陳 蓉,張建榮,鄧長林,李明杰,程家球,金 鈴,陳 楠,章小小,王國棟
(江蘇省南京市紅山森林動物園獸醫(yī)院,江蘇 南京210028)
孔雀具有較高的觀賞價值,成為動物園主要飼養(yǎng)的禽類之一。2009年,某動物園出現(xiàn)孔雀痛風[1]。2011年12月,該園剛引進一群3月齡孔雀,突然出現(xiàn)呼吸癥狀并迅速死亡,發(fā)病率為100%,死亡率為50%。經(jīng)臨床剖檢和實驗室診斷,初步診斷為禽痛風并發(fā)敗血性大腸桿菌感染。
2011年12月,某動物園引進的48只3月齡孔雀,突然出現(xiàn)甩脖、張口呼吸、嗜睡等臨床癥狀,發(fā)病率達到100%。病死孔雀剖檢后,均發(fā)現(xiàn)氣管有痰樣栓塞,心臟、肝臟和腎臟有大量石灰樣沉著物,心冠脂肪出血,肌胃內(nèi)膜條狀出血,腎臟腫大,腸道少量出血點。連續(xù)5d注射阿米卡星、腎腫解毒藥添加于飲水,并減少蛋白質飼料比例后,基本控制住病情。至此,其死亡率達到50%(24/48)。
2.1 細菌分離鑒定及藥敏試驗 無菌取肝、脾、心接種至血平板中,37℃培養(yǎng)24h。從心臟分離出表面光滑,邊緣整齊,白色、中等大小的溶血菌落。該菌在麥康凱平皿上為紅色菌落。經(jīng)革蘭染色鏡檢,為陰性桿菌;經(jīng)生化試驗,該菌發(fā)酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、甘露醇,并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,M.R.試驗陽性,V-P試驗陰性,不分解尿素,不產(chǎn)生硫化氫。以上結果,表明分離出溶血性大腸桿菌。
將病菌接種至血平皿,并選取常規(guī)藥敏紙片貼于平皿上,37℃培養(yǎng)16h后觀察。結果顯示,只有阿莫西林、阿米卡星能產(chǎn)生較為明顯的抑菌圈,其他藥敏紙片均沒有形成抑菌圈。
2.2 病毒檢測 無菌取心臟、肝、脾和腎等病料研磨離心后,接種11日齡SPF雞胚37℃孵育,另設無菌生理鹽水接種雞胚為對照。每6h照蛋1次,收取尿囊液并觀察雞胚病變。盲傳雞胚4代,結果顯示,均未出現(xiàn)雞胚出血、死亡、蜷曲胚、侏儒胚等異?,F(xiàn)象,收取尿囊液也無血凝性。
2.3 病理切片觀察 無菌取心、肝和腎臟等病料用10%甲醛溶液進行固定后,制作石蠟切片,H.E.染色并在光學顯微鏡下觀察各臟器的病理變化。切片觀察結果,顯示心肌細胞形態(tài)結構正常,心外膜見片狀炎性滲出及炎癥細胞浸潤(見中插彩版圖1)。肝臟組織內(nèi)見多處團塊狀分布的紅色絮狀物,周圍見多核巨細胞反應,局部見淤膽(見中插彩版圖2)。腎組織也見多處團塊狀分布的紅染絮狀物,周圍也見多核巨細胞反應,局部出現(xiàn)肉芽腫,多數(shù)腎小管內(nèi)見紅染的蛋白管型(見中插彩版圖3、4)。
3.1 禽痛風是由于機體尿酸產(chǎn)生或排泄異常,導致高尿酸血癥,并以尿酸鹽沉積在關節(jié)、胸腹腔等臟器表面和其他間質組織中的一種疾病,臨床有內(nèi)臟型和關節(jié)型兩種[3]??兹竿达L的報道中以內(nèi)臟型為主[1-2]。該群孔雀均發(fā)現(xiàn)腎臟腫大明顯,同時尿酸鹽主要沉積于心、肝和腎等內(nèi)臟器官,并未在關節(jié)處沉積。在腎臟病理切片中,局部出現(xiàn)肉芽腫,這與禽痛風病理切片的報道相同[7],表明該群孔雀患有內(nèi)臟型痛風。
