標(biāo)準(zhǔn)時判斷為正常,否則為異常精液。
1.4.1 SQA-V 精子質(zhì)量分析 于精液充分液化30 min后進(jìn)行檢測, 應(yīng)用檢測儀器選用以色列MES 公司的SQA-V 精子質(zhì)量分析儀,操作方法嚴(yán)格按照《SQA-V型精子質(zhì)量分析儀用戶手冊》進(jìn)行操作[6]:將液化后的精液充分混勻, 使用SQA-V GOLD 專用一次性采樣管吸取0.5 mL 標(biāo)本加入自動檢測孔進(jìn)行分析。1.4.2 計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng) 用SQA-V 精子質(zhì)量分析的同時,同時將標(biāo)本于計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)中進(jìn)行檢測,儀器選用WLY29000 型數(shù)碼彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)進(jìn)行檢測,操作嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行檢測[7]:一次性吸管吸取10 μL 混合均勻精液樣本至macro 計(jì)數(shù)板,蓋上蓋板后計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)視野≥5個。
1.5.1 DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析 對正常組和不育癥組兩組患者分別應(yīng)用SQA-V 精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)所得的DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)[精子密度(SD)、精子活率(SM)、前向運(yùn)動精子率(PR)、前向運(yùn)動精子數(shù)(PRC)、有效精子密度(FSC)和精子活力指數(shù)(SMI)]進(jìn)行對比分析。
1.5.2 相關(guān)性分析 對所有患者應(yīng)用SQA-V 精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)所得的DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。
統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件應(yīng)用SPSS 19.0 軟件, 所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)形式表示,并應(yīng)用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn); 相關(guān)性分析使用Bivariate 模型,r ≥0.70 為高度相關(guān),0.40≤r <0.70 為中度相關(guān)性,r <0.40 為低度相關(guān)性,以P <0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
正常組及不育癥組SD、SM、PR、PRC、FSC 及SMI等DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05)。 見表1、2。
經(jīng)相關(guān)性分析顯示,應(yīng)用SQA-V 精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)檢測所得DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)間均存在顯著的正向直線相關(guān)關(guān)系(P = 0.000)。見表3。
表1 正常組DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析(±s)
表1 正常組DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析(±s)
注:SD:精子密度;SM:精子活率;PR:前向運(yùn)動精子率;PRC:前向運(yùn)動精子數(shù);FSC:有效精子密度;SMI:精子活力指數(shù)
?
表2 不育癥組DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析(±s)
表2 不育癥組DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析(±s)
注:SD:精子密度;SM:精子活率;PR:前向運(yùn)動精子率;PRC:前向運(yùn)動精子數(shù);FSC:有效精子密度;SMI:精子活力指數(shù)
項(xiàng)目 SD(×106/mL) SM(%) PR(%) PRC(×106/mL) FSC(×106/mL) SMI SQA-V 精子質(zhì)量分析計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)t 值P 值35.35±1.81 35.27±1.91 0.250 0.803 41.24±5.48 41.30±1.99 0.083 0.934 37.92±1.92 38.23±1.96 0.984 0.327 15.15±1.13 15.33±1.21 0.950 0.344 4.43±0.86 4.69±0.83 1.893 0.060 41.66±4.37 42.70±4.36 1.455 0.148
表3 相關(guān)性分析(±s)
表3 相關(guān)性分析(±s)
注:SD:精子密度;SM:精子活率;PR:前向運(yùn)動精子率;PRC:前向運(yùn)動精子數(shù);FSC:有效精子密度;SMI:精子活力指數(shù)
項(xiàng)目 SD(×106/mL) SM(%) PR(%) PRC(×106/mL) FSC(×106/mL) SMI SQA-V 精子質(zhì)量分析計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)r 值P 值58.68±23.50 58.99±24.05 0.984 0.000 54.12±13.64 54.11±13.09 0.930 0.000 49.23±11.54 49.57±11.54 0.971 0.000 32.48±17.43 32.66±17.44 0.995 0.000 6.28±1.97 6.45±1.88 0.902 0.000 82.82±41.46 83.46±41.07 0.990 0.000
精液檢查的準(zhǔn)確性是臨床診斷及治療的基礎(chǔ),因此其在臨床工作中意義重大。 計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)相對于傳統(tǒng)的手工分析方法在檢查中增加了嚴(yán)格的量化指標(biāo), 顯著降低了手工檢測的主觀性[8],其是在顯微鏡檢查的基礎(chǔ)上, 利用計(jì)算機(jī)輔助圖形分析技術(shù)對各項(xiàng)精液指標(biāo)進(jìn)行檢測[9],大大提高了檢測的準(zhǔn)確性, 但是也存在著對精子形態(tài)和活力的辨別能力較低的缺點(diǎn)[10]。 而SQA-V 精子質(zhì)量分析是運(yùn)用精子運(yùn)動所引起的光密度來進(jìn)行測定, 同樣有著較好的準(zhǔn)確性, 且可彌補(bǔ)計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)對精子形態(tài)和活力的辨別能力較低的缺點(diǎn)[11-13]。 本研究通過應(yīng)用計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)及SQA-V 精子質(zhì)量分析兩種檢測方法對土家族無不育癥男性及不育癥男性精子進(jìn)行檢測, 以比較兩種檢測方法的準(zhǔn)確性, 結(jié)果顯示: 正常組及不育癥組應(yīng)用SQA-V精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)檢測所得的DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)比較均未見顯著差異。 同時,應(yīng)用SQA-V 精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)檢測所得DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)間均存在顯著的正向直線相關(guān)關(guān)系, 可見兩種檢測方法均可應(yīng)用于土家族男子的精液檢測。
