楊敬輝，潘 娟，劉占民

（河北農(nóng)業(yè)大學(xué)海洋學(xué)院，河北 秦皇島066003）

脂肪營(yíng)養(yǎng)作為節(jié)約蛋白質(zhì)、促進(jìn)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)的重要途徑越來(lái)越多地被飼料加工企業(yè)所采用，結(jié)果是高能量、高脂肪飼料的應(yīng)用導(dǎo)致魚(yú)類(lèi)脂肪肝現(xiàn)象越來(lái)越嚴(yán)重，魚(yú)類(lèi)重度脂肪肝會(huì)導(dǎo)致生長(zhǎng)緩慢、餌料系數(shù)上升，免疫力下降、發(fā)疾率上升，經(jīng)濟(jì)損失慘重，嚴(yán)重制約了漁業(yè)生產(chǎn)。通過(guò)在飼料中添加中藥制劑肝膽利康散，觀察對(duì)草魚(yú)脂肪肝的防治作用，并與L－肉毒堿和膽汁酸2種不同作用機(jī)理的添加劑進(jìn)行比較，為魚(yú)類(lèi)脂肪肝的防治尋求選藥依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物 肝膽利康散，組方：茵陳30、大黃30、郁金25、連翹15、柴胡15、梔子15、白芍15、牡丹皮15、藿香15、葡萄糖125，河北省農(nóng)林科學(xué)院第一獸藥廠生產(chǎn)，批號(hào)（2005）030289200，市購(gòu)；L－肉毒堿（含量98%），湖北華陽(yáng)生化有限公司生產(chǎn)，CAS#541－15－1批號(hào)20100812，市購(gòu)；膽汁酸（25%），山東龍昌生化公司生產(chǎn)，批號(hào)20100525，市購(gòu)。

1.2 基礎(chǔ)飼料（餌料） 由天津?qū)氎骘暳蠌S提供的草魚(yú)魚(yú)種專(zhuān)用飼料的未經(jīng)制粒粉料，飼料組成（見(jiàn)表1）。

表1 基礎(chǔ)日糧的組成及營(yíng)養(yǎng)成分

1.3 試驗(yàn)用添加藥物餌料 按照試驗(yàn)?zāi)康?，制成添加中藥肝膽利康散（A組）、L－肉毒堿（B組）、膽汁酸（C組）的3組添加藥物料和未添加藥物基礎(chǔ)料作空白對(duì)照（D組）（見(jiàn)表2）。加入藥物的基礎(chǔ)料和空白基礎(chǔ)料攪拌均勻，用小型平模制粒機(jī)制成1.5mm的顆粒餌料。

1.4 給藥方法與時(shí)間 每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，投喂3次/d，8：30、13：30、17：00各投1次，投餌率為魚(yú)體重的3%，投餌30min后紀(jì)錄采食情況，盡量使其飽食。試驗(yàn)時(shí)間21d。

1.5 試驗(yàn)草魚(yú)與分組 疑似患脂肪肝的庫(kù)養(yǎng)一齡草魚(yú)魚(yú)種，平均體重42g?；铘~(yú)觀察腹部略膨大，體色較淺，解剖后腸系膜脂肪大量蓄積，肝臟脂肪浸潤(rùn)、顏色黃白，有油膩感，膽囊顏色茶褐色，呈典型脂肪肝病變，初步確診為脂肪肝魚(yú)。選用外觀癥狀明顯的初步確診病魚(yú)120尾，分為A、B、C、D 4組，每組30尾（見(jiàn)表3），分別飼養(yǎng)在120cm×45cm×60 cm的試驗(yàn)用水族箱中；自來(lái)水經(jīng)過(guò)曝氣和自然晾曬24h后使用，試驗(yàn)期水溫控制在24℃～26℃，每天吸污，添加新水10～15cm。試驗(yàn)魚(yú)在水族箱內(nèi)馴養(yǎng)5d，開(kāi)始正式試驗(yàn)。

表2 各試驗(yàn)組藥物添加種類(lèi)及添加量

表3 試驗(yàn)動(dòng)物分組

1.6 采樣與處理 試驗(yàn)期間，每7d為1療程，連續(xù)用藥3個(gè)療程，每個(gè)療程結(jié)束后，分別從各試驗(yàn)組隨機(jī)抽取3尾魚(yú)，3個(gè)重復(fù)共9條魚(yú)，解剖后剝離肝胰臟，稱(chēng)重，－20℃冰箱保存。

