高莉囡，王海波，吳 丹，淡以銳 (吉林醫(yī)藥學院附屬醫(yī)院檢驗科，吉林 吉林 132013)

化學發(fā)光免疫分析(chemiluminescence immunoassay，CLIA)，是 Schrpeder等學者于1978年將放射免疫分析(RIA)和酶聯(lián)免疫分析(EIA)的基本原理相結合，應用吖啶酯化學發(fā)光信號作為示蹤建立和發(fā)展起來的分析法，具有超微量分析的靈敏度和高強度的特異性，以其方法的靈敏性和特異性獨領風騷于醫(yī)學檢驗領域的各種方法之中［1］。本實驗應用CLIA法檢測3組(甲亢組40人、甲低組40人和甲功正常組40人)病人血清游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、血清游離四碘甲狀腺原氨酸(FT4)、促甲狀腺素(TSH)、甲狀腺球蛋白(TG)、甲狀腺微粒體抗體(TMA)和甲狀腺球蛋白抗體(TGA)的含量，探討檢測結果的臨床意義。同時將3組血清在RIA法儀器上進行再檢測，觀察兩種儀器之間的差異性。兩種儀器和兩種方法均為全自動封閉式檢測?，F(xiàn)將檢測結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 資料

收集吉林醫(yī)藥學院附屬醫(yī)院內分泌科住院或門診病人血清標本，先經(jīng)CLIA法檢測甲狀腺激素和抗體(FT3、FT4、TSH、TG、TMA 和 TGA)的含量。挑選其結果正常范圍和甲亢、甲低的標本在同日用RIA法測定同樣項目，整理收集檢測結果。

1.2 方法

將所選擇樣本由具有專業(yè)資質的技術人員按RIA法和CLIA法分別進行操作，以保證結果的一致性與方法操作的可靠性。儀器及試劑分別為RIA分析儀(西安核醫(yī)學儀器廠，F(xiàn)J2003PS r放射免疫分析儀，試劑由山東3V生物試劑公司提供);CLIA分析儀(意大利產(chǎn)化學發(fā)光自動分析儀MAGLUMI 2000型，試劑為原廠配套產(chǎn)品)。

2 結果

用RIA法和CLIA法同時測定甲亢、甲低及甲功正常組各40人，共計120人份甲狀腺激素和抗體的含量，將檢測結果應用SPSS11.0軟件進行處理，結果以平均值和標準差(s)表示，P＞0.05無統(tǒng)計學意義，詳見表1。

兩種方法檢測結果的相關性分析，采用線性回歸分析。以兩種方法間相關系數(shù)r2作為判斷兩種測定方法一致性的標準，實驗數(shù)據(jù)用Excel表以X-Y作圖，添加趨勢線，得出線性回歸方程及相關系數(shù)r2值，經(jīng)統(tǒng)計分析得出，用CLIA法與RIA法檢測甲亢組、甲低組和正常組甲狀腺激素及相關抗體，兩種方法其結果具有高度的相關性，相關系數(shù)(r)均值為0.982。

表1 兩種方法分別檢測三組病人甲狀腺激素及抗體結果的比較(s，n=40)

表1 兩種方法分別檢測三組病人甲狀腺激素及抗體結果的比較(s，n=40)

*:與CLIA組比較，P＜0.05

組 別 FT3(pg/mL)FT4(pg/mL)TSH(uIU/mL)TG(ng/mL)TMA(IU/mL)TGA(IU/mL)RIA甲亢組 12.6±2.9* 68.6±11.5* 0.04±0.01* 6.7±1.3* 13.1±1.8* 21.4±3.6*9.4±1.8 RIA甲低組 1.9±1.1* 6.5±1.9* 98.7±25.6* 7.3±1.6* 11.5±1.3* 18.5±3.0*RIA正常組 3.8±1.4* 14.9±2.8* 4.73±1.08* 4.4±1.0* 10.5±1.4* 9.9±1.7*CLI甲亢組 11.7±2.7 67.5±12.8 0.03±0.01 6.6±1.4 12.9±1.8 20.5±3.3 CLIA甲低組 1.9±1.2 5.9±2.1 96.6±26.8 7.2±1.6 10.9±1.3 18.1±3.1 CLI正常組 3.7±1.5 13.7±2.2 4.46±1.05 4.5±1.1 10.0±1.4

3 討論

CLIA法具有RIA和EIA法的超微量分析的靈敏度與高強度的特異性，實現(xiàn)了對人類內分泌激素及一切具有生物活性物質的微量分析的崇高愿望。超微量檢測分析法源于20世紀60年代和70年代著名學者Yalow、Berson和Schrpeder等的貢獻。該方法具有簡便、快捷、靈敏、準確、可定位、定量、定性等優(yōu)點，開創(chuàng)了超微量檢測技術的新紀元［2］。該方法具有最佳的檢測效果、最高的檢測精度、最快的檢測速度，是承繼放射免疫、酶聯(lián)免疫、普通化學發(fā)光技術之后的新一代標記免疫分析技術。由于檢測的靈敏度高，適合于人體內分泌激素、腫瘤標志物、生殖激素等微量物質的檢測，檢測量可達到微微克(pg)水平。由于激素的微小變化都會導致人體功能性或病理性改變，盡早發(fā)現(xiàn)它們的某種微妙變化，對于疾病的早期診斷、治療方案的確定或療效的評估與預后判定都具有重要的臨床意義和預測價值。