本研究在比較兩種檢測方法中選取了DMPPFI六項(xiàng)參數(shù)作為檢測指標(biāo),DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)主要包括SD、SM、PR、PRC、FSC 和SMI 六項(xiàng)。 其中SD 是精子數(shù)量的客觀體現(xiàn),雖然足夠的精子數(shù)量對于受孕有著重要的作用,但是單純應(yīng)用精子密度尚不能作為評估男性的生育能力唯一指標(biāo)。 SM 將精子分前向運(yùn)動和非前向運(yùn)動的不動精子兩大類, 其中因非前向運(yùn)動的不動精子,可導(dǎo)致無法受孕,而前向運(yùn)動的精子為受孕的有效精子, 故本指標(biāo)同樣也是評價男性生育能力的重要指標(biāo)。PR 和PRC 均是評價前向運(yùn)動精子的主要指標(biāo), 也是評價男性生育功能的主要指標(biāo)之一,當(dāng)前向運(yùn)動精子數(shù)量及功能正常時,精子可有效地穿過女性宮頸、子宮等部位,完成受孕,因此也是評價男性不育癥的一個最好的指標(biāo)之一。 而FSC 及SMI 均是綜合SD、SM、PR、PRC 四項(xiàng)指標(biāo)而得出的評價男性生育能力的重要指標(biāo),F(xiàn)SC 及SMI 降低,則可表示存在生育功能障礙。 臨床研究顯示受精的失敗與精液質(zhì)量或精子功能低下有關(guān)[14-15],綜合以上六項(xiàng)檢測指標(biāo),可有效體現(xiàn)男性的生育能力。 因此本研究選取DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)作為檢測指標(biāo)。雖然本研究所得出的結(jié)果未對比出SQA-V 精子質(zhì)量分析與計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)在DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析中的差異, 但是已有研究顯示相對于計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng),SQA-V 精子質(zhì)量分析在進(jìn)行精液檢測中有著高精密度和高效率的特點(diǎn), 且其所能檢驗(yàn)出的精子參數(shù)較計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)更豐富, 除本研究所觀察的DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)外,其還可對精子質(zhì)量進(jìn)行更全面的檢測, 對臨床診斷及評估治療效果意義更為重大。
綜上所述,在臨床工作中,對于土家族男性精子的檢測中,SQA-V 精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)比較未見明顯差異,同時兩種檢測方式存在直線相關(guān)性,臨床工作中均可應(yīng)用。
[1] 余文輝.無精子癥男性激素水平變化及睪丸病理分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(3):264-265.
[2] Komiya A,Watanabe A,Kawauchi Y,et al. Analysis of inter-examination differences in sperm nuclear vacuoles among male patients with infertility[J].Syst Biol Reprod Med,2014,60(1):35-42.
[3] 世界衛(wèi)生組織.世界衛(wèi)生組織人類精液及精子-宮頸黏液相互作用實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)手冊[M].4 版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2001:4-20.
[4] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:319.
[5] Degl'Innocenti S,F(xiàn)ilimberti E,Magini A,et al. Semen cryopreservation for men banking for oligospermia,cancers,and other pathologies:prediction of post-thaw outcome using basal semen quality [J]. Fertil Steril,2013,100(6):1555-1563.
[6] 戈一峰,汪春暉,邵永,等.兩種精子分析系統(tǒng)的比較研究[J].中華男科學(xué)雜志,2008,14(10):923-926.
[7] 安茂偉,韓秀娟,王世禮,等.計(jì)算機(jī)輔助精子質(zhì)量分析與常規(guī)精液分析的對比性研究[J].現(xiàn)代診斷與治療,2008,19(1):7-9.
[8] Kathiravan P,Kalatharan J,Karthikeya G,et al.Objectivesperm motion analysis to assess dairy bull fertility using computer-aided system-a review [J]. Reprod Domest Anim,2011,46(1):165-172.
[9] 郭海彬,殷寶莉,張翠蓮,等.精子質(zhì)量與短時間受精后受精結(jié)局關(guān)系的研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,35(2):150-155.
[10] 黃開權(quán),張淑芳,沈熔.ZKPACS 多功能顯微圖像分析系統(tǒng)在精液分析中應(yīng)用與評價[J].安徽醫(yī)學(xué),2010,31(3):270-272.
[11] Ge YF,Wang CH,Shao Y,et al. Comparison of the parameters obtained by sperm quality analyzer V and computer-aided spermanalysis system [J]. Zhonghua Nan Ke Xue,2008,14(10):923-926.
[12] Maree L,van der Horst G. Quantification and identification of sperm subpopulations using computer-aided sperm analysis and species-specific cut-off values for swimming speed [J]. Biotech Histochem,2013,88(3-4):181-193.
[13] 劉安娜,張玲,王厚照.SQA-V 全自動精子質(zhì)量分析儀與計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)結(jié)果比較[J].職業(yè)與健康,2009,25(20):2161-2162.
[14] 阮杰,黃華振,劉新光.蛋白激酶CK2 活性與人精子質(zhì)量相關(guān)性的初步探討[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,28(4):289-291.
[15] Hoogewijs M,De Vliegher S,De Schauwer C,et al.Validation and usefulness of the Sperm Quality Analyzer V equine for equine semen analysis[J].Theriogenology,2011,75(1):189-194.