1.7 樣品的測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束后集中進(jìn)行測(cè)定，測(cè)量指標(biāo)包括魚(yú)種肝胰體比（肝胰臟和身體總重的比值）、體脂含量和肝脂含量，粗脂肪采用GB6432－86索氏抽提法測(cè)量。

2 試驗(yàn)結(jié)果及分析

2.1 試驗(yàn)結(jié)果 見(jiàn)表4。

表4 肝膽利康散、L－肉毒堿、膽汁酸對(duì)草魚(yú)肝胰體重比、體脂含量、肝脂含量的影響

2.2 試驗(yàn)結(jié)果分析

2.2.1 各用藥組組內(nèi)不同用藥時(shí)間的結(jié)果與比較A、B、C各組在7、14、21d進(jìn)行肝胰體比、體脂含量和肝脂含量3項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定，經(jīng)比較，結(jié)果差異極顯著（P＜0.01）（見(jiàn)表3）。

A組肝胰體比（肝胰臟重和體重比值）14d較7 d降低3.15%，21d較14d下降12.7%；體脂含量14d較7d降低2.1%，21d較14d下降12.7；肝脂含量14d較7d降低5.1%，21d較14d下降4.1%；差異均極顯著（P＜0.01）。B組肝胰體比14 d較7d降低9.1%，21d較14d降低了11.2%，體脂含量14d比7d降低了2.1%，21d比14d降低了13.3%；肝脂含量14d較7d降低6.0%，21d較14d降低7.9%，差異均極顯著（P＜0.01）。C組肝胰體比14d較7d降低5.9%，21d較14d下降10.8%；體脂含量14d較7d降低2.2%，21d較14d下降9.21%；肝脂含量14d較7d降低4.6%，21d較14d降低6.3%；差異均極顯著（P＜0.01）。

對(duì)照組（D組）肝胰體比、體脂含量和肝脂含量均呈上升趨勢(shì)。

2.2.2 各用藥組與對(duì)照組比較不同用藥時(shí)間對(duì)3項(xiàng)指標(biāo)的影響效果 在7、14、21d3個(gè)用藥階段，和對(duì)照組比較肝胰體比、體脂含量和肝脂含量變化，結(jié)果為，用藥7d時(shí)，A組、B組、C組肝胰體比分別下降2.31%、4.48%、4.37%；體脂含量分別下降0.73%、3.67%、1.14%；肝脂含量分別下降1.91%、5.09%、3.82%。用藥14d時(shí)，A 組、B組、C組肝胰體比分別下降5.58%、14.06%、10.48%；體脂含量分別下降4.37%、7.29%、4.37%；肝脂含量分別下降8.17%、11.94%、9.43%；用藥21d時(shí)，A組、B組、C組肝胰體比分別下降18.87%、24.81%、21.01%；體脂含量分別下降 13.47%、21.98%、15.06%；肝脂含量分別下降 12.50%、19.34%、15.62%。L－肉堿組對(duì)3項(xiàng)指標(biāo)的影響效果最為顯著，膽汁酸、肝膽利康不及L－肉毒堿效果顯著。

2.2.3 用藥組組間效果比較 A組和C組比較，對(duì)體脂的影響效果差異不顯著；A組和C組比較，A組和B組比較，B組和C組比較，其他各項(xiàng)結(jié)果差異極顯著（P＜0.01），由此表明，L－肉毒堿對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)的影響效果最好；膽汁酸對(duì)肝胰體比和肝脂的影響不及L－肉毒堿，優(yōu)于肝膽利康散；肝膽利康散對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)的影響效果不及L－肉堿和膽汁酸（見(jiàn)表3）。

3 結(jié)論與討論

中藥制劑肝膽利康散、L－肉毒堿、膽汁酸可降低患脂肪肝草魚(yú)的肝胰體比、體脂含量和肝脂含量，能夠有效的防治草魚(yú)脂肪肝的發(fā)生和發(fā)展，可作為常用首選藥物使用；L－肉毒堿、膽汁酸降低肝胰體比、體脂含量和肝脂含量的效果優(yōu)于中藥制劑肝膽利康散，中藥制劑的無(wú)公害和長(zhǎng)效優(yōu)勢(shì)還應(yīng)值得注意。