CLIA法具有比RIA和IRMA法更高的分析性能［3-4］，CLIA法所用標記物相當穩(wěn)定，有效期可達一年，檢測過程為全自動化運行。人為因素等操作誤差相對非常低。這樣即顯示了該方法的靈敏性、特異性和全自動化分析儀的先進性，成為醫(yī)學檢驗超微量分析領域的領頭軍，具有里程碑意義［2］。

由于CLIA法具有自動檢測運行快、耗時短、檢測過程簡便等特點，方便了急診或門診病人及時得到結果。對于一些懷疑患有甲狀腺功能異常又伴隨低鉀血癥或房顫的病人，若能快速有效的檢測甲狀腺功能與激素含量并及時發(fā)出報告，則可以為臨床醫(yī)生盡早做出鑒別診斷，為確診與避免誤診提供了可靠的依據(jù)。對曾經(jīng)患甲亢或甲低的病人，由于長期用藥，而出現(xiàn)用藥過量或用藥不足時，應用CLIA法可提供快速檢測通道，在1～1.5 h后出報告，為及時給予患者調整用藥劑量提供了極大幫助，同時也幫助醫(yī)院緩解了看病難、看病慢的呼聲，提供及時服務。

文獻指出，由于CLIA法的定量精細、靈敏度高、檢測范圍廣(20～300，10～1000 IU/mL)從而更有利于病情判斷和療效觀察，表1結果表明，在甲功亢進病人中，F(xiàn)T3、FT4結果明顯升高，而TSH結果小于正常范圍時，一部分患者TMA和TGA結果升高值在10% ～20%之間;甲低病人中，F(xiàn)T3、FT4結果明顯降低，TSH結果大于正常值6～10倍或以上者占30% ～40%。甲功正常無明顯癥狀的人群中抗體陽性率約為3.5% ～4.5%，女性高于男性，與文獻報道很接近［5］。一般資料認為甲狀腺自身抗體的產(chǎn)生與甲狀腺內淋巴細胞浸潤有關，是發(fā)生甲狀腺功能損傷的重要危險因素［6］。同時也發(fā)現(xiàn)，抗體陽性者中甲亢或甲低的比率顯著高于抗體陰性者。彩超檢查甲狀腺正常，而甲狀腺抗體出現(xiàn)陽性同時伴隨TSH檢測值異常的病人，5年隨訪發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)甲功能異常的發(fā)生率顯著增加。甲狀腺激素抗體陽性者而甲功能正常人群中，預示著有潛在的甲狀腺功能異常的病人出現(xiàn)。文獻指出，TGA的升高主要見于自身免疫性甲狀腺疾病，如橋本甲狀腺炎、Graves病等［7］。風濕和類風濕性疾病也有升高現(xiàn)象。

綜合分析認為，CLIA法檢測甲狀腺激素及其抗體，對單純性甲狀腺疾病或合并其他疾病的診斷與鑒別診斷，是一項快捷、精確的檢測方法，它完全避免了RIA法的廢棄物污染、試劑有效期短等缺點。CLIA法是當今超微量檢測法中的較好方法。

［1］李 龍，杜明華.檢驗核醫(yī)學［M］.南京:東南大學出版社:2009:2-3.

［2］尹伯元.放射免疫分析在醫(yī)學中的應用［M］.北京:原子能出版社，2010:1-2.

［3］Iervasi A，Zucchelli G C，Turchi S，et al.Analytical and clinical performance of an automated chemiluminescent immunoassay for direct renin measurement:comparison with PRA and aldosterone assays［J］.Immuno-anal Biol Special，2005，20(4):257-262.

［4］Zhang Y X，Zhang Z J，Yang F.A sensitive immunoassay for determination of hepatitis B surface antigen and antibody in human serum using capillary electrophoresis with chemiluminescence detection［J］.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci，2007，857(1):100-107.

［5］李玉珠，單忠艷，吳海燕，等.甲狀腺過氧化物酶抗體和甲狀腺球蛋白抗體陽性臨界值的確定及其臨床意義［J］.中華檢驗醫(yī)學雜志，2006.29(9):780-783.

［6］Brown T R，Zhao G，Palmer K C，et al.Thyroid injury，autoantigen availability，and the initiation of autoimmune thyroiditis.Autoimmunity，1998，27(1):1-12.

［7］盧桂芝.甲狀腺結節(jié)［J］.中華檢驗醫(yī)學雜志，2011，34(10):957-959.