引起禽痛風的病因較多,如遺傳因素、高蛋白質飼料、傳染性因素等[3]。而引起孔雀痛風多因攝入過多的蛋白質飼料[1-2]。此次,飼料的粗蛋白含量正常(不高于17%)。該群孔雀隔離飼養(yǎng),不與游客接觸,不存在之前該動物園報道游客投喂高蛋白食物的現(xiàn)象[1]。圈養(yǎng)孔雀常為終生飼養(yǎng),活動場所較小,導致運動少,容易囤積脂肪。因此,其飼料中蛋白質比例是否需要降低標準;由于剛從外地引進,是否存在潛在的傳染性因素導致痛風的發(fā)生,都還有待探查。
3.2 孔雀感染大腸桿菌的報道較多,臨床上多與新城疫混合感染,并造成嚴重損失[4-5]。該園區(qū)在孔雀發(fā)病前,已注射禽流感、新城疫疫苗,但未曾監(jiān)控抗體水平。2005年,Shengwang Liu等從健康孔雀體內(nèi)分離出雞傳染性支氣管炎病毒[6],而該病毒是禽痛風的主要病因之一[3]。此次,群體均表現(xiàn)呼吸道癥狀和尿酸鹽沉積,發(fā)病率、死亡率較高,因此及時排除病毒病是本次診斷的關鍵之一。本次病毒檢測,主要通過傳統(tǒng)雞胚分離方法,排除以上禽流感、新城疫、雞傳染性支氣管炎3種病毒病,對于疾病治療明確了方向。
3.3 此次運用細菌分離培養(yǎng)及病理切片的方法進行診斷,了解了病菌在臟器中的分布。肝、腎存在紅色絮狀物,結合細菌培養(yǎng)結果,表明該絮狀物為大腸桿菌。該菌引起心、肝臟、腎臟炎癥反應,其中腎臟炎癥較嚴重。以上表明,大腸桿菌在感染孔雀后,已經(jīng)通過血液侵入到全身,形成較為嚴重的敗血癥。另外,由存在紅染的蛋白管型現(xiàn)象,這表明腎功能障礙較為嚴重。這種腎功能障礙,一方面加重機體負擔,另一方面不利于抗生素治療,使得本次混合感染的發(fā)病率、死亡率均高于孔雀單獨感染大腸桿菌或禽痛風的報道[4-5]。在平時飼養(yǎng)過程中,控制飼料蛋白質比例,適當增加粗纖維,增強動物抵抗力,同時做好環(huán)境衛(wèi)生工作。在暴發(fā)大腸桿菌病時,要根據(jù)藥敏試驗制定用藥方案,避免耐藥性的產(chǎn)生。在治療禽痛風時,要注意保肝護腎。
[1] 鄧長林,馬小萍,李明杰,等.孔雀痛風的診治[J].養(yǎng)禽與禽病防治,2010,9:39.
[2] 王玉田,巴宏宇,石英男,等.孔雀痛風的診斷與治療[J].養(yǎng)禽與禽病防治,2008,4:23.
[3] 雷鵬,郭小權,曹華斌,等.禽痛風的研究進展[J].中國家禽,2011,33(20):48-51.
[4] 崔煥忠,周佰祥,張輝,等.孔雀致病性大腸桿菌的分離鑒定及藥敏試驗[J].中國獸醫(yī)雜志,2011,47(10):33-34.
[5] 賈松濤,劉星,宋慶華,等.孔雀新城疫繼發(fā)大腸桿菌病的診治[J].中國畜牧獸醫(yī),2011,38(12):205-206.
[6] Shengwang Liu,Jianfei Chen,Jinding Chen,etal.Isolation of avian infectious bronchitis coronavirus from domestic peafowl(Pavo cristatus)and teal(Anas)[J].Journal of General Virology,2005,86:719-725.
[7] 王龍濤,葛晨霞,賈博寅,等.肉雞痛風病的診斷及病理形態(tài)學觀察[J].中國畜牧獸醫(yī),2010,37(10):181-182.