草魚(yú)體脂含量增加，肝臟脂肪蓄積和膽汁顏色發(fā)生變化（肝膽綜合征）可顯著降低草魚(yú)的生長(zhǎng)速度和抗病能力，造成草魚(yú)疫病多發(fā)，死亡率高，對(duì)草魚(yú)的養(yǎng)殖威脅很大。L－肉毒堿、膽汁酸和中藥散劑肝膽利康散能夠促進(jìn)魚(yú)的生長(zhǎng)，降低體脂和肝胰臟脂肪含量。肝膽利康散是中藥散劑，具有保肝、利膽、瀉下、利尿作用。目前，中藥制劑對(duì)魚(yú)類(lèi)體脂、肝脂含量影響的文獻(xiàn)資料較少，程玉冰（2008）［1］等有三黃粉和多維聯(lián)合使用防治草魚(yú)肝膽綜合征的報(bào)道，張盈嬌（2010）［2］有類(lèi)似報(bào)道。試驗(yàn)表明，肝膽利康散具有明顯的降低體脂、肝脂和降低肝胰體比的作用，但和L－肉毒堿和膽汁酸相比效果略差，統(tǒng)計(jì)結(jié)果差異顯著，說(shuō)明中藥制劑效果和化學(xué)制劑相比作用緩慢。L－肉毒堿又稱(chēng)肉毒堿，學(xué)名β－羥基－γ－三甲基丁酸，參與長(zhǎng)鏈脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn)和β－氧化，對(duì)魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)的脂肪代謝具有積極的作用，國(guó)外學(xué)者已有L－肉毒堿對(duì)魚(yú)類(lèi)肉質(zhì)品質(zhì)具有顯著改善的報(bào)道。Santulli（1986）［3］研究報(bào)道，L－肉毒堿能夠顯著降低海鱸魚(yú)肝臟和肌肉里的脂肪的含量；張東鳴（2002）［4］在飼料中200mg/kg L－肉毒堿，鯉魚(yú)的體脂含量顯著下降，和本試驗(yàn)的結(jié)果大致相同。本試驗(yàn)中L－肉毒堿對(duì)體脂下降的速度和對(duì)照組相比在14d差異顯著，說(shuō)明L－肉毒堿對(duì)脂肪的利用是一個(gè)漸進(jìn)過(guò)程，在短時(shí)間內(nèi)（通常意義的治療疾病的1個(gè)療程5 d）難以顯效。

膽汁酸是膽汁的主要成分，具有較強(qiáng)的表面活性，能夠乳化脂肪，擴(kuò)大脂肪與脂肪酶的接觸面積，加速脂肪的消化吸收。劉建強(qiáng)［5］等研究表明，膽汁酸還可以幫助排出體內(nèi)的有害物質(zhì)，降低血漿內(nèi)毒素水平；周書(shū)耘［6］2010年研究在軍曹魚(yú)的飼料中添加膽汁酸，對(duì)魚(yú)的生長(zhǎng)、飼料系數(shù)和肝脂含量有顯著影響，本試驗(yàn)結(jié)果與此一致，只是在降低肝脂肪比方面和L－肉毒堿有顯著差異。試驗(yàn)結(jié)果和資料表明，中藥制劑肝膽利康散等和L－肉毒堿均能降低肝胰體比、肝脂含量和體脂含量，對(duì)防治魚(yú)類(lèi)脂肪肝有較好效果，應(yīng)進(jìn)一步在聯(lián)合用藥方面進(jìn)行研究和探討。

［1］ 程玉冰，潘庭雙，侯冠軍.不同中草藥添加劑對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)及肝膽綜合癥的影響［J］.安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)，2008，14（23）：146.

［2］ 張盈嬌，謝青，曾曉丹，等.飼料中添加“健肝散”對(duì)丁魚(yú)歲魚(yú)脂肪肝的作用 ［J］.水生態(tài)學(xué)雜志，2010，3（3）：94－97.

［3］ Santulli.A Effect of supplemental dietary carnitine on growth and lipid metabolish of hatchery－reared sea bass［J］.Aquaculture，1986，59：177－186.

［4］ 張東鳴，黃權(quán)，周景祥.不同蛋白質(zhì)水平條件下，L－肉堿對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)和肌肉營(yíng)養(yǎng)成分的影響［J］.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，24（1）：82－87.

［5］ 劉建強(qiáng)，張志堅(jiān)，王雯.膽汁酸對(duì)肝硬化大鼠腸道細(xì)菌移位和內(nèi)毒素血癥的影響［J］.福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，40（3）：231－233.

［6］ 周書(shū)耘，劉永堅(jiān)，梁海鷗，等.飼料中添加膽汁酸對(duì)軍曹魚(yú)生長(zhǎng)及體組成的影響［J］.南方水產(chǎn)，2010，4（6）：22－25.